PriCells: 四乙基羅丹明標記抗體﹠四甲基異硫氰酸羅丹明標記抗體
PriCells: 四乙基羅丹明標記抗體﹠四甲基異硫氰酸羅丹明標記抗體
四乙基羅丹明標記抗體:
1. 稱取1g RB200及2g PCL5放在乳缽中于通風櫥中研磨5min;
2. 加入10ml無水丙酮,不斷攪拌,5min后過濾,用濾液進行標記抗體。剩
余部分吸附在濾紙上,于4℃干燥保存;
3. 量取一定量的濃度為20mg/ml的抗體,按1:1:1的比例分別加入等體積
的生理鹽水和0.5mol/L pH9.0的碳酸鹽緩沖液來稀釋抗體;
4. 再加入0.1ml的RB200溶液,邊滴加邊攪拌,在0—4℃中結(jié)合12—18h;
5. 用生理鹽水透析5—7h,經(jīng)葡萄糖凝膠G-50柱層析,除去游離熒光素,
分裝,保存于4℃?zhèn)溆茫?/p>
四甲基異硫氰酸羅丹明標記抗體:
1. 量取10ml濃度為6mg/ml的IgG,加在濃度為0.1mol/L pH9.5的碳酸鹽緩沖液中透析過夜;
2. 將四甲基異硫氰酸羅丹明按每毫克IgG加入5—20μg的比例溶于濃度為1mg/ml二甲基亞砜中,取此溶液300μl,逐滴加入抗體溶液中,同時用電磁攪拌;
3. 在室溫中避光攪拌2h;
4. 把結(jié)合物移入直徑3cm,高30cm的Bio-Gel P-6層析柱,此層析柱已用0.01mol/L pH8.0的PBS平衡過,流速為1.5ml/min;
5. 收集到的先流出的紅色結(jié)合物即為標記抗體,分裝后于4℃保存?zhèn)溆茫?/p>
相關(guān)產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。