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SDS堿裂解法制備質(zhì)粒DNA簡介2022/12/01: 近些年來，隨著PCR技術(shù)的出現(xiàn)，以及DNA克隆和測序方法的發(fā)展，對大量質(zhì)粒載體和重組子的需求也大大減少。在本方案中，通過堿裂解法的放大（BirnboimａndDoly1979）,質(zhì)粒DNA可從清亮的細(xì)菌裂解物中通過含有漠化乙錠的CsCl梯度離心來進(jìn)行純化。無論是高拷貝數(shù)的質(zhì)粒還是低拷貝數(shù)的質(zhì)粒，通過這種方法可以得到每毫升3?5^g的DNA。重組子的質(zhì)粒一般產(chǎn)量較少，這取決于克隆的DNA片段的大小和特點。材料為正確使用本方案中的器材和危險試劑，必須查閱相應(yīng)的材料安全數(shù)據(jù)表并咨詢所在機(jī)構(gòu)的環(huán)境衛(wèi)生和

高效消毒劑有哪些2022/11/25: 潔凈室和潔凈區(qū)必須定期清潔和消毒。這通常使用清潔劑步驟進(jìn)行，然后使用消毒劑?？赡苄枰盟コ緞┑臍埩粑?。清潔和消毒也應(yīng)延伸到設(shè)備。此外，對于人員，消毒對于制藥企業(yè)來說很重要。那么高效消毒劑有哪些？本文介紹了在制藥設(shè)施中實際應(yīng)用清潔和驗證程序時要考慮的關(guān)鍵點，重點是消毒劑的選擇。洗滌劑對于潔凈室，需要使用清潔劑去除“污垢”（蛋白質(zhì)、油脂等）。洗滌劑滲透污垢并降低表面張力（將土壤固定在表面）以使其去除。為了使消毒劑有效工作，這是必要的。此外，懸浮中的微生物很容易通過沖洗去除或用消毒劑殺死。對于這

潔凈室消毒方法和使用消毒劑的注意事項2022/11/25: 潔凈室是實驗室中重要的區(qū)域，潔凈室的消毒措施也是重要的，那么潔凈室消毒的注意事項有哪些？一、消毒制度的制定潔凈室清潔和消毒涉及許多重要步驟，所以需要制定嚴(yán)格的消毒標(biāo)準(zhǔn)、消毒方法等。二、清潔、打掃在制藥業(yè)中，清潔是指從表面去除殘留物和污垢的過程，以達(dá)到表面清潔的效果。在進(jìn)行清潔的過程中一般會使用清潔劑，因為清潔劑可以通過滲透污垢和降低表面張力（將污垢固定在表面）來去除污垢。對于潔凈室，在使用消毒劑之前同樣需要有清潔的步驟。也就是在使用消毒劑之前，清潔設(shè)備表面等，從而保證良好的消毒效果。三、消毒劑的

潔凈室消毒劑-消毒效果驗證方法2022/11/24: 潔凈室消毒劑-消毒效果驗證方法潔凈室消毒常常會用到多種不同類型的消毒劑，消毒力的效果驗證，以及驗證清潔和消毒程序的有效性，成為衡量消毒劑的重要指標(biāo)。關(guān)于潔凈室消毒劑效果驗證方法主要可以分為四個階段來進(jìn)行，每個階段都可以根據(jù)法規(guī)要求獨立執(zhí)行。階段1：內(nèi)源性微生物污染的表征：識別被認(rèn)為是關(guān)鍵和最能代表消毒劑使用環(huán)境的內(nèi)源性微生物菌株，這有助于確定將進(jìn)行功效測試的微生物。階段2：實際使用條件下消毒效果的實驗評價：使用定量載體測試（參考方法：EN13697:2001）和代表待處理表面（例如玻璃、不銹鋼、

季銨鹽消毒劑的優(yōu)缺點是什么2022/11/24: 季銨鹽化合物（QACs）是一種廣泛使用的陽離子表面活性劑。它們是由銨基的氫原子被烷烴或芳烴基團(tuán)取代而形成的。通式為(R4N+)X-，其中R為烴基或苯基，X-為鹵素離子如Cl-、Br-等。QACs的性質(zhì)由其取代的R基團(tuán)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)決定，可分為四類，即烷基三CHO-銨化合物（ATMACs）和二烷基二CHO-銨化合物（DADMACs）、芐基烷基二CHO-銨化合物（BACs）和雜環(huán)銨化合物（HACs））。那么季銨鹽消毒劑的優(yōu)缺點是什么？一般來說，在季銨鹽消毒劑中QACs中取代R基團(tuán)的碳鏈越長，其水溶性越

