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武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司

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  • 2021

    10-11

    PriCells: 正常大鼠前脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)

    正常大鼠前脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.細(xì)胞來源:4周齡雄性Wistar或其它品系大鼠;2.清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.4;3.消化液:2mg/ml膠原酶溶液。用DMEM培養(yǎng)液配制,并加入牛血清白蛋白20mg/ml;4.培養(yǎng)液a:DMEM培養(yǎng)液,10%胎牛血清、100IU/ml青霉素、50μg/ml鏈霉素;5.培養(yǎng)液b:在培養(yǎng)液a中補(bǔ)充生物素33μmol/L與泛酸鹽(pantothenate)17μmol/L;6.培養(yǎng)液
  • 2021

    10-11

    PriCells: 正常小鼠腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常小鼠腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.腎組織:取自8周齡健康雌性小鼠;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.0.1%明膠:為生長基質(zhì)成分,在取材前先用它包被培養(yǎng)瓶的生長面;4.消化液:0.1%胰蛋白酶溶液;5.培養(yǎng)液:DMEM培養(yǎng)液,補(bǔ)充20%的胎牛血清、α-成纖維細(xì)胞生長因子(α-FGF)2μg/ml、慶大霉素100μg/ml、青霉素100IU/ml、鏈霉素100μg/ml;6.用于細(xì)胞鑒定的抗體:
  • 2021

    10-11

    PriCells: 正常兔肺泡巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常兔肺泡巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.肺泡巨噬細(xì)胞來源:體重為2—3kg的成年兔。也可使用成年大鼠;2.灌洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.4;3.培養(yǎng)液:MEM培養(yǎng)液,添加谷氨酰胺1mmol/L、卡那霉素100μg/ml、青霉素200IU/ml、鏈霉素200μg/ml、HEPES10mmol/L和10%胎牛血清;4.無菌手術(shù)器械:手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、止血鉗等;實(shí)驗(yàn)方法:1.通過耳緣靜脈給兔子快速注射約4
  • 2021

    10-09

    PriCells: 正常人胚肺成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常人胚肺成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.肺組織:取自妊娠14—18周的胎兒;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.消化液:0.25%胰蛋白酶(pH7.6—7.8),0.02%EDTA溶液;4.培養(yǎng)液:DMEM或RPMI1640,加10%—20%胎牛血清、青霉素100IU/ml、鏈霉素100μg/ml;5.保存液:10%二甲亞砜或10%甘油;6.眼科剪、眼科鑷等無菌消毒手術(shù)器械;7.離心管(15ml、50ml
  • 2021

    10-09

    PriCells: 正常人包皮成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常人包皮成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.細(xì)胞來源:新生兒包皮;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液:兩者比例為1:1,用D-Hanks液配制;4.0.02%大豆胰蛋白酶抑制劑:用DMEM培養(yǎng)液配制;5.生長基質(zhì):人纖維連接蛋白,按10μg/cm2包被培養(yǎng)皿;6.DMEM培養(yǎng)液:DMEM培養(yǎng)基,加10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、鏈霉素100μg/ml;7.D
  • 2021

    10-09

    PriCells: 正常動(dòng)物胸腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常動(dòng)物胸腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.胸腺上皮細(xì)胞來源;一般取材小鼠或手術(shù)切取的兒童之胸腺;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.有血清培養(yǎng)液:可使用RPMI1640培養(yǎng)液,添加10%胎牛血清、谷氨酰胺2mmol/L、丙酮酸鈉1mmol/L、非必需氨基酸1mmol/L、2-巰基yi醇(2-ME)5×10-5mol/L、青霉素100IU/ml、鏈霉素100μg/ml(Schreiberetal.1991)。
  • 2021

    10-09

    PriCells: 正常大兔腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常大兔腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.正常兔大腦皮質(zhì)組織;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.M199培養(yǎng)液(含20%小牛血清、肝素25U/ml、HEPES10mmol/L、100IU/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素);D-Hanks液;0.05%胰蛋白酶溶液;0.05%膠原酶溶液;15%右旋糖苷(用Hanks配制,pH7.4);4.勻漿器、手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷,止血鉗,無菌消
  • 2021

