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武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司

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  • 2021

    09-29

    PriCells: 正常大鼠皮膚肥大細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常大鼠皮膚肥大細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.正常大鼠(體重150g—250g)的皮膚;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.消化液:1g/L膠原酶和1g/L透明質(zhì)酸酶(1:1,v/v)混合消化液,用含10mmol/LHEPES和20%FBS的HBSS配制;4.沖洗液:改良的Tyrode液,含137mmol/LNaCl、2.7mmol/LKCl、0.36mmol/LNaH2PO4、5.55mmol/L葡萄糖、10
  • 2021

    09-29

    PriCells: 正常動(dòng)物肺肥大細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常動(dòng)物肺肥大細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.正常動(dòng)物的肺組織;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.TE液:Tyrode液加入2mmol/LEDTA。Tyrode液含137mmol/LNaCl、2.7mmol/LKCl、0.36mmol/LNaH2PO4、5.55mmol/L葡萄糖;4.TEA液:TE液加入200mg/L氨芐青霉素、200mg/L慶大霉素和40mg/L甲硝唑;5.TGMD液:Tyrode液加入0.
  • 2021

    09-29

    PriCells: 正常大鼠巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常大鼠巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.成年大鼠或小鼠,采用腹腔取材法2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.23.培養(yǎng)基:RPMI1640、Ham’sF12等均適于巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)。大多數(shù)巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)可加10%-40%的血清,小鼠巨噬細(xì)胞加10%小牛血清,用無(wú)血清培養(yǎng)基亦可。新生小牛血清中含有抗體,能刺激巨噬細(xì)胞成熟,也可用乳清蛋白培養(yǎng)4.動(dòng)物解剖臺(tái)或蠟板1個(gè),帶鉤眼科鑷子2支,解剖剪1個(gè),10ml注射器1個(gè),針頭數(shù)支
  • 2021

    09-29

    PriCells: 正常動(dòng)物真皮成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:正常動(dòng)物真皮成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.正常動(dòng)物皮膚2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.23.細(xì)胞培養(yǎng)瓶(T25)4.手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷實(shí)驗(yàn)方法:1.取正常動(dòng)物皮膚,置于小培養(yǎng)皿內(nèi),用PBS漂洗3-4次,以除去表面血污及毛發(fā);2.將洗凈的組織用眼科剪剪切成1mm3左右大小,再用PBS漂洗3次;3.用眼科剪將組織塊移至培養(yǎng)瓶瓶壁,用巴氏管分散均勻,加入全培養(yǎng)液,倒置培養(yǎng)瓶,蓋好瓶蓋置于37℃、
  • 2021

    09-28

    PriCells: 正常大兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)

    PriCells:正常大兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.正常大兔主動(dòng)脈2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.23.消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%膠原酶Ⅰ4.細(xì)胞培養(yǎng)瓶(T25)5.手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷6.網(wǎng)篩(100目)7.離心管(15ml、50ml)實(shí)驗(yàn)方法:1.處死大兔,分離出主動(dòng)脈,放入預(yù)冷的含雙抗的1×PBS(pH=7.2)反復(fù)清洗3次。以洗去表面血絲和粘膜;2.將清洗過(guò)的大動(dòng)脈剪成2.5~3c
  • 2021

    09-28

    PriCells: 正常人乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)

    PriCells:正常人乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.人哺乳期早期或斷奶后乳汁。2.培養(yǎng)液:RPMI1640,15%FBS,10%人血清,50μg/ml霍亂毒素,0.5mg/ml氫化可de松,1mg/ml胰島素。3.HuS(humanserum):血庫(kù)過(guò)期的血清,澳大利亞抗原陰性。5cmNunc塑料培養(yǎng)皿。4.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素,pH7.4。5.培養(yǎng)用液:1mg/ml胰島素(Sigma):用6mmo
  • 2021

    09-28

    PriCells: 正常兔食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)

    PriCells:正常兔食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.大兔的正常食管組織2.6孔培養(yǎng)板:用多聚賴氨酸4℃包被過(guò)夜3.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素,pH7.44.手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷實(shí)驗(yàn)方法:1.處死大兔,取正常食管組織放入含雙抗的PBS(pH=7.2)中反復(fù)清洗3次,以洗去組織表面的血絲及粘液;2.小心的用眼科剪鑷將食管黏膜與黏膜下組織分離;3.分離出的粘膜組織用含雙抗的PBS(pH=7.2
  • 2021

    09-28

    PriCells: 小鼠乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)

    PriCells:小鼠乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.10-12周齡妊娠小鼠乳腺組織2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素,pH7.43.FBS、含5%牛血清白蛋白(BSA)的PBS液或DMEM4.0.05%Ⅰ型膠原酶50ml、0.05%蛋白酶50ml、0.1%DNaseⅠ型、結(jié)晶紫(0.1%)/枸櫞酸(0.1mol/L)5.培養(yǎng)液:血清培養(yǎng)液(DMEM或F12+10%FBS)、無(wú)血清培養(yǎng)基(DMEM:F12為1:1
  • 2021