季銨鹽消毒劑的優(yōu)缺點2022/11/24: 季銨鹽化合物（QACs）是一種廣泛使用的陽離子表面活性劑。它們是由銨基的氫原子被烷烴或芳烴基團(tuán)取代而形成的。通式為(R4N+)X-，其中R為烴基或苯基，X-為鹵素離子如Cl-、Br-等。QACs的性質(zhì)由其取代的R基團(tuán)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)決定，可分為四類，即烷基三CHO-銨化合物（ATMACs）和二烷基二CHO-銨化合物（DADMACs）、芐基烷基二CHO-銨化合物（BACs）和雜環(huán)銨化合物（HACs））。那么季銨鹽消毒劑的優(yōu)缺點是什么？一般來說，在季銨鹽消毒劑中QACs中取代R基團(tuán)的碳鏈越長，其水溶性越

PCR產(chǎn)物的克隆-DNA回收實驗步驟2022/11/24: PCR產(chǎn)物的克隆-DNA回收實驗步驟【實驗原理】1.DNA片段回收方法：DNA片段在適當(dāng)濃度的瓊脂糖凝膠中，通上一定電壓進(jìn)行電泳，不同大小的DNA分子由于遷移率的不同而分離開。切下帶有所需DNA片段的凝膠，用凍融法、玻璃奶回收法或商品化膠回收試劑盒將目的片段回收純化。2.利用Taq酶能夠在PCR產(chǎn)物的3’末端加上一個非模板依賴的A，而T載體是一種帶有3’T突出端的載體，在連接酶作用下，可以把PCR產(chǎn)物插入到質(zhì)粒載體的多克隆位點，可用于PCR產(chǎn)物的克隆和測序。商品化的T載體有很多。本實驗采用TaK

選擇生物消毒劑需要考慮哪些因素呢2022/11/24: 消毒是將存在的微生物數(shù)量減少到不存在風(fēng)險的水平的過程。消毒不同于滅菌，其中物體不含所有活的微生物。那么選擇生物消毒劑需要考慮哪些因素呢？生物消毒劑通常不會殺死它們接觸的所有微生物，也不能同樣好地消毒所有微生物，例如大多數(shù)不會殺死細(xì)菌孢子。選擇的消毒劑類型取決于微生物、應(yīng)用方法和待消毒材料的性質(zhì)。生物消毒劑應(yīng)用于非生命物體和材料，例如表面和儀器以控制和預(yù)防感染，而防腐劑（一種消毒劑）應(yīng)用于活體組織。選擇和使用生物消毒劑時需要考慮以下因素：1.功效：消毒劑必須對目標(biāo)微生物起作用?？梢允褂弥圃焐痰奈墨I(xiàn)

實時熒光pcr檢測DNA濃度常用的生物試劑2022/11/23: 實時熒光pcr檢測利用熒光分析法用特定結(jié)合DNA的染料來測定DNA的濃度。常用的DNA染料包括溴化乙錠、Hoechst33258、SYBRGreenI和II、SYBRGold及PicoGreen。溴化乙錠溴化乙錠含有三環(huán)菲嚏平面環(huán)系統(tǒng)，可嵌入到雙鏈DNA堿基之間。嵌入DNA雙螺旋后，溴化乙錠的菲嚏環(huán)平面位于與螺旋軸相垂直的位置，并通過范德瓦耳斯力與上下堿基結(jié)合。而其平面環(huán)系統(tǒng)被埋在底部，其外側(cè)的苯基和乙烷基處于DNA雙螺旋的大溝內(nèi)。在高強(qiáng)度離子溶液的飽和狀態(tài)，大約每2.5個堿基對嵌入一分子的溴化

消毒和滅菌的區(qū)別2022/11/22: 微生物行業(yè)及微生物實驗室經(jīng)常會用到消毒、滅菌和清潔那么清潔、消毒和滅菌的區(qū)別是什么呢？滅菌滅菌的定義是破壞或消除所有形式的微生物生命的過程，并通過物理或化學(xué)方法在設(shè)施中進(jìn)行。加壓蒸汽、干熱、EtO氣體、過氧化氫氣體等離子體和液體化學(xué)品是醫(yī)學(xué)環(huán)境設(shè)施中使用的主要消毒劑。其實滅菌和消毒是有區(qū)別的，一些衛(wèi)生專業(yè)人員以及技術(shù)和商業(yè)文獻(xiàn)將“消毒”稱為“滅菌”，將物品稱為“部分無菌”。當(dāng)化學(xué)品被用來破壞所有形式的微生物生命時，它們可以被稱為化學(xué)消毒劑。這些用于較短暴露時間的相同殺菌劑也可以作為消毒過程的一部

