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2024
09-24

WB實驗中的磷酸酶抑制劑
一、WB實驗中的磷酸酶抑制劑的作用細胞或組織裂解時會釋放出大量內(nèi)源性蛋白磷酸酶，以各種方式催化磷酸化蛋白的去磷酸化，從而影響后續(xù)的蛋白檢測。因此在提取物中適量添加外源性磷酸酶抑制劑，有利于在之后的Westernblotting、免疫共沉淀檢測磷酸化蛋白質(zhì)和蛋白激酶活性測定等實驗過程中抑制磷酸化蛋白的去磷酸化，維持蛋白質(zhì)的磷酸化狀態(tài)。二、WB實驗中的磷酸酶抑制劑的作用原理在細胞信號轉(zhuǎn)導中，靶蛋白會被可將磷酸基團轉(zhuǎn)移到特定位點的蛋白激酶磷酸化。這些磷酸基團在細胞裂解時會被內(nèi)源性蛋白磷酸酶去除。磷酸酶
2024
09-24

WB實驗中的蛋白酶抑制劑
一、WB實驗中的蛋白酶抑制劑作用WB實驗中的蛋白酶抑制劑主要是在蛋白質(zhì)提取過程中，防止蛋白質(zhì)水解，從而保持蛋白質(zhì)的完整性。在蛋白質(zhì)純化、提取過程中常受到其本身存在的水解酶的影響。在提取蛋白質(zhì)的過程中細胞破碎釋放出蛋白酶，這些酶在與欲提取的蛋白質(zhì)接觸時，一旦條件適宜，就會發(fā)生反應，導致蛋白質(zhì)分解。二、WB實驗中的蛋白酶抑制劑的作用原理蛋白酶抑制劑（proteaseinhibitor）從廣義上指與蛋白酶分子活性中心上的一些基團結合，使蛋白酶活力下降，甚至消失，但不使酶蛋白變性的物質(zhì)。三、WB實驗中的
2024
09-24

蛋白Marker的分類
在WesternBlot實驗中，蛋白Marker的作用就像是參照標尺，用于目標蛋白分子量大小的確定、蛋白分離成功與否的判斷等。因此，選擇合適的蛋白Marker，對實驗來說至關重要，那你知道蛋白Marker的分類是如何劃分的嗎？讓我們一起來看看吧！一、非預染蛋白Marker非預染蛋白Marker是幾種已知分子量并純化好的蛋白質(zhì)預混液，方便不同大小的蛋白比較。其條帶在結合染料時，分子量不會改變，可準確評估SDS-PAGE的蛋白樣品分子量。非預染蛋白Marker在電泳過程中看不到，電泳結束后經(jīng)過蛋白染
2024
09-23

細胞復蘇的小Tips
一、細胞復蘇的原理細胞復蘇的原理是基于將細胞從液氮或-80℃冰箱中快速取出并使其恢復活力的技術。遵循“快融”原則，短時間內(nèi)融化胞外結晶，避免緩慢融化導致水分滲入胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結晶損傷細胞，融化越快，細胞損傷越小。二、細胞復蘇的小Tips1.為防止凍存管在水浴鍋中升溫時突然爆炸，可以在放入水浴鍋前先在生物安全柜中把蓋子擰松一下然后再擰上。2.從液氮罐里拿出細胞不必急于放入水浴鍋中，因為細胞從液氮的-196℃上升到-80℃這個過程對細胞是沒有損害的，我們有足夠的時間處理。但是，一旦細胞融化，應立即將
2024
09-23

細胞凍存的小Tips
細胞凍存是細胞培養(yǎng)中的關鍵環(huán)節(jié)，直接影響細胞存活率和活力，關系到后續(xù)細胞實驗能否按照計劃有效地進行。掌握好細胞凍存的小Tips，有助您做好細胞培養(yǎng)式樣，讓我們一起來看看吧！一、細胞凍存的基本原則細胞凍存遵循“慢凍”原則：讓細胞在超低溫環(huán)境中緩慢進入“冬眠”狀態(tài)，暫時停止其代謝活動。目的是保存細胞樣本，方便復蘇。二、細胞凍存的注意事項1.溫度控制不穩(wěn)定可能導致細胞存活率降低二甲基亞砜（DMSO）或甘油常作為冷凍保護劑，保護細胞。DMSO能快速穿透細胞膜進入細胞，降低冰點，延緩凍存過程，同時增加細胞
2024
09-21