    10-09

    PriCells: 正常大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.大鼠主動(dòng)脈血管;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.培養(yǎng)用液:M199培養(yǎng)液或RPMI1640培養(yǎng)液(含20%小牛血清,pH7.2);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:1,V:V)混合消化液;D-Hanks液、100IU/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素;1%明膠溶液;4.培養(yǎng)器具:培養(yǎng)瓶或皿、白內(nèi)障、眼科剪、鑷子等;培養(yǎng)方法:1.將大鼠頸椎脫臼或頸
  • 2021

    10-08

    PriCells: 正常動(dòng)物腸肥大細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常動(dòng)物腸肥大細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.正常動(dòng)物的腸或者手術(shù)切除標(biāo)本的正常腸組織;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.TE液:Tyrode液加入2mmol/LEDTA。Tyrode液含137mmol/LNaCl、2.7mmol/LKCl、0.36mmol/LNaH2PO4、5.55mmol/L葡萄糖;4.TEA液:TE液加入200mg/L氨芐青霉素、200mg/L慶大霉素和40mg/L甲硝唑;5.TGMD液
  • 2021

    10-08

    PriCells: 正常兔原代晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)方案

    PriCells:正常兔原代晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)方案實(shí)驗(yàn)材料:1.正常兔晶狀體組織;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.注射器;4.培養(yǎng)器具:培養(yǎng)瓶或皿(用多聚賴氨酸包被)、眼科剪、鑷子等;培養(yǎng)方法:1.空氣注射處死大兔,在無菌條件下清除鞏膜外肌肉及結(jié)締組織后將眼球浸入含雙抗的1×PBS(pH7.2)浸泡5min,移入超凈工作臺(tái)內(nèi);2.用含雙抗的1×PBS(pH7.2)沖洗組織3遍,在超凈臺(tái)中環(huán)形剪除角膜放射狀剪開并撕除虹膜
  • 2021

    10-08

    PriCells: 正常小鼠原代破骨細(xì)胞培養(yǎng)方案

    PriCells:正常小鼠原代破骨細(xì)胞培養(yǎng)方案實(shí)驗(yàn)材料:1.正常小鼠乳鼠顱蓋骨組織;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.0.1%Ⅰ型膠原酶;4.培養(yǎng)器具:培養(yǎng)瓶或皿(用多聚賴氨酸包被)、200目不銹鋼網(wǎng)篩、眼科剪、鑷子等;培養(yǎng)方法:1.選用出生1-3天小鼠乳鼠,處死,放入75%酒精中浸泡2—3分鐘,轉(zhuǎn)至超凈工作臺(tái)內(nèi),取顱蓋骨;2.將組織放入含有1×PBS(pH7.2)中沖洗3次;3.用眼科剪將顱蓋骨剪成1×1mm3大小組織
  • 2021

    10-08

    PriCells: 正常人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.嬰兒臍帶;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.培養(yǎng)用液:M199培養(yǎng)液(含20%小牛血清);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:1,V:V)混合消化液;D-Hanks液、100IU/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素;4.培養(yǎng)器具:玻璃插管與輸液膠管,培養(yǎng)瓶或皿、白內(nèi)障、眼科剪、鑷子等;培養(yǎng)方法:1.在無菌條件下,取健康產(chǎn)婦分娩后新鮮的嬰兒臍帶(長20cm
  • 2021

    10-08

    PriCells: 正常大兔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常大兔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.正常大兔主動(dòng)脈;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.培養(yǎng)用液:M199培養(yǎng)液(含20%小牛血清);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:1,V:V)混合消化液;D-Hanks液、100IU/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素;4.培養(yǎng)器具:培養(yǎng)瓶或皿、白內(nèi)障、眼科剪、鑷子等;培養(yǎng)方法:1.將動(dòng)物主動(dòng)脈取出后,用絲線結(jié)扎血管一端,然后用探針頂住該端,將整條血
  • 2021

