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2023
04-26

UGT重組酶基礎(chǔ)知識(shí)介紹
尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)是人體重要的II相代謝酶,具有代謝藥物和內(nèi)源性物質(zhì)的重要作用，其廣泛分布于肝、腎、呼吸道、肺、胃、小腸、結(jié)腸等多種組織器官中。然而，由于肝臟是發(fā)生II相代謝的主要器官，大部分的UGT酶在肝臟中表達(dá)。1UGT家族的作用機(jī)制UGT酶是位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔側(cè)面的一類微粒體糖蛋白，是人體內(nèi)重要的催化Ⅱ相結(jié)合反應(yīng)的酶，占所有藥物II相代謝的35%左右。UGT酶和內(nèi)源性物質(zhì)的相互作用具有重要的研究價(jià)值，該蛋白能夠催化內(nèi)源性物質(zhì)（如膽紅素、類固醇激素和脂溶性維生素等）或外源性物質(zhì)（
2023
04-21

LC-MS/MS生物樣本分析中內(nèi)源性物質(zhì)檢測的替代生物基質(zhì)解決方案
1簡介LC-MS/MS技術(shù)是生物樣本分析、代謝產(chǎn)物檢測常用的生物分析技術(shù)之一，檢測的物質(zhì)包括外源性物質(zhì)和內(nèi)源性物質(zhì)。研究人員常通過把待測物添加到空白基質(zhì)中配制成定量標(biāo)準(zhǔn)曲線樣本和質(zhì)控樣品模擬實(shí)際樣本，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線定量出生物樣本中待測物的濃度。內(nèi)源性物質(zhì)即體內(nèi)天然存在的物質(zhì)，內(nèi)源性物質(zhì)相關(guān)藥物近些年成為新藥研發(fā)的重要方向。伴隨著大量內(nèi)源性物質(zhì)藥物的誕生，對(duì)內(nèi)源性物質(zhì)藥物的生物分析也越來越重要。然而，目前FDA等國內(nèi)外藥品評(píng)審機(jī)構(gòu)生物樣本分析方法驗(yàn)證主要是針對(duì)外源性物質(zhì)，包括精密度、準(zhǔn)確度、基質(zhì)效應(yīng)
2023
04-14

重組蛋白基礎(chǔ)知識(shí)介紹
重組蛋白（recombinantprotein）是指應(yīng)用重組DNA或重組RNA技術(shù)而獲得的蛋白質(zhì)。重組蛋白工程先應(yīng)用基因克隆或化學(xué)合成技術(shù)獲得目的基因（geneofinterest，GOI），連接到適合的表達(dá)載體，導(dǎo)入到特定的宿主細(xì)胞，利用宿主細(xì)胞的遺傳系統(tǒng)，表達(dá)出有功能的蛋白質(zhì)分子。圖1基因工程的操作步驟圖片來源于《哺乳動(dòng)物細(xì)胞重組蛋白工程》目前，重組蛋白試劑已被廣泛應(yīng)用于生物藥、細(xì)胞免疫治療及診斷試劑的研發(fā)和生產(chǎn)中。其中重組蛋白藥物是生物藥物的重要組成成分，常被被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療領(lǐng)域,包括腫瘤
2023
04-13

人外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）——ADCC過程中的“主角”
1PBMC簡介外周血單個(gè)核細(xì)胞（Peripheralbloodmononuclearcell,PBMC）是具有單個(gè)細(xì)胞核的血細(xì)胞，如淋巴細(xì)胞（T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等）、單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞，是多種免疫細(xì)胞的合稱。外周血單個(gè)核細(xì)胞是造血干細(xì)胞（HSC）在骨髓中發(fā)育而來的，是外周血中幫我們抵御疾病和感染的重要防線。2PBMC在ADCC中的應(yīng)用PBMC被廣泛用于藥物研發(fā)中，頗具代表性的是抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用(Antibody-dependentcell-mediatedcytoto-xi
2023
04-06

Ames試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢
適用范圍：食品、化妝品、藥品、保健品、醫(yī)療器械和化學(xué)品等的遺傳毒性的初篩，檢測DNA損傷引起的基因突變，通過檢測受試物在測試菌株某些特殊構(gòu)建的突變體上引起突變的能力，即造成菌株從組氨酸/色氨酸依賴型向原養(yǎng)型突變，判斷受試物是否為致突變劑，本產(chǎn)品僅供科研使用Ames試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢1.傳統(tǒng)試驗(yàn)周期長：培養(yǎng)基準(zhǔn)備、誘導(dǎo)S9制備、菌株培養(yǎng)、菌株鑒定等耗費(fèi)大量時(shí)間。穩(wěn)定性差：雜菌污染、活菌數(shù)不符合要求、試劑配制不準(zhǔn)確都會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。2.Ames試劑盒便捷：省去培養(yǎng)基成分準(zhǔn)備、誘導(dǎo)S9制備、菌株培養(yǎng)、菌株
2023
03-30