WB-考馬斯亮藍染色法
一、考馬斯亮藍結構考馬斯亮藍R-250和G-250染料是二磺酸化三苯基甲烷化合物的兩種化學形式，結構上R-250比G-250少了2個甲基。二、蛋白質(zhì)染料要求用染料和生物大分子結合形成有色的復合物是電泳后檢測常用的方法。選用染料通常應考慮以下要求：1.必須與大分子結合以形成一個不溶性的，有色的，緊密的復合物，但不結合到凝膠中和支持膜上，以便從凝膠中除去，否則高背景會影響蛋白帶的辨別和定量掃描。2.染料必須容易溶解在對大分子沒有影響的溶劑中，以利于背景的脫色。3.選用高吸光系數(shù)的染料有利于提高定量測
2024
09-19

Elisa試劑盒怎么選？
在選擇ELISA試劑盒時，不同的用戶往往有不同的選擇標準，無論是靈敏度、樣本類型還是簡便性，核心標準是ELISA試劑盒的重現(xiàn)性。一、試劑盒的應用種屬、檢測樣本的種類一般來說，生產(chǎn)廠家都會在產(chǎn)品名稱上標明種屬，ELISA試劑盒種屬:人、小鼠、大鼠、兔、猴等。待檢樣本種類：體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿等。二、試劑盒的檢測范圍就是標準曲線范圍，特別要注意待測樣本濃度是否落在標準曲線范圍內(nèi)，對于高濃度樣本，需要先進行預實驗摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測定樣本。三、特異性就是陰性樣本
2024
09-19

QIAGEN凱杰QuantiNova Probe PCR Kit(208256)
QIAGEN凱杰QuantiNovaProbePCRKit(208256)產(chǎn)品簡介：QuantiNovaProbePCRKit是基于一種新的抗體介導的熱啟動機制，增強了基于探針的實時PCR的特異性和效率，從而在各種實時PCR循環(huán)儀上提供準確的、單重或雙重的cDNA或gDNA分析。在室溫下可保持長達100小時的穩(wěn)定性，無需任何冷卻劑，這使其成為處理高通量樣品和自動化工作流程的理想選擇。內(nèi)置的跟蹤系統(tǒng)可對正確的移液進行視覺識別，讓您安心，而即使是低目標量的極靈敏檢測也能確保每次都能獲得可靠的qPCR
2024
09-18

小鼠給藥操作
一、實驗小鼠的選擇挑選實驗小鼠一般都是根據(jù)實驗要求來篩選品系、品種，在小鼠年齡、體重、生理健康等方面要格外注意?；旧现灰獫M足以下注意事項，就能挑選到合適滿意的小鼠。1、首先要考慮小鼠是否符合國家標準。2、按照實驗目的和要求來選擇。3、不同季節(jié)和晝夜不同時間，動物機體反應性有一定改變4、不同種、同種而不同品系的小鼠對同一實驗處理反應有很大差別。5、年齡應盡可能一致，體重應大致相近，一般不應相差10%。6、小鼠性別，在實驗研究中，如無特殊要求，一般宜雌雄各半，以避免由于性別差異而造成的誤差。有些藥
2024
09-14

His-tag的由來
組氨酸標簽也稱His-tag，是一種簡單、應用廣泛的純化標簽，具有六個或更多連續(xù)的組氨酸殘基，其可插入目的蛋白的C末端或N末端。一是能構成表位利于檢測；二是構成的結構特征（結合配體）利于純化。His標簽我們經(jīng)常會看到，做蛋白親和純化的小伙伴們應該就沒有沒聽過His名號的吧?？墒撬烤箯暮味鴣砟?？一、起源1975年,J.Porath等人的研究論文中，實驗者將金屬螯合親和層析（簡稱MCAC）技術應用于蛋白分離。研究者首先將金屬離子（如Cu2+、Ni2+等）固定到IDA-衍生的凝膠上，形成金屬螯合親和
2024
09-13