    09-28

    PriCells: 正常人支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)

    PriCells:正常人支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.手術(shù)切除的含支氣管的正常肺組織2.胰蛋白酶/EDTA液:0.05%胰蛋白酶,0.5mmol/LEDTA3.6孔培養(yǎng)板:用多聚賴氨酸包被4.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS(pH=7.2),添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素,pH7.45.手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷6.離心管(15ml、50ml)實(shí)驗(yàn)方法:1.將分離的兩片肺葉組織用含雙抗的1×PBS(pH=7.2)反復(fù)清洗幾次;2.
  • 2021

    09-27

    PriCells: 正常人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)

    PriCells:正常人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.手術(shù)切除的正常肺組織2.胰蛋白酶/EDTA液:0.05%胰蛋白酶,0.5mmol/LEDTA3.6孔培養(yǎng)板:用多聚賴氨酸包被4.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS(pH=7.4),添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素,pH7.45.手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷6.離心管(15ml、50ml)實(shí)驗(yàn)方法:1.將肺組織至于無(wú)菌的培養(yǎng)皿中用含雙抗的1×PBS(pH=7.4)清洗若干次至無(wú)明顯血
  • 2021

    09-27

    PriCells: 正常人食管黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)

    PriCells:正常人食管黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.一般采用活檢時(shí)獲得的正常食管黏膜組織2.不含Ca2+和Mg2+的1×HBSS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和1.5g/L慶大霉素,pH7.43.手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷4.離心管(15ml、50ml)實(shí)驗(yàn)方法:1.食管黏膜組織放入HBSS中,在解剖顯微鏡下分離黏膜與黏膜下組織,用HBSS沖洗2-3次,將黏膜剪成約1mm3大小的組織塊。2.1塊/cm2的密度將植塊放入培養(yǎng)皿中,上皮面朝下;也可在培養(yǎng)皿內(nèi)
  • 2021

    09-27

    PriCells: 正常人角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)

    PriCells:正常人角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.正常人角膜移植供體角膜2.胰蛋白酶/EDTA液:0.05%胰蛋白酶,0.5mmol/LEDTA3.KGM:無(wú)血清角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)液,添加0.15mmol/L鈣、0.1ng/ml人上皮生長(zhǎng)因子、5mg/ml胰島素、0.5mg/ml氫化可de松和30mg/ml牛垂體提取物;MEM;PBSA;胎牛血清4.FNC:10mg/ml纖連蛋白、35ug/ml膠原蛋白和100mg/mlBSA(bovineserumalbumin)。BSA作為穩(wěn)定劑5.6孔培
  • 2021

    09-27

    PriCells: 人角質(zhì)形成細(xì)胞的分離培養(yǎng)

    PriCells:人角質(zhì)形成細(xì)胞的分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.早產(chǎn)兒或死亡胎兒的皮膚,也可用手術(shù)取下的成體皮膚2.1000000U/L中性蛋白酶,0.25%胰蛋白酶3.MEM和HBSS混合液,添加20mmol/LHEPES、200000IU/L青霉素和200mg/L鏈霉素和1.5g/L慶大霉素4.手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷5.離心管(15ml、50ml)實(shí)驗(yàn)方法:1.取厚1.5mm的皮片,用4℃MEM和HBSS混合液沖洗獲取的皮膚材料3次。將皮膚置于培養(yǎng)皿中,用鑷子和眼科剪仔細(xì)分離皮膚和皮
  • 2021

    09-27

    PriCells: 人真皮復(fù)合培養(yǎng)法

    PriCells:人真皮復(fù)合培養(yǎng)法實(shí)驗(yàn)材料:1.早產(chǎn)兒或死亡胎兒的皮膚,也可用手術(shù)取下的成體皮膚2.1000000U/L中性蛋白酶,0.25%胰蛋白酶3.MEM和HBSS混合液,添加20mmol/LHEPES、200000IU/L青霉素和200mg/L鏈霉素和1.59g/L慶大霉素,HBSS4.手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷5.不銹鋼網(wǎng)6.離心管(15ml、50ml)實(shí)驗(yàn)方法:1.真皮的制備(1)取厚1.5mm的皮片,放入4℃用MEM和HBSS混合液浸洗,切成6cm×2cm的皮條。(2)
  • 2021

