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2024
07-18

細胞凍存與復(fù)蘇的常見問題
細胞凍存與復(fù)蘇的常見問題細胞冷凍保存是細胞保留的主要方式之一。借助冷凍技術(shù)，將細胞置于-196℃的液氮中，可使其暫時脫離生長狀態(tài)并保持其細胞特性，以備日后在實驗中復(fù)蘇使用。這一方法不僅可以預(yù)防正在培養(yǎng)的細胞遭受污染或其他意外情況而導(dǎo)致種群喪失，同時也發(fā)揮了細胞保護的功效。那么你知道細胞凍存與復(fù)蘇的常見問題嗎？讓我們一起來看看吧！一、細胞凍存為什么要添加保護劑細胞凍存是將細胞放在低溫環(huán)境，減少細胞代謝，以便長期儲存的一種技術(shù)。細胞在不加任何保護劑的情況下冷凍，細胞內(nèi)外的水分會很快形成水晶從而引發(fā)一
2024
07-10

DMEM培養(yǎng)基的主要成分與應(yīng)用
DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)是一種廣泛應(yīng)用于細胞培養(yǎng)領(lǐng)域的基本培養(yǎng)基。下面讓我們一起來看看DMEM培養(yǎng)基的主要成分與應(yīng)用吧！DMEM培養(yǎng)基的主要成分包括：糖類：例如葡萄糖，為細胞提供能量和碳源。氨基酸：作為蛋白質(zhì)合成的基本組成部分。維生素：如維生素B群、維生素C等，參與細胞代謝過程。礦物質(zhì)：包括鈉、鉀、鈣、鎂等，維持細胞內(nèi)外的離子平衡。胺基酸：例如谷胱甘肽、谷氨酰胺等，具有抗氧化和細胞保護作用。添加劑：例如胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白等，為特定類型的細胞提供必需的生
2024
06-06

PCR反應(yīng)體系包括什么
PCR是一種選擇性體外快速擴增DNA片段的方法。在體外以類似于細胞內(nèi)DNA的半保留復(fù)制過程，以擬擴增的模板DNA分子，與模板DNA互補的寡核苷酸引物、DNA聚合酶、4種dNTP及適合的緩沖體系組成的反應(yīng)體系，經(jīng)過重復(fù)地變性一退火一延伸三步，擴增新的目的DNA鏈，這個過程通過控制反應(yīng)體系的溫度來實現(xiàn)。那么你知道PCR反應(yīng)體系包括什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、模板(template)模板即擴增用的DNA，可以是任何來源DNA(如基因組DNA、質(zhì)粒DNA等)或RNA(如總RNA、mRNA、tRNA、
2024
05-30

為什么qPCR提RNA不提DNA
定量PCR（qPCR）是一種在PCR反應(yīng)中實時監(jiān)測核酸擴增產(chǎn)物的方法。為什么qPCR提RNA不提DNA？RNA更能反映gene的表達水平依據(jù)中心法則，細胞內(nèi)的DNA序列首先被轉(zhuǎn)錄成RNA分子，特別是信使RNA（mRNA），隨后mRNA攜帶遺傳信息，用于指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。mRNA的豐度和多樣性是衡量基因表達水平的關(guān)鍵指標，它們直接關(guān)聯(lián)到特定基因在特定時間和條件下的活性。與蛋白質(zhì)相比，RNA的水平變化能夠更快地反映基因表達的動態(tài)變化，因為RNA的穩(wěn)定性相對較低，其水平變化可以迅速響應(yīng)細胞內(nèi)外部環(huán)境的
2024
05-30

RNA和WB蛋白的關(guān)系是怎樣的？
qRT-PCR（定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）和Westernblot（蛋白質(zhì)印跡法）是兩種常用的生物分子檢測技術(shù)，它們分別用于檢測mRNA和蛋白質(zhì)的表達水平。雖然蛋白質(zhì)是由mRNA翻譯而來，但mRNA的表達水平總是與蛋白質(zhì)的表達水平一致嗎？做實驗任何一個結(jié)果如果你驗證了幾遍都是一樣，那么請不要懷疑自己，也許不是你做錯了，試圖去解釋這種現(xiàn)象!蛋白表達和RNA水平不一致的原因有：轉(zhuǎn)錄后調(diào)控：mRNA在轉(zhuǎn)錄后可以經(jīng)歷多種調(diào)控過程，如剪接、編輯、降解和穩(wěn)定性調(diào)控。這些過程可以影響mRNA的穩(wěn)定性和翻譯效率。
2024
05-30