抗體基礎(chǔ)知識(shí)介紹
抗體（antibody，Ab）是機(jī)體在體內(nèi)存在的外來分子、微生物等抗原物質(zhì)刺激下，由B淋巴細(xì)胞或記憶細(xì)胞增殖分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白（immunoglobulins，Ig），主要分布在血清中，也分布于組織液及外分泌液中。1抗體的發(fā)展歷程抗體技術(shù)是免疫學(xué)領(lǐng)域的一個(gè)重要方面，在生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)各學(xué)科得到了廣泛應(yīng)用。隨著生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，抗體技術(shù)也經(jīng)歷了三個(gè)發(fā)展階段。第一代抗體——血清多克隆抗體（PcAb）,早在20世紀(jì)初期已發(fā)現(xiàn)血清抗體和細(xì)菌毒素的作用，并用于
2023
03-24

小核酸藥體外研究案例分析
小核酸藥物即為寡核苷酸藥物，一般是由不超過30個(gè)堿基/堿基對(duì)組成的核苷酸序列。小核酸藥物是指能夠與特定的mRNA結(jié)合，通過干預(yù)mRNA翻譯效率，達(dá)到治療效果的特定序列的小片段核苷酸。小核酸藥物包括反義寡核苷酸（antisenseoligonucleotides，ASO）藥物、小干擾RNA（smallinterferingRNA，siRNA）藥物、微小RNA（microRNA，miRNA）藥物、RNA適配體(Aptamer)藥物等，其中ASO和siRNA是目前主流的小核酸藥物研究方向。1小核酸藥現(xiàn)
2023
03-16

大鼠血清主要都有哪些應(yīng)用？
大鼠血清是指從大鼠體內(nèi)采集的血液經(jīng)離心、分離血漿后所得的液體，在生命科學(xué)研究中有著廣泛的應(yīng)用，是一種非常重要的實(shí)驗(yàn)材料。下面將從以下幾個(gè)方面介紹血清的特點(diǎn)、制備和應(yīng)用。一、制備方法制備需要從大鼠體內(nèi)采集血液，離心分離血漿，然后將血漿存放在低溫條件下，待其自然凝固后離心分離血清即可。在制備過程中，需要注意的是采用無菌技術(shù)，保證血清的純度和質(zhì)量。二、特點(diǎn)血清是一種淡黃色或無色透明液體，pH值約為7.4，具有多種生物學(xué)特性。它含有豐富的蛋白質(zhì)、酶、激素、細(xì)胞因子等生物活性分子，可以用于多種生命科學(xué)研究
2023
03-13

肝微粒體、肝S9、肝胞質(zhì)液與體外藥物代謝
藥物代謝研究是創(chuàng)新藥物研發(fā)的重要內(nèi)容，它不僅決定了創(chuàng)新藥物制劑研發(fā)的成敗，而且與創(chuàng)新藥物研發(fā)的速度和質(zhì)量有密切關(guān)系。由于肝臟是藥物代謝的主要場所，體外代謝模型多以肝臟為基礎(chǔ)。1什么是藥物代謝？臨床前研究是新藥研發(fā)中必要的環(huán)節(jié)，而藥物代謝動(dòng)力學(xué)是臨床前藥理評(píng)價(jià)的重要組成部分。藥物被機(jī)體吸收后，在體內(nèi)各種酶以及體液環(huán)境作用下發(fā)生化學(xué)結(jié)構(gòu)改變的過程成為藥物代謝（DrugMetabolism），又稱生物轉(zhuǎn)化（Biotransformation）。藥物代謝主要在肝中進(jìn)行，也發(fā)生在腸、腎、肺、血液和皮膚等器
2023
03-09

