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2021
10-21PriCells: 腫瘤組織源性原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)
PriCells:腫瘤組織源性原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)腫瘤組織源性原代細(xì)胞分離的常用方法：組織塊法、酶消化法、鉭網(wǎng)法、脫落細(xì)胞法。腫瘤組織源性原代細(xì)胞對(duì)藥物篩選體系的益處：（1）腫瘤組織源性原代細(xì)胞培養(yǎng)需要的腫瘤組織較少;（2）不影響其他病理檢查對(duì)腫瘤標(biāo)本的需求；（3）腫瘤組織源性原代細(xì)胞培養(yǎng)可完成多種化療藥敏評(píng)價(jià)；（4）腫瘤組織源性原代細(xì)胞可評(píng)估藥物的耐藥性；（5）腫瘤組織源性原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果成功評(píng)價(jià)率高于90－95％；（6）腫瘤組織源性原代細(xì)胞具有很好的結(jié)果重復(fù)性；（7）腫瘤組織源性原代細(xì)胞體外實(shí)2021
10-21PriCells: 正常人角膜上皮細(xì)胞和干細(xì)胞的分離
PriCells:正常人角膜上皮細(xì)胞和干細(xì)胞的分離實(shí)驗(yàn)材料：1.完整的人角膜；2.GMF-SalineG；3.中性蛋白酶Ⅱ，1.2U/ml（用DMEM/F12/GASP稀釋2.4U中性蛋白酶Ⅱ）；4.胰蛋白酶/EDTA；5.DMEM/F12/GASP；6.DEME/F12/2FB/GASP：DMEM/F12/GASP含2%FBS；7.CMF/GASP；8.LSC培養(yǎng)基；9.彎虹膜剪，11cm（4-3/8in）；10.Jeweler’s鑷，10cm（4in）；11.角膜剪，19mm刃，尖頭；12.2021
10-20PriCells: Isolation of human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells （hADSCs）
PriCells:Isolationofhumanadiposetissue-derivedmesenchymalstemcells(hADSCs)PDF下載Adiposetissueswerewashedatleastthreetimeswithsterilephosphate-bufferedsalineａndtreatedwithPriCellsIsolationKitatintermittentshaking.Thefloatingadipocyteswereseparatedfromt2021
10-20PriCells: Introduction of Isolation and Culture of Human Alveolar Epithelial Cells
PriCells:IntroductionofIsolationａndCultureofHumanAlveolarEpithelialCells1.1.BackgroundThehumanlungconsistsofmorethan40differentcelltypes.Themorphologyａndfunctionofconstituentcellsoftheproximal,conductingairwayepitheliumdifferdrasticallyfromthoseofthe2021
10-20PriCells: 正常人羊膜細(xì)胞（HAM）原代細(xì)胞培養(yǎng)
PriCells:正常人羊膜細(xì)胞（HAM）原代細(xì)胞培養(yǎng)PDF下載實(shí)驗(yàn)材料：1.人胎盤(pán)；2.PBSA/GASP：含抗生素的PBSA（慶大霉素，50μg/ml；兩性霉素B，1.25μg/ml；鏈霉素100μg/ml；青霉素100U/ml）；3.丙三醇；4.含50%丙三醇的DMEM；5.胰蛋白酶/EDTA；6.Millicell微孔膜組織培養(yǎng)插片；7.塑料刮片和無(wú)菌棉拭子；實(shí)驗(yàn)方法：1.用PBSA/GASP清洗組織；2.分離人羊膜，用戴手套的手從胎盤(pán)上將羊膜鈍性分離下來(lái)，分離出的羊膜薄層包括上皮細(xì)胞，2021
10-20PriCells: 正常小鼠腹股溝脂肪墊獲取脂肪源干細(xì)胞
