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2022
07-29

原代肝細胞三維培養(yǎng)模型在藥物代謝和毒性評估中的應(yīng)用
原代肝細胞二維（2D）培養(yǎng)具有操作簡單、費用低等優(yōu)點，是目前體外藥物代謝和毒性評估廣泛使用的細胞模型。由于2D培養(yǎng)不能模擬體內(nèi)微環(huán)境和細胞生長狀態(tài)，2D細胞模型在組織結(jié)構(gòu)、基因表達以及生物學特性等方面與體內(nèi)細胞相去甚遠。三維（3D）細胞培養(yǎng)可提供與體內(nèi)相似的支架系統(tǒng)，創(chuàng)建與體內(nèi)類似的生長環(huán)境，具有與來源組織十分接近的結(jié)構(gòu)特征和功能特性。肝細胞3D培養(yǎng)模型必將在未來藥物代謝、毒性評估以及疾病細胞模型中逐步取代2D肝細胞模型。13D培養(yǎng)簡介1.13D細胞培養(yǎng)定義3D細胞培養(yǎng)是指將具有三維結(jié)構(gòu)的材料與
2022
07-26

微量波動Ames試驗試劑盒——藥物早期毒性篩選的選擇
1微量波動Ames試驗在藥物發(fā)現(xiàn)與早期篩選階段，微量波動Ames試驗（AmesFluctuationTest）可以在化合物用量較少的情況下，有效篩選排除具有遺傳毒性的化合物。匯智和源針對微量波動Ames試驗，開發(fā)出一套包含整個實驗主要試劑的試劑盒——微量波動Ames試驗試劑盒，試劑盒以微型96孔板形式進行細菌突變測試，適用于早期藥物遺傳毒性評估，可在測試化合物有限的情況下進行預(yù)篩選。2IPHAES微量波動Ames試劑盒的優(yōu)勢自己配試劑：菌株穩(wěn)定性差！試劑多！計數(shù)煩！費時間！易污染！等貨期！微量波
2022
07-19

說說一相代謝穩(wěn)定性實驗原理
藥物在一相代謝反應(yīng)中主要發(fā)生氧化、還原和水解的反應(yīng)，經(jīng)過Ⅰ相代謝反應(yīng)，藥物可能帶有一些極性基團，如羥基、羧基等。氧化反應(yīng)是最多見的第Ⅰ相反應(yīng)，單加氧酶系是氧化異源物最重要的酶，單加氧酶主要存在于滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的微粒體中，能催化烷烴、烯烴、芳烴和類固醇等多種物質(zhì)進行氧化。由細胞色素P450、NADPH+H+、NADPH-細胞色素P450還原酶（以FAD為輔基的黃酶），催化基本反應(yīng)為：RH+O2+NADPH+H+→ROH+NADP++H2O單加氧酶能直接激活氧分子，使其中一個氧原子直接加入底物分子中形成
2022
07-15

微量波動Ames試驗在遺傳毒理研究中的應(yīng)用
1微量波動Ames試驗簡介1.1Ames試驗發(fā)展歷程細菌回復(fù)突變試驗（BacterialReverseMutationTest)，亦稱Ames試驗，于1975年由美國加利福尼亞大學伯克利分校生化系B.N.Ames教授實驗室建立并不斷發(fā)展完善，至今已成為基因毒性測試中應(yīng)用尤為廣泛的一種方法，通常是體外毒理學測試的第一步，廣泛應(yīng)用于化合物的致突變性和潛在致癌性的初篩檢驗。近幾年，將M.H.L.Green等人創(chuàng)建的大腸桿菌回復(fù)突變試驗引入其中，形成現(xiàn)在較為成熟的細菌回復(fù)突變試驗（包括鼠傷寒沙門氏菌細菌
2022
07-11

原代肝細胞的分離、培養(yǎng)與應(yīng)用
肝臟是藥物代謝的重要器官，體外代謝模型多以肝臟為基礎(chǔ)。常用的體外模型有肝微粒體、肝S9、肝胞質(zhì)液、原代肝細胞、肝組織切片、重組人代謝酶等。其中，原代肝細胞因具有較好的體外試驗重現(xiàn)性，基本維持了肝臟的代謝功能，特別是較好的保留了與體內(nèi)一致的酶水平，成為了體外藥物試驗的“金標準”，廣泛應(yīng)用于藥物代謝與毒理學研究中。1原代肝細胞及其應(yīng)用原代肝細胞(Primaryhepatocytes)是指從動物肝臟取出后立即培養(yǎng)的肝細胞。原代肝細胞作為一種體外模型，具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點：①與體內(nèi)環(huán)境保持一致
2022
07-11