你對(duì)肝微粒體了解多少？
肝微粒體酶（大鼠、小鼠、犬、猴、人）主要存在于肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中，是一個(gè)酶系統(tǒng)，具有完整的I相代謝酶（如細(xì)胞色素P450、黃素單加氧酶、單胺氧化酶等），II相代謝酶（如葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶，硫酸基轉(zhuǎn)移酶）、酯酶等，可催化數(shù)百種藥物的氧化過程，是FDA指導(dǎo)原則的預(yù)測人體內(nèi)代謝及抑制試驗(yàn)的研究工具。肝微粒體酶是一種人體重要的酶系統(tǒng)，參與人體的藥物代謝。如果沒有肝微粒體酶的參與，則藥物的藥效不能被人體吸收，從而失去治療的作用。肝微粒體酶在藥物代謝中起到催化劑的作用。但是肝微粒體酶又不太穩(wěn)定，如果多種藥物進(jìn)入人
2023
03-07

CD56單克隆抗體的簡單分享
單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備，雜交瘤（hybridoma）抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。一種免疫學(xué)技術(shù)，將產(chǎn)生抗體的單個(gè)B淋巴細(xì)胞同骨髓腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，獲得既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖的雜種細(xì)胞，并以此生產(chǎn)抗體。是僅由一種類型的細(xì)胞制造出來的抗體，對(duì)應(yīng)于多克隆抗體、多株抗體——由多種類型的細(xì)胞制造出來的一種抗體。用具備這種特性的單個(gè)雜
2023
03-02

CD14+單核細(xì)胞：Macrophage和DC的前體細(xì)胞
單核細(xì)胞（monocytes）是體積最大的白細(xì)胞，直徑14~20μm，呈圓球形，約占血液中單個(gè)核細(xì)胞數(shù)的10~30%。單核細(xì)胞是重要的天然免疫效應(yīng)細(xì)胞，在感染過程中能快速從外周血遷移到組織中，參與病原體的識(shí)別和清除。同時(shí)，單核細(xì)胞還是巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞的前體細(xì)胞。單核細(xì)胞分化的巨噬細(xì)胞對(duì)于天然免疫、細(xì)胞因子的分泌、細(xì)胞內(nèi)多種病原體的清除以及建立有效的免疫應(yīng)答等都具有重要作用，而其分化的樹突狀細(xì)胞是功能強(qiáng)大的抗原呈遞細(xì)胞，能夠啟動(dòng)并調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫反應(yīng)，在抗感染及抗腫瘤免疫研究中起關(guān)鍵作用。圖1單
2023
03-02

IPHASE/匯智和源 PBMC—藥物研發(fā)的最佳搭檔常見問題解答
PBMC—藥物研發(fā)的最佳搭檔—熱點(diǎn)問題—第一題CD3占比能高達(dá)70%？有人種差異嗎？答：CD3的占比個(gè)體間差異較大，低至30-40%，高的話能夠達(dá)到70-80%，40-60%是最常見的占比范圍。第二題貴公司的CD34+細(xì)胞是如何分選得到的?答：本公司提供的CD34+細(xì)胞是由我們國外試驗(yàn)室從經(jīng)動(dòng)員后的人外周血中分選而來，再通過進(jìn)口運(yùn)輸至國內(nèi)。第三題大鼠PBMC培養(yǎng)活率降低的問題解決了嗎？答：關(guān)于大鼠PBMC復(fù)蘇后活率高，但經(jīng)24h的培養(yǎng)后活率會(huì)有所下降的問題公司正集中精力從整個(gè)流程上進(jìn)行優(yōu)化，目前
2023
02-27

新品推薦 | SOS/umu遺傳毒性檢測試劑盒
1umu試驗(yàn)簡介umu試驗(yàn)，又稱SOS/umu試驗(yàn)，是1985年由Oda等根據(jù)損傷時(shí)誘導(dǎo)SOS反應(yīng)而表達(dá)umuC基因這一基本原理建立并發(fā)展起來的檢測環(huán)境誘變質(zhì)的短期篩選試驗(yàn)。1.1umu定義umu是UVmutable的縮寫形式,原始含義是經(jīng)紫外線照射引起的突變。umu基因來源于大腸桿菌,主要的2種存在形式是umuC和umuD，均屬于DNA聚合酶V。umuC基因的大小為45KDa,其跨越無堿基位點(diǎn)的合成能力比聚合酶III高100~150倍；umuD基因的大小為15KDa，它能促進(jìn)DNA損傷的修復(fù)。
2023
02-21

