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使用細胞轉染構建穩(wěn)定細胞系的方法2022/11/09
使用細胞轉染構建穩(wěn)定細胞系的方法細胞系的穩(wěn)定對于其廣泛應用具有重要作用。經過細胞轉染后的穩(wěn)定細胞系適用于重組蛋白的生產、基因功能研究以及藥物發(fā)現(xiàn)分析。目的基因在細胞系中穩(wěn)定表達,克服了瞬時表達轉染效率低的問題,產生更多的目的蛋白。實現(xiàn)細胞系的穩(wěn)定主要有兩種途徑:一種是通過真核載體實現(xiàn),該載體在轉染細胞的細胞核中含有用于附加體維持的元件。另一種是通過將轉染的質粒直接整合到靶細胞基因組中來實現(xiàn)。由于附加型的穩(wěn)定性比較有限,附加型質粒元件通常僅限于某些物種,因此通常使用整合到宿主細胞染色體中。這種方法
有沒有什么辦法可以降低超純水機耗材的消耗速度?2022/11/09
超純水儀是實驗室常用的基礎實驗室設備之一,它的主要作用是為實驗室提供純水、超純水等符合實驗室標準的特殊用水需求。純水機的耗材需要定期更換,所以每年實驗室經費開支中純水設備耗材也占有不少的比例,為什么總感覺這些實驗室耗材的消費速度很快?有沒有什么辦法可以降低超純水機耗材的消耗速度呢?一、節(jié)約用水,即取即用。當水處于非流動狀態(tài)時,比較容易滋生微生物。尤其是實驗室超純水由于對水的要求標準比較高,過久儲存很容易受到外界環(huán)境中的微塵、空氣中的CO2等發(fā)生反應,造成PH值下降。如果提前取水往往取水的時候水質
超純水機配件和純水設備耗材主要有哪些2022/11/09
超純水機和純水機在實驗室中廣泛使用,一臺純水機價格從幾千元到數(shù)十萬元不等。其實純水機的結構并不是很復雜,所以機器本身的故障率發(fā)生率并不高。值的注意的是超純水機配件以及純水設備耗材都屬于易耗品,需要經常定期更換,這些維護成本才是純水機耗錢的主要原因。那么純水機的配件都有哪些呢?下面小編就列一下純水機和超純水機設備上常用的配件及耗材。一、超純水設備中的耗材超純水設備耗材中更換頻率較高的耗材主要有:預處理柱(預純化柱)、純化柱(反滲透柱),超純化柱三種,超純水機其他配件包括水箱空氣過濾器、PES終端過
HPLC分析實驗選擇哪種實驗室純水機?2022/11/09
HPLC分析法也就是高效液相色譜分析法,這種實驗方法更主要用來分離、分析高沸點、熱穩(wěn)定較差及相對分子量比較大的物質。主要應用領域為核酸類、肽類、內酯類、稠環(huán)芳烴類、高聚物類、藥物、人體代謝產物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲劑等物質分析。在HPLC分析實驗中,HPLC分析柱以及分析試劑對實驗的結果都有著較大的影響。尤其是實驗室純水的指標,是影響HPLC分析實驗的關鍵因素。那么經常做這種實驗的實驗室選擇哪種實驗室純水機比較合適呢?一、實驗室純水中的污染物會對HPLC分析實驗產生哪些影響?1.有機物:實
細胞轉染方法有哪些2022/11/09
細胞轉染方法有哪些細胞轉染技術是一種常見的實驗室細胞培養(yǎng)技術,主要應用于生命科學研究領域、藥物研發(fā)、新藥開發(fā)等領域。細胞轉染技術可以分為體外轉染和體內轉染兩種技術。體外轉染是指將遺傳物質(例如核酸-DNA或RNA)遞送到培養(yǎng)的細胞(通常是癌細胞系)中。體內轉染是指將小分子基因片段(如治療性siRNA、質粒DNA、小蛋白等)遞送至靶組織。細胞轉染可以使用自行使用轉染試劑盒進行細胞轉染操作,或者由生物CRO所提供的可以獲得GLP認證的細胞轉染服務。當前的細胞轉染方法主要有物理方法和化學方法兩種:這些