    09-30

    PriCells: 正常人表皮朗格漢斯細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常人表皮朗格漢斯細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.多來自外科手術(shù)的臨床病人或死亡時(shí)間不超過24h尸體的胸、腹部皮膚;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.培養(yǎng)用液:①RPMI1640*培養(yǎng)液,由RPMI1640培養(yǎng)基添加10%人AB血清、2mol/L谷氨酰胺、50μg/ml慶大霉素和1μg/ml消炎痛;②D-Hanks平衡鹽溶液:無Ca2+和Mg2+,添加慶大霉素50μg/ml;③消化液:為胰蛋白酶溶液,終濃度為0
  • 2021

    09-30

    PriCells: 正常人表皮黑色素細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常人表皮黑色素細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.臨床活檢獲取的正常人皮膚材料或新生兒yin莖包皮;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.黑素細(xì)胞培養(yǎng)液和培養(yǎng)基中各種添加劑的配制:包括以下種類:①胰島素。貯存液為5mg/ml,即將0.5g的胰島素溶于1ml0.01mol/L的HCl液中,雙蒸水加至100ml,過濾除菌、分裝,-70℃下保存6個(gè)月后方可使用。使用時(shí),在500ml培養(yǎng)基中加0.5ml胰島素貯存液,即終濃度
  • 2021

    09-30

    PriCells: 正常大鼠唾液腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常大鼠唾液腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.新生大鼠唾液腺;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.培養(yǎng)用液:DMEM培養(yǎng)液,添加10%的胎牛血清、5μg/ml胰島素、10ng/ml表皮生長因子、50ng/ml氫化可de松、100IU/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素。無Ca2+、Mg2+的D-Hanks液,使用時(shí)添加100IU/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素;4.鼠尾膠原液:先吸取4ml鼠尾膠原溶液放入
  • 2021

    09-30

    PriCells: 正常大兔膽囊上皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常大兔膽囊上皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.2—3月齡的家兔膽囊;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.培養(yǎng)用液:以DMEM/F12為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加10%的胎牛血清、2mmol/L谷氨酰胺、2μg/ml胰島素、10ng/ml表皮生長因子以及100IU/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素。酶消化液為0.125%Ⅳ型膠原酶溶液。組織清洗液為DMEM培養(yǎng)液,并添加200IU/ml青霉素和200μg/ml鏈霉素;也可
  • 2021

    09-30

    PriCells: 正常人組織源性鼻咽上皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常人組織源性鼻咽上皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.一般來自鼻咽癌活檢組織或引產(chǎn)胚胎的鼻咽組織;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.培養(yǎng)基:可使用ROMI1640培養(yǎng)液,添加20%胎牛血清、5μg/ml胰島素、2.7×10-7mol/L氫化可de松。也可用DMEM培養(yǎng)液;4.低血清培養(yǎng)液與無血清培養(yǎng)液:基礎(chǔ)培養(yǎng)液均為DMEM/F12(1:1,V/V)混合液。配置時(shí),添加1.2g/LNaHCO3及15mmol/L
  • 2021

    09-29

    PriCells: 正常大鼠肺泡上皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常大鼠肺泡上皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.正常大鼠的肺組織;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.肺泡灌洗液Ⅰ:140mmol/LNaCl、5mmol/LKCl、2.5mmol/L磷酸緩沖液、10mmol/LHEPES、6mmol/L葡萄糖和0.2mmol/LEDTA。用無菌雙蒸水配制,pH7.4,肺泡灌洗液使用時(shí)須預(yù)溫到37℃;4.肺泡灌洗液Ⅱ:在灌洗液Ⅰ中加入2.0mmol/LCaCl2和1.3mmol/
  • 2021

    09-29

    PriCells: 正常大鼠皮膚肥大細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常大鼠皮膚肥大細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.正常大鼠(體重150g—250g)的皮膚;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.消化液:1g/L膠原酶和1g/L透明質(zhì)酸酶(1:1,v/v)混合消化液,用含10mmol/LHEPES和20%FBS的HBSS配制;4.沖洗液:改良的Tyrode液,含137mmol/LNaCl、2.7mmol/LKCl、0.36mmol/LNaH2PO4、5.55mmol/L葡萄糖、10
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