怎么預防細胞污染？
一、前言經(jīng)常做實驗的小伙伴都知道，從事細胞培養(yǎng)工作時都有可能面臨細胞受到污染的境況。對于細胞的受污染問題，最為緊要的在于防范，因為一旦細胞受到污染，欲挽回已十分艱難，即便成功挽回，細胞的狀態(tài)亦會受損，進而對實驗結果造成影響。因此，讓我們首先探討一下如何有效地進行預防。生物安全柜是細胞處理的主要場所，而培養(yǎng)箱是細胞生長的主要場所，所以細胞污染通常就發(fā)生在這兩個地方。那么在使用生物安全柜和培養(yǎng)箱時如何做好預防措施呢？二、措施1.所有進入安全柜的東西都要盡可能保證無菌如果實驗室條件允許，那直接購買商品
2024
09-11

Millipore超濾離心管操作步驟
一、Millipore密理博超濾離心管0.5ml簡介Millipore密理博超濾離心管0.5ml，即Amicon@Ultra-0.5超濾離心管，具有快速超濾功能，能夠達到較高的濃縮倍數(shù)，輕松實現(xiàn)從稀釋和復雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。垂直設計的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理，獲得較高的樣本回收率(通常90%),并達到30倍的濃縮。根據(jù)標稱分子量限值(NMWL)的不同，典型處理時間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設計也降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結垢；過濾管的死體積設計能有效防止過
2024
09-10

一文了解WB-BCA法
一、BCA法的原理BCA法又被稱為Smith法，是由Pierce公司的PaulK.Smith等人在1985年對Lowry法進行改進，提出用BCA代替Folin-酚試劑而建立的（Smith,P.K.,etal.Measurementofproteinusingbicinchoninicacid.AnalBiochem.1985,150:76-85.）。該方法的原理是，在堿性條件下，蛋白質(zhì)中的肽鍵與Cu2+絡合，同時將Cu2+還原為Cu+，BCA螯合Cu+形成紫色絡合物，測定562nm的OD值來計算
2024
09-10

ELISA檢測方法
ELISA檢測方法一、elisa直接法直接ELISA法是將抗原固定在96孔板上，然后用酶標抗體直檢測抗原。直接ELISA實驗步驟少，檢測速度快，不需要用到二抗，避免了交叉反應，測定結果不容易出錯。但是由于直接ELISA的抗原通過吸附而不是特異性固定的，樣本中的所有蛋白質(zhì)(靶蛋白及其他雜質(zhì)蛋白)都會固定在96孔板上，導致背景比較高。而且直接ELISA每種靶蛋白都需要標記與其特異性結合的一抗，實驗顯得不太靈活。另外由于沒有使用二抗，沒有放大作用，降低了測定的靈敏度。優(yōu)點：實驗步驟少，檢測速度快，因無
2024
09-09

銷售goldbio熒光素哪家好？
購買goldbio熒光素鹽請選擇goldbio代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司！在生物科學研究領域，熒光素鹽作為一種重要的生物標記工具，已經(jīng)廣泛應用于多種生物標記技術中。Goldbio熒光素鹽以其高純度、高靈敏度和快速響應的特性，為生物標記技術提供了強有力的支持。一、熒光素介紹熒光素酶(Luciferin)是一種常用的生物發(fā)光報告劑，用于體內(nèi)熒光素酶表達的成像。熒光素酶的這種水溶性底物利用ATP和Mg2+作為輔助因子，在有氧的情況下發(fā)出特征性的黃綠色輻射，在37℃時在體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)榧t光。通過利用AT
2024
09-06