進行磁珠分選有哪些操作要求
磁珠分選，也被稱為免疫磁珠細胞分選，包括使用針對特定細胞表面抗原的抗體標記細胞進行選擇或去除。被標記的細胞與磁珠交聯(lián)，一旦被置于磁場中，即可被吸附。免疫磁珠分選有兩種方式：有柱式分選和無柱式分選。操作磁珠分選有哪些要求1移液槍吸取液體要準確2移液槍的槍頭在吸取磁珠或者抗體的時候，槍頭要剛好伸進液面以下，不要伸到瓶子底部，以免槍頭沾了過多的試劑，再帶到了細胞懸液中3磁珠使用前要渦旋混勻4磁極插入細胞懸液5min之后，轉(zhuǎn)移細胞的時候，特別是最后一滴細胞懸液，如果滴不下來，不要晃動磁極，這樣會降低細胞
2022
07-08

Ames試驗原理是怎樣的？
Ames試驗用于檢測待分析物質(zhì)的致突變作用，該驗靈敏、高效、檢測范圍廣。利用鼠傷寒沙門氏組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株，該缺陷型菌株不能合成組氨酸，故在缺乏組氨酸的培養(yǎng)基上，僅少數(shù)自發(fā)回復(fù)突變的細菌生長；假如有致突變物存在，則營養(yǎng)缺陷型的細菌誘導(dǎo)回復(fù)突變成原養(yǎng)型，因而能生長形成菌落，據(jù)此判斷受試物是否為致突變物。某些致突變物需要代謝活化后才能引起回復(fù)突變，故需加入經(jīng)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)的大鼠肝制備的S9混合液。北京匯智泰康醫(yī)藥技術(shù)有限公司針對Ames試驗開發(fā)Ames試劑盒，本試劑盒省去了培養(yǎng)基成分準備、誘導(dǎo)S9制備
2022
07-07

細胞分選方法概述
1細胞分選方法概述細胞學研究中一個很重要的課題就是細胞的分離純化，尤其是需要對某種特定的細胞進行功能研究，如對細胞培養(yǎng)上清液通過ELISA分析檢測細胞因子、細胞共培養(yǎng)檢測細胞功能等，都需要得到高純度的目的細胞。因此，高效地分離所需要的目的細胞是進行細胞功能研究的先決條件。細胞分選（cellsorting）是指根據(jù)細胞所具有的特性把某種特定的細胞亞群從混合的細胞樣品中分離出來的一種技術(shù)，它是對某一特定細胞進行生化分析和功能分析的前提和基礎(chǔ)。常用的細胞分選方法主要有兩大類：一類是基于細胞物理性質(zhì)的密
2022
07-01

Ⅱ相代謝穩(wěn)定性實驗原理及實驗方法
1概述1.1藥物代謝研究簡介藥物代謝研究是創(chuàng)新藥物研發(fā)的重要內(nèi)容，它不僅決定了創(chuàng)新藥物制劑研發(fā)的成敗，而且與創(chuàng)新藥物研發(fā)的速度和質(zhì)量有密切關(guān)系。因而，藥物代謝研究在新藥研發(fā)工程中具有*的重要作用，研究藥物代謝對于了解藥物在體內(nèi)的變化過程至關(guān)重要。藥物代謝研究的方法主要分為體內(nèi)和體外兩種。體內(nèi)代謝法因藥物在生物體內(nèi)的分布較廣，加上代謝轉(zhuǎn)化的器官和酶系的多樣性，使藥物及其代謝產(chǎn)物在體內(nèi)的濃度比較低，代謝產(chǎn)物的檢測具有一定的困難。體外代謝法在短時間內(nèi)可以得到大量的代謝產(chǎn)物，且代謝條件可控，代謝體系比較
2022
06-30

酶抑制IC50試驗研究原理和試驗方法
1酶抑制研究的重要性藥物代謝的主要場所是肝臟，其中細胞色素P450（CYP）酶為主要的代謝酶，其亞型CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4參與了體內(nèi)80%以上的藥物代謝。CYP酶是一個多功能的酶系，在體內(nèi)具有可誘導(dǎo)性和可抑制性。該酶與藥物的相互作用能夠在所有的體內(nèi)過程（包括吸收、分布、代謝和排泄）中發(fā)生，其中以代謝過程尤為突出，約占40%。近年發(fā)現(xiàn)，藥物相互作用是臨床上產(chǎn)生嚴重不良反應(yīng)甚至死亡的主要原因之一。CYP參與的藥物相互作用主要
2022
06-29