季銨鹽類消毒劑是什么2022/11/22: 季銨鹽類消毒劑是什么？季銨化合物廣泛用作消毒劑。季銨鹽是較好的清潔劑，但高硬度的水和棉和紗布墊等材料會使它們的殺菌性降低，因為不溶性沉淀物或棉布和紗布墊分別吸收了活性成分。季銨化合物與其他幾種消毒劑（例如酚類物質(zhì)、碘伏）一樣，革蘭氏陰性菌可以在其中存活或生長。季銨化合物消毒劑的化學(xué)性質(zhì)在化學(xué)上，季銨鹽是有機(jī)取代的銨化合物，其中氮原子的化合價為5，其中四個取代基(R1-R4)是給定大小或鏈長的烷基或雜環(huán)基，第五個(X-)是鹵化物、硫酸鹽或類似的自由基.每種化合物都表現(xiàn)出自己的抗菌特性，因此需要尋找

過氧化氫消毒液的應(yīng)用2022/11/22: 過氧化氫消毒液的消毒原理：過氧化氫的作用是產(chǎn)生破壞性的羥基自由基，這些自由基可以攻擊膜脂、DNA和其他基本細(xì)胞成分。由具有細(xì)胞色素系統(tǒng)的需氧生物和兼性厭氧菌產(chǎn)生的過氧化氫酶可以通過將過氧化氫降解為水和氧氣來保護(hù)細(xì)胞免受代謝產(chǎn)生的過氧化氫的影響。過氧化氫消毒液的滅菌活性：過氧化氫對多種微生物具有活性，包括細(xì)菌、酵母菌、真菌、病毒和孢子。0.5%的加速過氧化氫在1分鐘內(nèi)表現(xiàn)出殺菌和殺病毒活性，在5分鐘內(nèi)表現(xiàn)出殺分枝桿菌和殺真菌活性。尿液中過氧化氫的殺菌效果和穩(wěn)定性已被證明可對抗多種與醫(yī)療保健相關(guān)的病

細(xì)胞傳代的步驟-貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)步驟2022/11/22: 傳代培養(yǎng)是細(xì)胞培養(yǎng)常規(guī)保種方法之一，也是幾乎所有細(xì)胞生物學(xué)實驗的基礎(chǔ)。當(dāng)細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中長滿后就需要將其稀釋，分種成多瓶，細(xì)胞才能繼續(xù)生長。這一過程就叫傳代。傳代培養(yǎng)可獲得大量細(xì)胞供實驗所需。傳代要在嚴(yán)格的無菌條件下進(jìn)行，每一步都需要認(rèn)真仔細(xì)的無菌操作。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以，而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。本實驗以傳代大鼠骨髓充間質(zhì)干細(xì)胞為例進(jìn)行細(xì)胞傳代的步驟做一介紹。一、傳代前準(zhǔn)備實驗開始前，將無菌培養(yǎng)瓶、15ml離心管、移液管、槍頭等放入無菌超凈工作臺，紫外線照射30min，以進(jìn)行工作臺的消

多克隆抗體和單克隆抗體之間的主要區(qū)別及應(yīng)用2022/11/21: 什么是單克隆抗體？單克隆抗體定義：與靶抗原上的特定表位結(jié)合的一種（單一）抗體構(gòu)成單克隆抗體。單克隆抗體生產(chǎn)為了產(chǎn)生單克隆抗體，是將免疫原注射到宿主動物中。一旦免疫原引起免疫反應(yīng)，脾臟中的B細(xì)胞就會被提取出來并與骨髓瘤細(xì)胞（癌細(xì)胞B細(xì)胞）融合。健康的脾細(xì)胞不會在細(xì)胞培養(yǎng)中無限期地存活，因此進(jìn)行此融合過程以制造永生細(xì)胞系。通過該過程產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞系。通過將脾臟中的單個B細(xì)胞融合并培養(yǎng)到它們自己的雜交瘤中，產(chǎn)生了所有產(chǎn)生相同特異性抗體的B細(xì)胞的單一培養(yǎng)物。B細(xì)胞將單克隆抗體分泌到細(xì)胞培養(yǎng)基中。在這里，

便攜式顯微鏡在神經(jīng)膠質(zhì)瘤研究實驗中的應(yīng)用2022/11/21: 便攜式顯微鏡在神經(jīng)膠質(zhì)瘤研究實驗中的應(yīng)用神經(jīng)膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)較為常見的原發(fā)性惡性腫瘤。髓樣分化蛋白2(MD2)作為toll樣受體4(TLR4)的輔助受體介導(dǎo)先天免疫反應(yīng)。然而，MD2在調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤進(jìn)展和免疫細(xì)胞浸潤中的實際作用仍不清楚?？茖W(xué)研究曾在探討MD2是否可以通過介導(dǎo)膠質(zhì)瘤中的免疫細(xì)胞浸潤成為獨立的預(yù)后因素。實驗方法便攜式顯微鏡采用高清攝影系統(tǒng)成像圖片，并支持在線多人同步在線同屏閱片。實驗原理使用CGGA、TCGA和Rembrandt數(shù)據(jù)庫進(jìn)行MD2的mRNA表達(dá)和DNA甲基化差異分析，