    09-26

    PriCells: 動(dòng)物氣管和支氣管假?gòu)?fù)層纖毛柱狀上皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:動(dòng)物氣管和支氣管假?gòu)?fù)層纖毛柱狀上皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.大鼠或兔的氣管和支氣管2.0.1%中性蛋白酶或0.125%胰蛋白酶和0.01%EDTA混合消化液3.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS(pH7.4),含青霉素100u/ml和鏈霉素100μg/ml,pH7.44.解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷5.一次性注射器(1ml或5ml)6.200目不銹鋼網(wǎng)篩7.離心管(15ml、50ml)實(shí)驗(yàn)方法:1.在無(wú)菌條件下取氣管或支氣管,用PBS反復(fù)沖洗,以除去血液和粘液。2.將氣管或支氣
  • 2021

    09-26

    PriCells: 動(dòng)物子宮頸部上皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:動(dòng)物子宮頸部上皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.動(dòng)物子宮頸部穿刺或切除所得組織2.3T3成纖維細(xì)胞3.0.25%胰蛋白酶/EDTA4.KCM:DMEM中添加10%FBS、0.5ug/ml氫化可de松和1×10-10mol/L霍亂毒素5.EGF:100ugEGF溶于1ml無(wú)菌的UPW中。按100ul分裝,在-20℃條件下儲(chǔ)存。用10ml的含有血清的培養(yǎng)液配制100ug/mlEGF工作液,按100ul分裝,在4℃儲(chǔ)存。使用時(shí),用含有血清的培養(yǎng)液稀釋(1:100)成最終濃度(10ng/ml)
  • 2021

    09-26

    PriCells: 動(dòng)物胃黏膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:動(dòng)物胃黏膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.動(dòng)物胎體胃黏膜,胃潰瘍或胃癌手術(shù)切除的正常胃黏膜組織2.1%Ⅳ膠原蛋白或1%明膠鋪培養(yǎng)瓶,4℃冰箱內(nèi)過(guò)夜,使用前在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2h,然后用培養(yǎng)液浸洗1次。3.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素,pH7.44.250000U/LⅠ型膠原酶或125000U/LⅠ型膠原酶和0.5%透明質(zhì)酸酶,DMEM配置5.解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷6.離心管(15ml、
  • 2021

    09-26

    PriCells: 動(dòng)物腸黏膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)

    PriCells:動(dòng)物腸黏膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.動(dòng)物胎體小腸黏膜或死亡胎兒的小腸黏膜2.1%Ⅳ膠原蛋白鋪培養(yǎng)瓶,放超凈工作臺(tái)上干燥3.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素,pH7.44.300000U/LⅪ型膠原酶和0.1g/LⅠ型中性蛋白酶混合消化液,DMEM配置5.解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷6.離心管(15ml、50ml)實(shí)驗(yàn)方法:1.取妊娠17-19d胎鼠,放入70%乙醇中消毒1min。經(jīng)腹正中切口
  • 2021

    09-26

    PriCells: 動(dòng)物淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的分離Ⅰ

    PriCells:動(dòng)物淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的分離基本方案1:灌注消化法實(shí)驗(yàn)材料:1.哺乳動(dòng)物胸導(dǎo)管淋巴管2.1×PBS,含青霉素100u/ml和鏈霉素100μg/ml,pH7.43.0.2%Ⅰ型膠原酶4.眼科剪,眼科鑷5.慕絲線(7號(hào)線)、細(xì)鐵絲6.離心管(15ml、50ml)實(shí)驗(yàn)方法:1.處死動(dòng)物后,打開胸腔,分離胸導(dǎo)管,在胸導(dǎo)管上端結(jié)扎,切取10-15cm的一段。將胸導(dǎo)管放入預(yù)冷PBS中漂洗。2.在解剖顯微鏡下,用眼科剪和眼科鑷剝除外膜的脂肪和纖維組織,然后用PBS反復(fù)沖洗管腔。3.將胸導(dǎo)管移入含
  • 2021

    09-24

    PriCells: 動(dòng)物淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的分離Ⅱ

    PriCells:動(dòng)物淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的分離基本方案2:植塊培養(yǎng)法實(shí)驗(yàn)材料:1.哺乳動(dòng)物胸導(dǎo)管或腸系膜淋巴管2.1%明膠鋪底,置超凈臺(tái)晾干3.1×PBS,含青霉素100u/ml和鏈霉素100μg/ml,pH7.44.眼科剪,眼科鑷5.慕絲線(7號(hào)線)、細(xì)鐵絲6.離心管(15ml、50ml)實(shí)驗(yàn)方法:1.處死動(dòng)物后,打開胸腔,分離胸導(dǎo)管,在胸導(dǎo)管上端結(jié)扎,切取10-15cm的一段。將胸導(dǎo)管放入預(yù)冷PBS中漂洗。2.在解剖顯微鏡下,用眼科剪和眼科鑷剝除外膜的脂肪和纖維組織,然后用PBS反復(fù)沖洗3次。用
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