消毒劑的分類和應用2022/10/21
消毒劑的分類和應用制藥廠消毒劑有哪些?消毒劑根據(jù)消毒方式大致分為兩類,即。物理方法和化學方法。物理方法熱滅菌:主要使用干熱和濕熱進行消毒作用。在濕熱滅菌中,巴氏殺菌主要用于溫度低于100°C的消毒。這種巴氏殺菌是一種旨在減少微生物并消除植物性細菌而不是某些食品和飲料中的細菌孢子的過程。牛奶的巴氏殺菌首先在約63°C的溫度下進行30分鐘或加熱到更高的溫度,72°C,并保持15秒進行消毒。過濾:這種方法適用于對熱不穩(wěn)定的流體,如抗生素、維生素和其他生長因子,具有非常細的孔徑小于0.45微米的膜過濾器
離心濃縮蒸發(fā)系統(tǒng)的核心部件及功能介紹2022/10/19
離心濃縮蒸發(fā)系統(tǒng)的核心部件主要包括真空蒸發(fā)系統(tǒng)、離心濃縮系統(tǒng)和冷阱或冷凝器。在該系統(tǒng)中壓力控制,系統(tǒng)平衡式確保溶劑去除和溶劑回收的效能的關鍵。真空蒸發(fā)系統(tǒng)真空蒸發(fā)系統(tǒng),包括冷凍干燥機和離心濃縮機,需要真空源。這可能會用到真空泵或抽吸泵,由于對環(huán)境的負面影響,抽吸泵由于用水量大,溶劑蒸氣冷凝并污染要浪費的水的所以抽吸泵的已逐漸被淘汰。使用傳統(tǒng)的真空泵雖可以提供較好的效能,其高流速壓力小于0.02mbar。然而,用于潤滑泵葉片的礦物油很臟,隨著時間的推移會被溶劑蒸汽降解,導致泵性能下降或泵卡死。所以
細胞周期檢查的調節(jié)機制和重要性2022/10/19
細胞周期檢查點及其調節(jié)機制中的細胞周期檢查點:●細胞通常在體積翻倍時進行分裂,但實際上細胞分裂過程的控制非常復雜且精確。細胞分裂的所有過程或步驟都是按順序發(fā)生的,并且細胞知道何時進行以及何時等待和停止細胞分裂。●在DNA復制完成之前或當染色體或紡錘體纖維受損時,連續(xù)的細胞分裂會給細胞甚至有機體帶來災難性的后果。因此,在進行細胞分裂之前,細胞的各個方面都要通過其內部機制進行檢查?!駲z查點是真核細胞周期中的幾個點之一,在這些點上,可以停止細胞向細胞周期下一階段的進程,直到條件有利。●在循環(huán)期間會發(fā)生
顯微鏡下的微觀世界2022/10/13
標簽:蛋白質結構蛋白質合成細胞顯微鏡科學科普植物和小狗看起來*不同,正是因為不同細胞構成了這兩種生物。細胞存在于原核生物和真核生物中,如果用顯微鏡留心觀察你會發(fā)現(xiàn)原核細胞和真核細胞的結構和不同功能明顯不同。了解細胞生物學將幫助您了解生物的基礎。一、什么是細胞?細胞是構成所有生物體的基本構件,平均直徑大約在10~20um之間。所以,如果沒有顯微鏡,您將無法看到大多數(shù)單個細胞。在1660年代,科學家羅伯特·胡克(RobertHooke)通過使用顯微鏡檢查軟木塞的一部分發(fā)現(xiàn)了細胞。細胞可以形成組織,組
透射電鏡 、掃描電鏡、反射電鏡三種常見電子顯微鏡原理及應用介紹2022/10/13
電子顯微鏡是科研實驗室的重要實驗設備,那么電子顯微鏡有哪些種類呢?其實,常見的類型主要有3種:透射電鏡TEM、掃描電鏡SEM以及反射電鏡REM。一、透射電子顯微鏡TEM透射電子顯微鏡是電子顯微鏡的原始類型,它的主要原理是將高壓電子束引導至樣品以照亮樣品并產生樣品的放大圖像。由于透射電鏡具有原位觀察、高分辨顯像等功能,適宜觀察光學顯微鏡觀察不到的細微結構。比如:細胞、組織分析、晶體結構等。透射電鏡顯微成像原理是:通過鎢絲電極的陰極發(fā)射電子束,再用陽極加速電子束,當電子束穿過標本時,它會發(fā)生散射,并
