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PriCells: FITC標(biāo)記抗體-改良法
試劑：
1. 0.01mol/L pH7.2 PBS配方。將NaCl 18g、Na2HPO4 1.15g、KH2PO4 0.2g，
溶于2000ml三蒸水中，調(diào)整pH至7.2；
2. 0.5mol/L pH9.0碳酸鹽緩沖液配法。量取0.5mol/L Na2CO3（5.3%）10ml
加入0.5mol/L NaHCO3（4.2%）90ml中，充分混合后，調(diào)整pH至9.0；
3. 3%中碳酸鈉水溶液的配制。稱取1.5g無水正碳酸鈉充分溶解于50ml三蒸
水中即成；
方法與步驟：
1. 根據(jù)Marshall氏法高效價(jià)的抗人球蛋白兔免疫血清，分離球蛋白；
2. 用0.15 mol/L NaCl的鹽水及0.15 mol/L pH9.0的NaHCO3-Na2CO3緩沖液稀釋使每毫升內(nèi)含抗體10mg，緩沖液為總量的10%；
3. 將以上溶液降溫至4℃，按蛋白：熒光素=50—80mg：1mg的比例加入異硫氰酸熒光素，在0—4℃下電磁攪拌12—14h；
4. 用半飽和硫酸銨將標(biāo)記球蛋白沉淀分離，除去未結(jié)合的熒光素，再用緩沖鹽水透析，除去硫酸銨，最后用Nessler氏試劑測(cè)驗(yàn)至隔夜透析之鹽水無氨離子及熒光色素為止；
5. 將制備好的熒光抗體加0.01%的疊氮鈉，分裝在1ml安培中，或凍干，或保存于4℃冰箱中可以用半年以上，也可于-20℃冰箱保存達(dá)2年以上；
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