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瑋馳小課堂丨為什么重組C因子可以代替鱟試劑用于內(nèi)毒素檢測(cè)?
隨著技術(shù)的,內(nèi)毒素檢測(cè)方法也從初的兔熱原檢測(cè)法(RPT)發(fā)展到鱟試劑檢測(cè)法(LAL/TAL),再到如今的重組因子C(rFc)法,經(jīng)歷了從體內(nèi)到體外,從少量到通量,從緩慢到快速的逐步發(fā)展更替,來(lái)不斷滿足行業(yè)發(fā)展的需求。圖1內(nèi)毒素檢測(cè)方法發(fā)展史近年來(lái),重組C因子內(nèi)毒素檢測(cè)法以其快速、簡(jiǎn)單、非動(dòng)物源等特點(diǎn)受到越來(lái)越多的關(guān)注,有望替代鱟試劑,成為內(nèi)毒素檢測(cè)的主要方法。我們將從4個(gè)方面論述了這一替代趨勢(shì)的必然性:從原理角度看,LAL和rFC都能用于內(nèi)毒素檢測(cè)重組生物技術(shù)的發(fā)展必然帶來(lái)檢測(cè)方法的革新對(duì)rFc -
Nature深度綜述:ADC藥物發(fā)展歷程、挑戰(zhàn)和下一代發(fā)展方向
抗體-藥物偶聯(lián)物(ADC)由linker、payload、單克隆抗體(mAb)組成。它結(jié)合了高特異性靶向能力和強(qiáng)效殺傷作用的優(yōu)勢(shì),實(shí)現(xiàn)了對(duì)癌細(xì)胞的高效殺滅,已成為抗癌藥物研發(fā)的熱點(diǎn)之一。自個(gè)ADC藥物Mylotarggemtuzumabozogamicin)于2000年獲得FDA批準(zhǔn)以來(lái),截至2021年12月全球共有14款A(yù)DC藥物獲批用于血液系統(tǒng)惡性腫瘤和實(shí)體瘤,此外,目前還有100多個(gè)ADC候選者處于臨床試驗(yàn)的不同階段。日前,Nature子刊signaltransductionandtarg -
西林瓶耐冷凍性實(shí)驗(yàn),溫控在-41±2℃ 斯特林超低溫冰箱滿足驗(yàn)證要求
國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《國(guó)家藥品包裝容器(材料)試行標(biāo)準(zhǔn)》中明確指出硅硼玻璃管制注射劑瓶需要耐受?chē)?yán)格的耐冷凍性實(shí)驗(yàn):取本品適量,注入標(biāo)稱(chēng)容量1/2的水放入冷凍箱中,溫度控制在-41℃±2℃,24h后取出,立即放入40±1℃水中,1min后取出,檢驗(yàn)不得破裂。從要求中可以看出國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局對(duì)包材的穩(wěn)定性有嚴(yán)格的規(guī)范,對(duì)驗(yàn)證的冷凍設(shè)備也有嚴(yán)苛的溫度穩(wěn)定性要求。常規(guī)的冷凍冰箱只能設(shè)置特定溫度點(diǎn),比如-20℃、-40℃、-86℃等,而且溫度波動(dòng)性較大,-80℃時(shí)在±10℃浮動(dòng),-40℃時(shí)在±10 -
PCR就是利用DNA聚合酶對(duì)特定基因做體外或試管內(nèi)InVitro的合成,基本上它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專(zhuān)一性的連鎖復(fù)制。那么它都有哪些注意事項(xiàng)呢?盡管擴(kuò)增序列的殘留污染大部分是假陽(yáng)性反應(yīng)的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一。因此,不僅要在進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)是謹(jǐn)慎認(rèn)真,在樣品的收集、抽提和擴(kuò)增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意:1.戴一次性手套,若不小心濺上反應(yīng)液,立即更換手套;2.使用一次性吸頭,嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,吸頭不要長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染;3.避免反應(yīng)液飛濺,打開(kāi)反應(yīng)管時(shí)為避免此