共聚焦顯微鏡的應用2022/10/13
什么是共聚焦顯微鏡?共聚焦顯微鏡是激光共聚焦掃描顯微鏡LCSM的簡稱,它顯微成像主要采用3D捕獲的成像技術,使其具有較高的三維圖像分辨率。這些都是通過構建顯微照片來實現(xiàn)的。在熒光顯微鏡使用過程中,由于需要高強度紫外光輔助成像,所以顯微鏡內的汞弧燈產生的強光可能會導致令人不安的背景噪音,甚至會導致光漂白。共聚焦顯微鏡原理是通過數(shù)碼相機針孔的高強度激光來實現(xiàn)數(shù)字成像的技術,有效避免了熒光顯微鏡所產生的問題。共焦顯微鏡原理共聚焦顯微鏡中的圖像是來自一個焦平面的光通過針孔數(shù)碼相機聚焦拍攝,從而規(guī)避來自其
實驗室用水主要有哪幾類2022/10/12
實驗室用水主要有:超純水、雙蒸水、三蒸水、去離子水、蒸餾水、RO水等。超純水:又稱為高純水、UPW,超純水的純化程度較高,基本可以滿足大部分實驗用水要求。一般使用超純水機、超純水儀等超純水設備來制備。這類水適合高靈敏度ICP/MS質譜分析、同位素分析、以及疾控中心、藥檢所、質檢所、環(huán)監(jiān)站、高校和科研院所等實驗室及各種精密儀器用水。三蒸水:主要用于注射用水。雙蒸水:經去熱源操作的超純水,可用作注射水。去離子水:可以做生物實驗室配制生物試劑的實驗是用水。RO水:是通過離子交換樹脂的方式采用RO水處理
實驗室純水機長期不使用,重新開啟時要注意什么?2022/10/12
由于一些特殊情況,比如:長期停電、放長假等原因需要暫停使用純水機,那么實驗室純水機長期不使用,重新開啟時要注意些什么?對于長期不使用的純水機重新開機需要注意以下幾個方面:一、純水機水箱:純水機的水箱也就是儲水箱,如果長時間不使用,由于水箱內的純水長時間不流動會導致水箱內的細菌、微生物的滋生。陽光充足時,甚至還會有生物藻類借機生存,這些都會使純水水質大幅度降低。如果水箱沒有安裝空氣過濾裝置的,會吸入外界環(huán)境中的CO2、細菌、顆粒和揮發(fā)性有機物,水箱中的純水水質會更差。附著在水箱內壁的細菌,在水箱表
密理博milliopre終端過濾器選型指南2022/10/12
密理博milliopre超純水系統(tǒng)的配件不僅包含預純化柱、RO膜組件、紫外燈、超純化柱、離子交換柱等,還包含終端過濾器。默克的終端過濾器主要有以下幾種:1.密理博MilliPak終端過濾器:主要用于去除細菌、直徑0.22µm的顆粒物。經過此過濾器的超純水多數(shù)應用于分析測試和一些常規(guī)實驗,如:hplc高效液相色譜,電子半導體生產,ICP樣品處理以及TOC分析,電子器件與光學鏡片沖洗等等。技術參數(shù):顆粒物(0.22µm)2.密理博BioPak終端過濾器:主要功能是截留99%分子量13000Da的有機
移液器如何進行CNAS 認證2022/10/10
移液器作為轉移液體的計量工具并非強檢產品。但因通常應用于精準的液體轉移,對性能要求很嚴格,用戶往往需要檢定或校準。移液器的檢定工作一般由計量院執(zhí)行,出具合格或不合格的定性結論;校準則可以由企業(yè)內部或外部校準實驗室完成,出具校準報告。校準報告不直接體現(xiàn)合格或不合格,可間接通過校準依據(jù)的法規(guī)進行參數(shù)比對,從而間接確認是性能否符合要求。CNAS認證是通過CNAS認可并能對外證明儀器設備的準確度。目前校準的檢定規(guī)程有三種:企業(yè)標準、國標(JJG-646)和國際標準(ISO8655-2)。不同規(guī)程在具體準
移液器使用的十種技巧2022/09/23