PriCells:正常小鼠腹股溝脂肪墊獲取脂肪源干細(xì)胞PDF下載實(shí)驗(yàn)材料：1.Hank’s緩沖鹽溶液（HBSS）；2.ASC培養(yǎng)基：含10%胎牛血清的DMEM，添加1%的P/S；3.膠原酶溶液：100mlHank’s緩沖鹽溶液中加入1g牛血清白蛋白和0.1gⅡ型膠原酶；4.聚乙烯吡咯酮碘溶液；5.陪替氏培養(yǎng)皿，9cm；離心管，50ml；組織培養(yǎng)瓶，25cm2；6.剪刀（2把），鑷子（2把）；7.PBSA；8.小鼠，4—6只；9.麻醉劑：三溴乙醇；實(shí)驗(yàn)方法：1.37℃水浴中預(yù)熱HBSS和脂肪源干細(xì)2021
10-20PriCells: 正常人甲狀腺細(xì)胞的原代培養(yǎng)方法
PriCells:正常人甲狀腺細(xì)胞的原代培養(yǎng)方法PDF下載實(shí)驗(yàn)材料：1.甲狀腺細(xì)胞材料來(lái)源：人孤立性良性甲狀腺腺瘤旁邊正常組織、甲狀腺功能亢進(jìn)甲狀腺組織或甲狀腺腫瘤組織均可作為研究的材料；2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素，pH7.2；3.培養(yǎng)用液：DMEM培養(yǎng)液，含15%—20%小牛血清、0.6mmol/L的HEPES、12.5mmol/L的谷氨酰胺、100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素。用5.6%的NaHCO3溶液調(diào)節(jié)pH值2021
10-192021
10-19PriCells: 藻紅蛋白標(biāo)記抗體的方法﹠PE-標(biāo)記蛋白A方法
PriCells:藻紅蛋白標(biāo)記抗體的方法﹠PE-標(biāo)記蛋白A方法藻紅蛋白標(biāo)記抗體的方法：1.巰基化藻紅蛋白（PE）的制備；（1）將600μl濃度為15.5mg/ml的鹽酸巰醇亞胺加到1.2ml濃度為3.6mg/ml的PE中；（2）將以上混合液和1.2mlpH6.8的PB混合，而后裝入透析袋置入50mmol/LpH6.8的PB中于4℃透析，過(guò)夜；（3）再換用pH7.5PB透析6h。每個(gè)PE分子中可結(jié)合8個(gè)巰基；2.巰基PE-IgG的制備；（1）將30μl濃度為1.1mg/ml的異雙功能試劑SPDP的2021
10-19PriCells: Isolation, culture, and purification of Human Pulmonary Arterial Smooth Muscle Cells
PriCells:Isolation,culture,ａndpurificationofHumanPulmonaryArterialSmoothMuscleCells(HPASMCs)1.HPASMCswereisolatedfromlungsresectedfromtissueofnormalhumanoradultpatientswithmalignanttumors.2.Thearterieswereseparatedfromtheiradventitiaａndendotheliumａnd2021
10-19PriCells: Isolation, culture, and purification of Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells
PriCells:Isolation,culture,ａndpurificationofHumanPulmonaryMicrovascularEndothelialCells(HPMECs)1.HPMECswereisolatedfromlungsresectedfromtissueofnormalhumanoradultpatientswithmalignanttumors.2.Normallungtissueoradultpatientswithmalignanttumorsfromthes2021
10-19PriCells: 四乙基羅丹明標(biāo)記抗體﹠四甲基異硫氰酸羅丹明標(biāo)記抗體
PriCells:四乙基羅丹明標(biāo)記抗體﹠四甲基異硫氰酸羅丹明標(biāo)記抗體四乙基羅丹明標(biāo)記抗體：1.稱(chēng)取1gRB200及2gPCL5放在乳缽中于通風(fēng)櫥中研磨5min；2.加入10ml無(wú)水丙酮，不斷攪拌，5min后過(guò)濾，用濾液進(jìn)行標(biāo)記抗體。剩余部分吸附在濾紙上，于4℃干燥保存；3.量取一定量的濃度為20mg/ml的抗體，按1：1：1的比例分別加入等體積的生理鹽水和0.5mol/LpH9.0的碳酸鹽緩沖液來(lái)稀釋抗體；4.再加入0.1ml的RB200溶液，邊滴加邊攪拌，在0—4℃中結(jié)合12—18h；5.用生2021
