PriCells: 臺盼藍染色法

來源：武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司 2021年10月15日 14:39

PriCells: 臺盼藍染色法

材料：

1. 顯微鏡、玻片、蓋玻片、滴管；

2. 試劑：0.4%臺盼藍染液；

3. 臺盼藍（Trypan blue）：0.4g；

4. 生理鹽水：100ml；

操作步驟：

1. 用Hanks液配制0.1%臺盼藍溶液；

2. 用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液來消化培養(yǎng)的貼壁細胞；

3. 再加入適量Hanks液制成細胞懸液；

4. 將待染色細胞稀釋至所需濃度（方法及濃度范圍與細胞計數(shù)相同）；

5. 每0.1ml細胞懸液約加新鮮配制的染液一小滴，室溫下染3—5min；

6. 染色過的細胞材料，取一滴細胞懸液置玻片上，加蓋玻片后放高倍鏡下觀察；

7. 死亡的細胞著淺藍色并膨大，無光澤?；罴毎恢⒈３终Ｐ螒B(tài)，有光澤；

8. 計數(shù)1000個細胞中的活細胞和死細胞數(shù)目；

9. 統(tǒng)計未染色細胞?？砂垂接嬎愠黾毎盥?。

細胞活率（%）=未染色的細胞數(shù)/觀察的細胞總數(shù)×100

注意事項：

1. 染色時間不能太長，否則活細胞也會逐漸積累染料而染成顏色，使監(jiān)測結(jié)

果偏低；

2. 另可結(jié)合細胞計數(shù)方法，同時進行細胞計數(shù)和活力檢測；

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