Ficoll密度梯度離心法提取PBMC原理及注意事項
外周血單個核細胞（PeripheralBloodMononuclearCell，PBMC），是指外周血中具有單個核的細胞，包括淋巴細胞（Lymphocyte）、單核細胞（Monocyte）、樹突狀細胞（DC）和其他少量細胞。PBMC可通過健康人或動物供體的外周血，通過Ficoll密度梯度離心法（IPHASE/匯智和源），磁珠分選等步驟獲得。Ficoll是蔗糖的多聚體，中性，平均分子量400,000，當密度為1.2g/mL，未超出正常生理性滲透壓，也不穿過生物膜。紅細胞、粒細胞比重大，離心后沉于管
2022
06-28

Ficoll密度梯度離心法分離PBMC
外周血單個核細胞（PeripheralBloodMononuclearCell，PBMC），是指外周血中具有單個核的細胞，包括淋巴細胞（Lymphocyte）、單核細胞（Monocyte）、樹突狀細胞（DC）和其他少量細胞。1原理單個核細胞的體積、形態(tài)和比重與外周血其它細胞不同，紅細胞和多核白細胞的比重超過1.080，單個核細胞的比重為1.070左右，血小板為1.030左右。因此，可利用各種血細胞和單個核細胞比重之間的差異將各種血細胞與單個核細胞分離開來。Ficoll密度梯度離心法是分離、純化P
2022
06-27

人CD3+T淋巴細胞陽性分選原理及注意事項
一細胞分選方法概述細胞學研究中一個很重要的課題就是細胞的分離純化，尤其是需要對某種特定的細胞進行功能研究，如對細胞培養(yǎng)上清液通過ELISA分析檢測細胞因子、細胞共培養(yǎng)檢測細胞功能等，都需要得到高純度的目的細胞。因此，高效地分離所需要的目的細胞是進行細胞功能研究的先決條件。細胞分選（cellsorting）是指根據(jù)細胞所具有的特性把某種特定的細胞亞群從混合的細胞樣品中分離出來的一種技術(shù)，它是對某一特定細胞進行生化分析和功能分析的前提和基礎(chǔ)。常用的細胞分選方法主要有兩大類：一類是基于細胞物理性質(zhì)的密
2022
06-23

Ⅰ相代謝穩(wěn)定性實驗原理及實驗方法
1概述1.1藥物代謝研究簡介藥物代謝研究是創(chuàng)新藥物研發(fā)的重要內(nèi)容，它不僅決定了創(chuàng)新藥物制劑研發(fā)的成敗，而且與創(chuàng)新藥物研發(fā)的速度和質(zhì)量有密切關(guān)系。因而，藥物代謝研究在新藥研發(fā)工程中具有*的重要作用，研究藥物代謝對于了解藥物在體內(nèi)的變化過程至關(guān)重要。藥物代謝研究的方法主要分為體內(nèi)和體外兩種。體內(nèi)代謝法因藥物在生物體內(nèi)的分布較廣，加上代謝轉(zhuǎn)化的器官和酶系的多樣性，使藥物及其代謝產(chǎn)物在體內(nèi)的濃度比較低，代謝產(chǎn)物的檢測具有一定的困難。體外代謝法在短時間內(nèi)可以得到大量的代謝產(chǎn)物，且代謝條件可控，代謝體系比較
2022
06-22

猴血漿使用需要注意些什么？
血漿是血液的重要組成部分，其主要成分是水、血漿蛋白、葡萄糖、激素、礦質(zhì)離子以及多種水解酶等。血漿中含有多種水解酶，例如膽堿酯酶、醛縮酶、脂肪酶、脫氫肽酶、堿性和酸性磷酸酶等。在血漿中易被降解的官能團主要有酯基、酰胺、氨基甲酸酯、內(nèi)酰胺、內(nèi)酯、磺酰胺以及肽類結(jié)構(gòu)等。因此，化合物自身結(jié)構(gòu)、血漿中水解酶的含量和活性等是影響化合物在血漿中穩(wěn)定性的主要因素。因此，高質(zhì)量的血漿供應(yīng)是確保血漿穩(wěn)定性試驗結(jié)果穩(wěn)定、可靠的前提。猴血漿產(chǎn)品適用于細胞、組織器官培養(yǎng)、細胞株保藏、單抗研制，是醫(yī)院、科研院校、動物疫苗、
2022
06-17