進口NA12878全國代理
進口NA12878全國代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司！下面讓我們一起了解一下CoriellInstitute的NA12878這個產(chǎn)品吧~一、公司簡介Coriell由病毒學家LewisL.Coriell博士于1953年創(chuàng)立。今天，Coriell的使命是通過生成的生物材料并在個性化醫(yī)療和干細胞生物學領域開展突破性研究，加速科學發(fā)現(xiàn)。我們在幾個方面正在追求理解人類遺傳疾病的使命。Coriell個性化醫(yī)學協(xié)作（CPMC）研究正在努力了解遺傳信息在臨床護理中的作用。我們還在細胞生物學的基礎上，在誘導性多
2024
09-05

艾碧維細胞如何？
一、公司簡介：長沙艾碧維生物科技有限公司（ChangshaAbiowellBiotechnologyCo.,Ltd.）成立于2016年，是一家主要從事生物試劑研發(fā)、生產(chǎn)、銷售并提供技術服務的生物科技公司。公司主要產(chǎn)品包括抗體、細胞、培養(yǎng)基和質(zhì)粒載體等產(chǎn)品。公司致力于為生物科學領域內(nèi)的客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品和優(yōu)質(zhì)的服務。公司擁有員工100多人，碩士以上生物醫(yī)學相關專業(yè)人員占比超過20%，博士學歷員工2人。公司下設研發(fā)部、生產(chǎn)部、市場部和營銷部、財務部。二、部分細胞產(chǎn)品列表產(chǎn)品貨號產(chǎn)品英文代號產(chǎn)品名稱
2024
09-04

RayBio應對猴痘病毒的解決方案
一、前言猴痘病毒通常在中非和西非地區(qū)流行，但自從在非流行地區(qū)發(fā)現(xiàn)以來，該病毒最近已傳播到多個非洲國家，隨著感染和死亡人數(shù)激增，2024年8月14日，世衛(wèi)組織再次宣布猴痘疫情為“國際關注的突發(fā)公共衛(wèi)生事件”。兒童致死率超60%的新型猴痘病毒“分支Ib”型變異毒株于22日在泰國被確診，成為亞洲首ge。目前對猴痘的流行病學特征仍知之甚少，針對病毒的研究、潛在的免疫機制及相應的疫苗、藥物的研發(fā)迫在眉睫。RayBio具有從核酸檢測到蛋白質(zhì)研究的試劑盒及原料，可用于猴痘病毒感染的系列研究，疫苗、治療藥物的開
2024
09-03

凡知醫(yī)學高保真PCR預混液原理
一、凡知醫(yī)學高保真PCR預混液目錄表貨號產(chǎn)品規(guī)格FG2207高保真PCR預混液1ml二、凡知醫(yī)學高保真PCR預混液原理凡知高保真PCR預混液的原理主要基于PCR技術、高保真DNA聚合酶的使用，以及特定的緩沖體系和添加劑，以確保高特異性和高保真性。1.PCR技術聚合酶鏈式反應（PCR）技術，這是一種在體外酶促擴增特定DNA片段的技術，類似于DNA的天然復制過程。PCR技術利用一對與模板DNA兩端互補的寡核苷酸引物，在DNA聚合酶的作用下，沿著模板鏈延伸至完成新的DNA合成，不斷地重復這一過程，使目
2024
09-02

【四正柏】細胞凋亡的明星分子、熱門通路
一、前言細胞凋亡，屬于細胞程序性死亡（PCD），其實是一種優(yōu)雅而體面的死亡方式。優(yōu)雅，細胞內(nèi)各種凋亡分子齊聚，上演奔向死亡的交響樂。體面，細胞從出生到老死的過程中除了不停地創(chuàng)造著屬于它的價值之外，在奔向死亡的路上有著不同的道路以及引路者也就是明星凋亡分子。本文通過盤點凋亡通路、明星分子、檢測方法，帶你進一步了解細胞凋亡的研究思路。二、凋亡通路方式原理線粒體通路Bax家族與Bcl-2家族聯(lián)手，改變線粒體膜的通透性，使得跨膜電位丟失并釋放細胞色素C（CytC）和其他蛋白，誘導Caspase通路級聯(lián)反

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