毫無疑問,移液器是生物學研究的重要的工具之一。它們有多種設計,用于無數(shù)研究領域。雖然許多液體處理指南都強調移液器維護的重要性,但移液器技巧同樣重要。下面,我們分享一些移液器的使用方法,移液操作的十項技巧,以改進您的移液技術。1.選擇合適的移液槍和吸頭:移液槍與移液器吸頭的匹配度是移液準確度的關鍵。如果吸頭和移液槍不匹配,或使用質量差的吸頭,可能會影響到吸頭和移液槍之間的密封性能。良好的移液器吸頭可確保適當?shù)拿芊?,從而最大限度地減少因泄漏引起的樣品損失。2.根據(jù)液體密度適當校準移液器:如果液體的密
實時熒光定量PCR法進行無乳鏈球菌血清分型的實驗步驟2022/09/23
實時熒光定量PCR法進行無乳鏈球菌血清分型的實驗步驟B組鏈球菌(GBS)是一種熒光檢測帶有包膜的革蘭氏陽性菌,是新生兒侵襲性感染敗血癥和腦膜炎的重要原因,GBS血清抗體傳統(tǒng)分型法通常需要經過乳膠凝集、多重PCR和條帶大小分析或全基因組序列分析等步驟,過程繁瑣,技術成本昂貴,所以在PCR實驗室中采用實時熒光定量PCR法進行血清分型不僅可以替代乳膠凝集法,還可以改進GBS血清型數(shù)據(jù)的采集。GBS細菌菌株分離與培養(yǎng)將GBS分離株在胰蛋白酶大豆(TS)或5%羊血瓊脂平板上于37°C培養(yǎng),然后在TS培養(yǎng)基
怎樣通過移液器的使用來控制實驗室成本?2022/09/23
如何通過移液器的使用來控制實驗室成本?通過移液器的使用來控制液體處理成本和保持較高質量的移液器性能對任何實驗室都是一個挑戰(zhàn)。大多數(shù)人依靠定期校準服務來保護他們的移液器免受不準確和磨損影響,但隨著時間的推移,僅校準不足以控制移液程序的費用。所以單單依靠校準來節(jié)約移液成本是遠遠不夠。移液成本的來源造成移液器損耗的主要因素有以下幾個方面:1.移液器校準不準確或不定期維護導致的設備測量錯誤:移液器的準確度是液體處理和保證實驗準確度的關鍵。所以在選擇移液器時,移液器的準確度是重中之重。如果貪圖便宜而選擇質
生物安全柜的分類及不同生物安全等級的介紹2022/09/23
生物安全柜的分類及不同生物安全等級的介紹生物安全柜是一種通風的外殼,可保護用戶、產品和環(huán)境免受因處理潛在危險微生物而產生的氣溶膠的影響。連續(xù)氣流通過HEPA過濾器排放到大氣中。三種保護狀態(tài)對柜內有害物質的個人防護。避免樣品污染的產品保護。環(huán)境保護,防止機柜內的污染物。生物安全柜在處理生物制劑時根據(jù)其容納能力分為三類。1級機柜提供個人和環(huán)境保護。用于處理低到中等風險的生物制劑。生物安全等級:1、2和3類2機柜提供人員、環(huán)境和產品保護。用于處理低到中等風險的生物制劑。生物安全等級:1、2和3級3級機
原代細胞的分離純化方法介紹2022/09/22
標簽:細胞培養(yǎng)原代細胞培養(yǎng)原代細胞純化原代細胞的體外培養(yǎng)過程中,其生長時往往會混有多種不同類型的細胞。比如來自皮膚組織的細胞進行培養(yǎng)時可以出現(xiàn)表皮細胞與纖維下?lián)芡瑫r生長的情況。所以原代細胞的分離純化在初期細胞培養(yǎng)時比較關鍵。原代細胞的純化方法主要有以下幾種:一、自然純化法:原代細胞由于具有較強的增殖能力,因此可以采用通過長期多代傳代生物方式單獨培養(yǎng)某一類型的目的細胞,靠自然優(yōu)化的方式進行細胞純化,這種方法的缺陷是無法按實驗需求去自由去自由選擇要培養(yǎng)的細胞。而且培養(yǎng)周期較長,適合應用于腫瘤細胞、成
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