10-182021
10-18PriCells: 細(xì)胞內(nèi)糖類(lèi)染色方法—過(guò)碘酸席夫反應(yīng)法
PriCells:細(xì)胞內(nèi)糖類(lèi)染色方法—過(guò)碘酸席夫反應(yīng)法基本原理：過(guò)碘酸是一種強(qiáng)氧化劑，過(guò)碘酸的氧化作用先使糖分子的乙二醇基變?yōu)橐叶┗?，乙二醛基繼而與Schiff試劑結(jié)合，Schiff試劑本為無(wú)色亞硫酸品紅復(fù)合物，但它與乙二醛基結(jié)合后形成紫紅色反應(yīng)物。顏色反應(yīng)的深淺取決于組織內(nèi)多糖（包括糖原、黏多糖、黏蛋白、糖蛋白、糖脂等）的乙二醇分子的多寡?；驹恚?.席夫試劑的制備（1）稱(chēng)取0.5g堿性品紅加入100ml沸水中，不斷攪拌下煮5min，使其充分溶解；（2）待溶液冷卻至50℃時(shí)過(guò)濾，加入濃度為2021
10-182021
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10-18PriCells: 原代細(xì)胞富爾根（Feulgen）反應(yīng)顯示DNA
PriCells:原代細(xì)胞富爾根（Feulgen）反應(yīng)顯示DNA基本原理：顯示DNA的傳統(tǒng)方法是富爾根（Feulgen）反應(yīng)，切片先用稀鹽酸處理，DNA經(jīng)弱酸（1mol/LHCL）水解后，在60℃條件下使DNA分子中脫氧核糖與嘌呤之間的連接打開(kāi)，脫氧核糖的一端釋放出醛基，并在原位與Schiff試劑反應(yīng)生成紫紅色產(chǎn)物。原理同PAS反應(yīng)，使細(xì)胞核DNA顯紫紅色。在此過(guò)程中RNA不受影響，故染色具有DNA特異性。準(zhǔn)確的溫度和鹽酸濃度，適宜的水解時(shí)間是成功的關(guān)鍵。水解過(guò)度或不足均降低染色強(qiáng)度。配制試劑：2021
10-18PriCells: 原代細(xì)胞DNA與RNA的吖啶橙熒光染色法
PriCells:原代細(xì)胞DNA與RNA的吖啶橙熒光染色法基本原理：吖啶橙（acridineorange，AO）是一種常用熒光染料，吖啶橙與原代細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA都有親和力，但有一定的特異性，即結(jié)合后發(fā)不同顏色的熒光，DNA呈亮綠色，而RNA呈橘紅色至火紅色。此法簡(jiǎn)便快捷，既可染活原代細(xì)胞又可染固定原代細(xì)胞。用于直接染色觀察活原代細(xì)胞或固定染色觀察原代細(xì)胞均可。吖啶橙對(duì)活原代細(xì)胞毒性小，配成1×10-4—2×10-4可用于直接染色活原代細(xì)胞和進(jìn)行熒光顯微鏡觀察，但不持久，用固定染色觀察法效果2021
10-18PriCells: 原代細(xì)胞甲基綠-哌咯寧法顯示DNA和RNA
PriCells:原代細(xì)胞甲基綠-哌咯寧法顯示DNA和RNA基本原理：甲基綠（methylgreen）和哌咯寧（pyronin）均為堿性染料，因此可與帶負(fù)電荷的磷酸根形成鹽。甲基綠分子有2個(gè)正電荷，易與雙鏈DNA分子結(jié)合使原代細(xì)胞核內(nèi)的DNA呈藍(lán)綠色。哌咯寧分子有一個(gè)正電荷，易與單鏈RNA分子結(jié)合使原代細(xì)胞質(zhì)和核仁內(nèi)的RNA顯示紅色。也有人認(rèn)為染色原理與核酸分子的空間構(gòu)型有關(guān)。配制試劑：1.0.2mol/LpH4.8的乙酸緩沖液的配制將1.2ml冰乙酸加蒸餾水定容至100ml，在使用時(shí)再加2.72021
10-18PriCells: FITC標(biāo)記抗體-Chadwick氏法
PriCells:FITC標(biāo)記抗體-Chadwick氏法試劑：抗體球蛋白溶液、異硫氰酸熒光素、3%重碳酸鈉水溶液、pH8.0的0.01mol/LPBS、1%硫柳汞；材料：離心機(jī)及離心管、三角燒瓶（25ml）、冰槽、無(wú)菌吸管及毛細(xì)滴管、透析袋、玻璃棒、棉線及燒杯（500ml）等；方法與步驟：1.抗體的準(zhǔn)備。用0—4℃pH8.0的PBS將免疫球蛋白溶液濃度稀釋為30—40mg/ml，置于三角燒瓶?jī)?nèi)，放入冰槽中；2.熒光素的準(zhǔn)備。按每毫克免疫球蛋白加0.01mg熒光素計(jì)算，稱(chēng)取所需的熒光素量，用3%重掃一掃訪問(wèn)手機(jī)商鋪
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