加藥處理的細胞如何換液？
加藥處理的細胞換液，需要遵循一定的操作步驟，確保實驗環(huán)境的無菌以及細胞的健康生長。以下是換液的一般步驟：1換液時間：一般建議每24或者48小時換液一次。2準備新的培養(yǎng)基：根據(jù)細胞類型和生長需求，選擇合適的培養(yǎng)基。確保培養(yǎng)基新鮮、無菌，并在使用前預(yù)熱至37℃。收集舊培養(yǎng)基：輕輕搖晃培養(yǎng)瓶，使舊培養(yǎng)基充分混合。使用移液器將舊培養(yǎng)基收集到廢液缸。注意不要觸碰到細胞表面。3添加新培養(yǎng)基：將收集到的舊培養(yǎng)基丟棄，向培養(yǎng)瓶中加入新的培養(yǎng)基。確保新的培養(yǎng)基充分覆蓋細胞表面，避免氣泡產(chǎn)生，也可以部分換液，保留一
2024
05-22

你知道細胞轉(zhuǎn)染實驗中轉(zhuǎn)染效率低的原因嗎？
轉(zhuǎn)染細胞效率低下的原因在生物醫(yī)學(xué)研究中，將外源基因?qū)爰毎匝芯科涔δ芑蚴辜毎宫F(xiàn)出新的特性是非常常見的實驗手段。然而，轉(zhuǎn)染細胞的效率低下一直是科研人員面臨的一大難題。今天小編將探討轉(zhuǎn)染細胞效率低下的原因，以期為提高轉(zhuǎn)染效率提供有益的思路。1.細胞類型和狀態(tài)不同的細胞類型具有不同的轉(zhuǎn)染效率。一些難轉(zhuǎn)染的細胞，如神經(jīng)元和肝細胞，通常需要更復(fù)雜的轉(zhuǎn)染技術(shù)。此外，細胞的生長狀態(tài)也會影響轉(zhuǎn)染效率，處于對數(shù)生長期的細胞更容易接受外源基因。如果是貼壁細胞的話，貼壁率應(yīng)該在70-80%；如果是懸浮細胞的話，應(yīng)
2024
05-22

RNA的種類與功能介紹
RNA的分類1.信使RNA(mRNA)信使RNA是RNA的一種，主要功能是將DNA上的遺傳信息傳遞到蛋白質(zhì)合成機器——核糖體上，從而實現(xiàn)蛋白質(zhì)的。信使RNA的結(jié)構(gòu)簡單，一般由一條單鏈RNA組成。mRNA的長度差異較大，哺乳動物的mRNA長度一般在5×102～1×105個核苷酸，這種長度的差異使得mRNA能夠攜帶更多的遺傳信息。在細胞中，mRNA的含量占到了總RNA的1%～5%，雖然mRNA的含量相對較少，但種類繁多，因為人體中約有2萬多個基因，每個基因都會產(chǎn)生一種mRNA。正是這些含量低的mRN
2024
05-16

實驗中的抗體應(yīng)用問題和解決方案
抗體是一種由漿細胞（效應(yīng)B細胞）分泌，被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì)，僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中，及其B細胞的細胞膜表面?？贵w能識別特定外來物的一個特征，該外來目標被稱為抗原。1.做流式的抗體和免疫組化的抗體是一樣的嗎?不一定能通用。流式是用直接標記還是間接標記?如果是直接標記的話，那這個抗體一般不是FITC標記或者就是TRITC，PE之類的。如果恰好你的免疫組化，也是想用熒光素標記的抗體來直接標記，那就可以通用。如果你的免疫組化要用其它的標記的話，或者
2024
05-16

一步法RT-qPCR實驗優(yōu)化小技巧
常見的RT-qPCR流程一般分為RNA提取，逆轉(zhuǎn)錄、熒光定量PCR三個步驟，當有的課題需要對某物種進行多種處理后，檢測某個基因的表達水平，以驗證該基因應(yīng)對不同脅迫壓力的耐受力；或者經(jīng)某種病原菌侵染后，檢測寄主不同基因的表達水平，以探究可能涉及的通路及互作機理等……對于這幾類樣本數(shù)量較大，但樣本只需要檢測一次的實驗方案，我們常常推薦一步法RT-qPCR，即逆轉(zhuǎn)錄與熒光定量PCR配制一管體系，只需一次上機即可完成表達量的檢測。由于將RNA逆轉(zhuǎn)錄與熒光定量PCR的體系配制合為一步，那么對于實驗操作的精
2024
05-16