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多功能酶標(biāo)儀又稱(chēng)多功能微孔板檢測(cè)儀,可對(duì)以微孔板為體系的實(shí)驗(yàn)提供多種不同模式的檢測(cè)。通常,多功能酶標(biāo)儀至少可提供“吸收光”、“熒光”、“發(fā)光”三種不同的檢測(cè)模式。一些中多功能酶標(biāo)儀還可完成“時(shí)間分辨熒光”、“熒光偏振”、“熒光共振能量轉(zhuǎn)移”等熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。如何使用多功能酶標(biāo)儀?首先,多功能酶標(biāo)儀需要放在一個(gè)干凈、平整的工作臺(tái)上,做到防塵、防潮、防曬、防震、防撞。在使用儀器時(shí)使用符合儀器需要的電壓,電壓不穩(wěn)定的則要使用穩(wěn)壓器,使輸入酶標(biāo)儀的電壓保持穩(wěn)定。對(duì)于多功能酶標(biāo)儀使用方法通常分為4個(gè)步驟:1
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簡(jiǎn)單高效利用龍沙Nucleofector電轉(zhuǎn)技術(shù)重編程產(chǎn)生 iPSC
誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)是通過(guò)人工將干細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子引入預(yù)成熟或成熟的體細(xì)胞,從已經(jīng)分化的細(xì)胞類(lèi)型中衍生的多能干細(xì)胞。由于其類(lèi)似ESC的功能,iPSC已經(jīng)作為許多發(fā)育或疾病相關(guān)應(yīng)用的強(qiáng)大工具,幫助科學(xué)家進(jìn)一步確定發(fā)展機(jī)制或疾病發(fā)病機(jī)制,或作為進(jìn)行體外藥物篩選和毒性研究的新型人類(lèi)疾病模型,并具有成為再生醫(yī)學(xué)新工具的巨大潛力??茖W(xué)家通過(guò)病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)或非病毒轉(zhuǎn)染將干細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子引入原代體細(xì)胞中,可以簡(jiǎn)單地在實(shí)驗(yàn)室中產(chǎn)生誘導(dǎo)的PSC。不同組合中使用的典型重編程因子是Oct4,Sox2,Klf4, -
細(xì)胞轉(zhuǎn)染可分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子(如DNA,RNA等)導(dǎo)入(真核)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一。隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。細(xì)胞轉(zhuǎn)染可分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染指外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,通常只持續(xù)幾天,在轉(zhuǎn)染后24-72小時(shí)內(nèi)分析結(jié)果,多用于啟動(dòng)子和其他調(diào)控元件的分析。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染指外緣DNA既可以整合到宿主染色體中。通常需要通過(guò)一些選擇性標(biāo)記來(lái)篩選以得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系。根據(jù)轉(zhuǎn)染方法可以分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)。我們常用的細(xì) -
手持式近紅外光譜儀是利用物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的紅外輻射的吸收特性,進(jìn)行一系列精密分析的儀器。手持式近紅外光譜儀各項(xiàng)性能穩(wěn)定,數(shù)據(jù)具有良好再現(xiàn)性;功能齊全的化學(xué)計(jì)量學(xué)軟件;很好的支持建立模型和分析;并適用范圍足夠?qū)挼哪P?。手持式近紅外光譜儀在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)事項(xiàng):一、注意要符合規(guī)定的環(huán)境條件來(lái)使用,值得相信的紅外光譜儀廠家提醒要注意實(shí)驗(yàn)室的溫度以及相對(duì)濕度都應(yīng)該在標(biāo)準(zhǔn)范圍以?xún)?nèi),所用電源應(yīng)配備有穩(wěn)壓裝置和接地線。為了更好的把關(guān)這些條件,紅外實(shí)驗(yàn)室的面積不要太大,能放得下必須的儀器設(shè)備即可,但室內(nèi)