細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率低的原因2022/11/18: 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率低的原因細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗是指將DNA、RNA等外源物質(zhì)通過電轉(zhuǎn)染或化學(xué)轉(zhuǎn)染的方式導(dǎo)入至細(xì)胞內(nèi)的實驗方法。不同的細(xì)胞系轉(zhuǎn)染難度也各部相同，尤其是對生長條件要求較為苛刻的細(xì)胞，比如原代細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率會遠(yuǎn)低于其他細(xì)胞。這里，盤點了一下那些可能導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率低的原因、轉(zhuǎn)染試劑選擇指南，以便提升您的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。一、實驗條件和操作方法不合規(guī)正常情況下，做細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗前需要充足的準(zhǔn)備，比如：細(xì)胞、DNA、轉(zhuǎn)染試劑、培養(yǎng)基等。除了合規(guī)的實驗條件以外，還有較為重要的就是實驗操作方法，實驗是一個較為嚴(yán)謹(jǐn)

Western實驗步驟2022/11/18: Western，也稱Westernblot、Westernblotting、Western印跡，常簡寫為WB，是用抗體檢測蛋白表達(dá)的重要方法之一。碧云天試劑總結(jié)Western實驗步驟可如下進(jìn)行操作。1.收集蛋白樣品(Proteinsamplepreparation)根據(jù)實驗需要，使用適當(dāng)?shù)牧呀庖?，例如碧云天生產(chǎn)的Western及IP細(xì)胞裂解液(P0013/P0013J)、RIPA裂解液(P0013B/P0013C/P0013D/P0013K)、NP-40裂解液(P0013F)或SDS裂解液(P0

Nano-300微量分光光度計操作說明2022/11/18: Nano-300微量分光光度計操作說明操作步驟1）開機(jī)∶打開儀器背面電源開關(guān)，儀器啟動并進(jìn)入自檢界面，根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇相應(yīng)功能。2）檢測（以dsDNA檢測為例）∶在主頁面選擇核酸功能，將儀器上的無塵紙移開，準(zhǔn)備開始檢測。a）在主界面選“核酸檢測”b）依照DNA所溶于的液體準(zhǔn)備該溶液作為空白液。取2ul空白液加到下基座上，放下上基座并點擊“空白檢測”。b）使用干凈無塵紙把基座上的空白液擦拭干凈，輸入樣品名稱等信息。c）取2ul樣品加到下基座上，放下上基座并點擊“樣品檢測”。注意∶每次檢測的樣品都必

轉(zhuǎn)染試劑分類和應(yīng)用2022/11/17: 轉(zhuǎn)染是一種將外來顆粒和核酸轉(zhuǎn)移到細(xì)胞中的技術(shù)，它可以通過化學(xué)的方式來實現(xiàn)。轉(zhuǎn)染試劑用于提高基因?qū)嶒灥男?，從而可以在?yīng)用基因和基因組令人難以置信的功能領(lǐng)域進(jìn)行大量研究。在所有轉(zhuǎn)染實驗中，轉(zhuǎn)染方式的選擇尤為重要。下面描述了一些較突出的基于化學(xué)的轉(zhuǎn)染試劑。一、基于脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑脂質(zhì)體是包裹帶負(fù)電荷的核酸序列的陽離子脂質(zhì)。它們被細(xì)胞膜吸引并通過內(nèi)吞作用整合到宿主細(xì)胞中。內(nèi)體酶分解脂質(zhì)體，DNA片段被釋放到細(xì)胞質(zhì)中。這些囊泡是由磷脂人工制造的，主要來自含有帶負(fù)電荷和中性脂質(zhì)的混合物，這些脂質(zhì)能夠自動與

Lip 3000轉(zhuǎn)染試劑與Lipofectamine2000的區(qū)別2022/11/17: Lipofectamine3000簡稱LIP3000采用了脂質(zhì)體納米微粒技術(shù)，提供了出眾的轉(zhuǎn)染性能和可重復(fù)的結(jié)果。它適用于各種難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞和常見的細(xì)胞，在保證轉(zhuǎn)染效率的同時也提高了細(xì)胞存活率。Lipofectamine3000試劑可以將難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染效率提升10倍左右，同時還可以降低細(xì)胞的死亡率。另外，LIP3000還具有多功能性，在某些情況下，它甚至可以取代電穿孔，由于提升了轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的存活率，從而也簡化了工作流程。盡管Lipofectamine2000十分受歡迎，但對于某些敏感的細(xì)胞，

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