石蠟切片Protocol實驗需要注意哪些要點呢？
石蠟切片是一種常見的組織學(xué)技術(shù)，用于觀察組織的微觀結(jié)構(gòu)。在進行石蠟切片實驗時，有許多細節(jié)需要注意，這些細節(jié)往往決定了切片的質(zhì)量和結(jié)果的準確性。那么石蠟切片Protocol實驗需要注意哪些要點呢？本期內(nèi)容將為你揭示一些關(guān)鍵的細節(jié)，助你獲得最佳的石蠟切片效果。1.組織固定1）取新鮮組織，分割塊的大小，宜小不宜大，一般不超過1cm3，用預(yù)冷的PBS沖洗，置于10%的福爾馬林固定液中固定24小時。2）取出組織，蒸餾水沖洗30分鐘。2.組織脫水，包埋，切片1）自動脫水：設(shè)定脫水程序，70%酒精30min－
2024
05-16

細胞貼壁不均勻的原因有哪些呢？
在培養(yǎng)貼壁細胞的時候，偶爾會出現(xiàn)細胞接種后貼壁不均勻的情況。有的地方長得非常密集，有的地方卻太稀疏。雖然這對于常規(guī)培養(yǎng)并不算大問題，但有時則可能影響后續(xù)的實驗進程。所以一旦遇到貼壁不勻，建議排查原因并優(yōu)化操作方案。那么，造成細胞貼壁不均勻的原因有哪些呢？本期內(nèi)容一起來跟著小編的腳步學(xué)習(xí)一下吧！情況一：局部生長密集，密集處呈不規(guī)則分布原因：一般是接種時沒有混勻，或者細胞傳代時沒有消化che底從而形成細胞團塊導(dǎo)致的解決方案：繼續(xù)培養(yǎng)1-2天，待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，重新消化接種，接種時注意使用十字法或8字
2024
05-11

為什么要選擇無血清的間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基呢？
間充質(zhì)干細胞是一種具有多向分化潛能的細胞，能夠分化成多種類型的細胞，包括骨、軟骨、脂肪、肌肉等。因此，它們在組織工程和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。然而，要實現(xiàn)這些應(yīng)用，首先需要獲得足夠數(shù)量的間充質(zhì)干細胞，并且這些細胞必須保持其分化潛能和生物活性。間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基通過提供必要的營養(yǎng)物質(zhì)、生長因子和其他關(guān)鍵成分，為間充質(zhì)干細胞的生長和分化提供了有力的支持。這些成分能夠模擬體內(nèi)環(huán)境，使間充質(zhì)干細胞在體外培養(yǎng)中能夠正常增殖和分化，同時保持其多向分化潛能?，F(xiàn)如今。市面上出現(xiàn)了很多專注于間充質(zhì)干細胞培
2024
05-11

BloomStem™間充質(zhì)干細胞擴增AOF培養(yǎng)基簡介
隨著人們對細胞培養(yǎng)安全性和穩(wěn)定性的重視，可通過代替胎牛血清等動物源性成分進而改善研究的安全性的無異源成分培養(yǎng)基（Xeno-Free，XF）逐漸投入使用。但XF培養(yǎng)基仍存在一定的限制，如血制品可能攜帶HIV、HBV以及未知病毒等潛在風(fēng)險、人源性成分引起免疫原性反應(yīng)、供體差異引起的產(chǎn)品性能差異以及終產(chǎn)品的工藝和質(zhì)量控制難度大等問題。因此，為了滿足下游生物醫(yī)藥領(lǐng)域客戶對安全性的更高需求，以及相應(yīng)指導(dǎo)原則的建議，使用安全性更高的無人源和動物源性成分的培養(yǎng)基、降低生物制品的安全風(fēng)險具有重要意義?；瘜W(xué)成分限
2024
05-11

你了解間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基嗎？
間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基是一種專門為人類間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)設(shè)計的培養(yǎng)基，旨在為其提供一個適宜的生長環(huán)境。這種培養(yǎng)基經(jīng)過精心配制，包含了細胞生長所必需的多種營養(yǎng)物質(zhì)，以支持干細胞的增殖、分化和維持其多向分化潛能。間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基的主要特點包括無血清、不含異源動物成分，所有成分均明確且來自同種來源（人類）。這種培養(yǎng)基不含抗生素，因此不會對細胞產(chǎn)生不良影響。此外，間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基還能夠培養(yǎng)不同來源的人類間充質(zhì)干細胞，如骨髓和臍帶等。在培養(yǎng)基的配方方面，間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基通常包括基礎(chǔ)培養(yǎng)液和補充物兩部分
2024
05-10