CYP450酶代謝表型研究(化學抑制法)原理及實驗方法
1概述1.1藥物代謝研究簡介藥物代謝研究是創(chuàng)新藥物研發(fā)的重要內(nèi)容，它不僅決定了創(chuàng)新藥物制劑研發(fā)的成敗，而且與創(chuàng)新藥物研發(fā)的速度和質(zhì)量有密切關(guān)系。因而，藥物代謝研究在新藥研發(fā)工程中具有*的重要作用，研究藥物代謝對于了解藥物在體內(nèi)的變化過程至關(guān)重要。藥物代謝研究的方法主要分為體內(nèi)和體外兩種。體內(nèi)代謝法因藥物在生物體內(nèi)的分布較廣，加上代謝轉(zhuǎn)化的器官和酶系的多樣性，使藥物及其代謝產(chǎn)物在體內(nèi)的濃度比較低，代謝產(chǎn)物的檢測具有一定的困難。體外代謝法在短時間內(nèi)可以得到大量的代謝產(chǎn)物，且代謝條件可控，代謝體系比較
2022
06-15

血漿穩(wěn)定性試驗的血漿怎么選
1血漿穩(wěn)定性研究的意義1.1血漿穩(wěn)定性研究的重要性在藥物發(fā)現(xiàn)過程中，先導(dǎo)化合物的代謝穩(wěn)定性（包括肝代謝穩(wěn)定性和血漿穩(wěn)定性等）是影響其成藥性的關(guān)鍵因素。在藥物研發(fā)案例中，很多先導(dǎo)化合物都存在穩(wěn)定性差的問題，而很多具有良好藥理活性的化合物由于不夠穩(wěn)定最終導(dǎo)致研發(fā)失敗而終止。因此，代謝穩(wěn)定性研究是尋找候選藥物過程中*的一項重要內(nèi)容。盡管化合物的肝代謝穩(wěn)定性被普遍認為是藥物發(fā)現(xiàn)過程中所面臨的最主要的挑戰(zhàn)之一，但是化合物的血漿穩(wěn)定性仍然是新藥研發(fā)過程中一個重要的影響因素。化合物的血漿穩(wěn)定性與肝代謝穩(wěn)定性有
2022
06-14

空白血漿的操作需要注意些什么？
血漿是血液的重要組成部分，呈淡黃色液體。約占人體血液總體積的55%。血漿的絕大部分是水，其余由血漿蛋白、有機化合物和無機鹽等組成,生物樣品分析方法學研究時，需要考察不同來源的空白生物基質(zhì)，匯智泰康可根據(jù)客戶需求提供混合或單供體的空白基質(zhì)。不同動物空白血漿：匯智泰康可提供食蟹猴，恒河猴，比格犬，SD大鼠，ICR小鼠等不同動物空白血清，空白血漿，空白血，空白尿液，空白肝組織等?？瞻籽獫{的操作需要注意些什么？1、注意無菌操作，避免反復(fù)凍融。2、血漿凍融后可能出現(xiàn)的絮狀沉淀物通常是血漿凍融過程中脂蛋白的
2022
06-13

專屬血漿，為血漿蛋白結(jié)合試驗“保駕護航”
1藥物與血漿蛋白結(jié)合藥物和血漿蛋白的結(jié)合對藥物在體內(nèi)的分布和轉(zhuǎn)運有重要影響，因此藥物蛋白結(jié)合率的測定是新藥開發(fā)過程中的一項重要工作。藥物與血漿蛋白結(jié)合后很難通過血管壁，故蛋白結(jié)合型藥物通常沒有藥理活性。相反，非結(jié)合的游離型藥物易于透過細胞膜，與藥物代謝、排泄以及藥效密切相關(guān)，具有重要的臨床意義。血漿中與藥物結(jié)合的蛋白主要有白蛋白（Albumin，65KDa）、脂蛋白（Lipoprotein，200~3400KDa）、a1-酸性糖蛋白（Alphaacidglucoprotein，44KDa）。白蛋
2022
06-13

空白生物基質(zhì) ——生物樣本分析方法學驗證套裝
1空白生物基質(zhì)采自健康受試者或者健康實驗動物的空白全血、血清、血漿、膽汁、乳汁、尿液、糞便、腸道內(nèi)容物、組織臟器、玻璃體液、房水、腦脊液等多種類型的生物基質(zhì)，統(tǒng)稱為空白生物基質(zhì)。2空白生物基質(zhì)應(yīng)用在生物基質(zhì)分析方法的建立和驗證中，需要使用空白生物基質(zhì)，確保分析方法的準確性及可靠性?？瞻谆|(zhì)主要用于配制校正標樣、制備質(zhì)控樣品用于考察分析方法的特異性、選擇性、精密度、準確度、基質(zhì)效應(yīng)、回收率、穩(wěn)定性、稀釋線性、干擾效應(yīng)等。其中檢測方法的選擇性和基質(zhì)效應(yīng)對于空白基質(zhì)的要求更高。選擇性：是分析方法在空白

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