原代肝細(xì)胞：藥物研發(fā)最佳“CP”
肝臟是藥物代謝的重要器官，體外代謝模型多以肝臟為基礎(chǔ)。常用的體外模型有肝微粒體、肝S9、肝胞質(zhì)液、原代肝細(xì)胞、肝組織切片、重組人代謝酶等。其中，原代肝細(xì)胞因具有較好的體外試驗(yàn)重現(xiàn)性，基本維持了肝臟的代謝功能，特別是較好的保留了與體內(nèi)一致的酶水平，成為了體外藥物試驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”，廣泛應(yīng)用于藥物代謝與毒理學(xué)研究中。1原代肝細(xì)胞的特點(diǎn)原代肝細(xì)胞(Primaryhepatocytes)是指從動(dòng)物肝臟直接分離的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞。原代肝細(xì)胞作為一種體外模型，具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點(diǎn)：①與體內(nèi)環(huán)境保持一致，酶
2023
02-16

微核試驗(yàn)的應(yīng)用與方法
微核試驗(yàn)是檢測染色體或有絲分裂器損傷的一種遺傳毒性試驗(yàn)方法。無著絲粒的染色體片段或因紡錘體受損而丟失的整個(gè)染色體，在細(xì)胞分裂后期仍留在子細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)成為微核。目的：化學(xué)物質(zhì)遺傳毒性評(píng)價(jià)。原理：通過染色體丟失或斷片形成而出現(xiàn)的微核檢測染色體異常。步驟與結(jié)果：常用的是嚙齒類動(dòng)物骨髓嗜多染紅細(xì)胞(PCE)微核試驗(yàn)。以受試物處理嚙齒類動(dòng)物，然后處死，取骨髓，制片、固定、染色，于顯微鏡下計(jì)數(shù)PCE中的微核。如果與對(duì)照組比較，處理組PCE微核率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的增加，并有劑量-反應(yīng)關(guān)系，則可認(rèn)為該受試物是哺乳動(dòng)
2023
02-13

外周血單個(gè)核細(xì)胞凍存液的2個(gè)介紹
1.細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。2.細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中，及時(shí)凍存原始細(xì)胞是
2023
02-10

新品推薦 | 適配體分選：人CD8+T細(xì)胞分選的新方向
細(xì)胞分選（CellSorting）是指根據(jù)細(xì)胞所具有的特性把某種特定的細(xì)胞亞群從混合的細(xì)胞樣品中分離出來的一種技術(shù)，它是對(duì)某一特定細(xì)胞進(jìn)行生化分析和功能分析的前提和基礎(chǔ)。常用的細(xì)胞分選方法主要有流式分選和磁性細(xì)胞分選，但隨著DNA、RNA與蛋白質(zhì)相互作用研究的不斷發(fā)展和適配體技術(shù)的誕生，適配體分選也成為了細(xì)胞分選的一個(gè)新方向。1適配體適配體是通過指數(shù)富集配體系統(tǒng)進(jìn)化技術(shù)（systematicevolutionofligandsbyexponentialenrichment,SELEX）從體外篩選
2023
02-07

CYP450酶廣泛地存在于細(xì)菌、真菌、植物及動(dòng)物中
藥物進(jìn)入體內(nèi)會(huì)在一系列酶的作用下被催化為極性分子，發(fā)揮藥效或者被正常代謝體系排除天外的過程就是藥物代謝，這是機(jī)體的一種自我保護(hù)方式。藥物代謝已經(jīng)成為藥理研究的重要部分。研究藥物在體內(nèi)的代謝過程及其化學(xué)變化，對(duì)于闡述藥理作用、毒性研究、結(jié)構(gòu)修飾等都具有重要意義，而藥物代謝的過程最重要的角色便是參與其中的各種酶，包括CYP450酶、還原酶、過氧化物酶、單加氧酶和水解酶。CYP450酶抑制分析是藥物發(fā)現(xiàn)過程的重要組成部分，因?yàn)樗幬镏g的不利相互作用將導(dǎo)致藥物開發(fā)計(jì)劃終止、藥物撤市或限制治療用途。由于需
2023
01-17

IPHASE/匯智和源 Ames菌株鑒定試劑盒升版啦！
細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)（BacterialReverseMutationTest），又稱Ames試驗(yàn)，是以營養(yǎng)缺陷型的突變體菌株為指示生物檢測基因突變的體外試驗(yàn)，可檢測一個(gè)或數(shù)個(gè)堿基對(duì)的置換、增加或缺失造成的點(diǎn)突變，在食品、藥品、化學(xué)品、化妝品、農(nóng)藥、醫(yī)療器械等多個(gè)領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用。1Ames試驗(yàn)菌株及菌株鑒定常用的Ames菌株有組氨酸營養(yǎng)缺陷型鼠傷寒沙門氏菌（SalmonellaTyphimurium）或色氨酸缺陷型大腸桿菌（Escherichiacoli）。為保證檢測結(jié)果的可靠性，Ames試

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