STEMCELL品牌的產(chǎn)品應(yīng)用在哪些領(lǐng)域
STEMCELL品牌作為北京百奧醫(yī)藥科技有限公司旗下的重要品牌之一，專注于生命科學(xué)領(lǐng)域，產(chǎn)品線廣泛且專業(yè)，涵蓋了細胞與基因、免疫學(xué)、分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)等多個方向。以下是STEMCELL品牌各個產(chǎn)品線的特點：1.細胞與基因產(chǎn)品線：該產(chǎn)品線提供了多種高質(zhì)量的細胞系、原代細胞、干細胞、基因轉(zhuǎn)染和基因編輯等試劑和工具，以滿足科研人員在細胞與基因研究領(lǐng)域的各種需求。應(yīng)用領(lǐng)域：廣泛應(yīng)用于干細胞研究、基因治療、藥物篩選等領(lǐng)域。2.免疫學(xué)產(chǎn)品線：該產(chǎn)品線提供了豐富的免疫學(xué)試劑、抗體、細胞因子、免疫細胞分離和
2024
05-10

ELISA實驗的注意事項
ELISA法的免疫反應(yīng)部分中，抗原-抗體的親和力、抗原和半抗原的性質(zhì)、測定方法的實驗條件、酶標記物的性質(zhì)等因素均會影響反應(yīng)的敏感性。在酶學(xué)反應(yīng)部分中，酶的濃度、底物的濃度、反應(yīng)pH、溫度、酶的抑制劑和激活劑等因素也影響反應(yīng)的敏感性。下面讓我們一起來看看ELISA實驗的注意事項吧！需要注意以下幾點：(1)待測樣品溶液中不能存在與標記酶相同的酶、底物、酶抑制劑和其他干擾因素，以防止干擾作用。(2)聚苯乙烯反應(yīng)板測定時，溶液宜垂直滴入凹孔中間，相繼加入的溶液都覆蓋相同的載體表面積。在吸附、溫育和洗滌等
2024
05-10

STEMCELL品牌產(chǎn)品介紹
STEMCELLTechnologies是一家在細胞生物學(xué)領(lǐng)域具有顯著影響力的公司，其產(chǎn)品線廣泛且多樣化，涵蓋了細胞培養(yǎng)、細胞分離、細胞分析和細胞應(yīng)用等多個方面。這些產(chǎn)品線不僅具有高度的專業(yè)性和技術(shù)性，同時也體現(xiàn)了STEMCELL對于細胞生物學(xué)研究的深入理解和創(chuàng)新追求。首先，STEMCELL的細胞培養(yǎng)產(chǎn)品線提供了多種類型的培養(yǎng)基和補充劑，以滿足不同細胞類型在體外培養(yǎng)過程中的營養(yǎng)需求。這些產(chǎn)品經(jīng)過精心設(shè)計和優(yōu)化，旨在提供最佳的細胞生長環(huán)境，保證細胞的健康狀態(tài)和增殖能力。其次，在細胞分離方面，STE
2024
05-09

你了解QIAGEN凱杰試劑盒嗎？
QIAGEN凱杰試劑盒是一種常用于分子生物學(xué)研究的試劑盒，其分為不同的純度級別，包括測序級純、分子生物學(xué)級純、轉(zhuǎn)染級純和超轉(zhuǎn)染級純。該試劑盒可以用于純化各種樣本中的DNA和RNA，包括血液、無細胞體液、組織等。其中，QIAGEN74106試劑盒可以高通量純化血液或無細胞體液中的總DNA，包括基因組DNA、線粒體DNA和病毒DNA，純化量高達60μg。這個試劑盒具有快速純化、高品質(zhì)、即用型DNA的特點，無需有機提取或乙醇沉淀，可以持續(xù)高產(chǎn)量地去除污染物和下游反應(yīng)抑制物。另外，QIAGEN凱杰通用型
2024
05-09

QIAGEN凱杰核酸純化試劑盒怎么樣？
QIAGEN是一家總部位于德國的跨國經(jīng)營企業(yè)，專注于生物分子樣品制備解決方案。該公司成立于1984年，并于1996年在美國紐約納斯達克上市。QIAGEN在全球設(shè)有亞太、日本、北美、歐洲四個地區(qū)總部，并在超過35個城市擁有3900多名員工。截至2011年12月31日，QIAGEN擁有超過500種產(chǎn)品，服務(wù)超過40萬用戶，并擁有409個已被批準的zhuan利。在過去的20多年里，QIAGEN發(fā)展迅速，近10年的平均銷售增長達到了25%，利潤增長平均在33%左右。QIAGEN提供超過500類的產(chǎn)品，包

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