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中級(jí)會(huì)員 | 第7年
TC、TG實(shí)驗(yàn)方法2024/08/20
一、組織樣本1、同樣還是用等滲緩沖液,按重量體積1:9,制備勻漿,2500rpm*10min,取上清即10%勻漿用于TG、TC的測(cè)定(提取的不充分,但也能測(cè)定)2、用有機(jī)溶劑提取,a:用無(wú)水乙醇作勻漿介質(zhì),按上面方法制備勻漿待測(cè),提取效果比等滲緩沖液好b:用特殊有機(jī)溶劑提?。ㄈ缏确录状蓟旌弦旱龋┨崛⌒Ч茫捎诟邠]發(fā),測(cè)定不準(zhǔn)確,所以一般需用N2吹干后用無(wú)水乙醇復(fù)溶后進(jìn)行測(cè)定。二、培養(yǎng)細(xì)胞1、用PBS洗細(xì)胞2、加入500ul乙醇,使之鋪滿培養(yǎng)皿,培養(yǎng)皿內(nèi)的細(xì)胞泛白時(shí)把培養(yǎng)皿斜放,用細(xì)胞刮板將細(xì)
神經(jīng)遞質(zhì)檢測(cè)2024/08/20
神經(jīng)遞質(zhì)是神經(jīng)元之間或神經(jīng)元與效應(yīng)器細(xì)胞如肌肉細(xì)胞、腺體細(xì)胞等之間傳遞信息的化學(xué)物質(zhì)。作為神經(jīng)遞質(zhì)應(yīng)具備以下條件:(1)存在:遞質(zhì)應(yīng)特異性地存在于以該物質(zhì)為遞質(zhì)的神經(jīng)元中,而且,在這種神經(jīng)元的末梢有合成該遞質(zhì)的酶系統(tǒng)。(2)部位:遞質(zhì)在神經(jīng)末梢內(nèi)合成以后,通常是集中儲(chǔ)存在囊泡(vesicle)內(nèi),這樣可以防止被胞漿內(nèi)的其他酶所破壞。(3)釋放:是指從突觸前末梢可釋放足以在突觸后細(xì)胞或效應(yīng)器引起一定反應(yīng)的物質(zhì)。(4)作用:遞質(zhì)通過(guò)突觸間隙,作用于突觸后膜的叫作受體的特殊部位,引起突觸后膜離子通透性
細(xì)胞因子與神經(jīng)炎癥2024/08/14
神經(jīng)炎癥是神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)發(fā)生的炎癥反應(yīng),可由多種因素引發(fā),并在多種神經(jīng)退行性疾病、神經(jīng)精神疾病和神經(jīng)系統(tǒng)損傷中發(fā)揮重要作用。以下是對(duì)神經(jīng)炎癥分類和機(jī)制的詳細(xì)闡述:神經(jīng)炎癥中的促炎細(xì)胞因子神經(jīng)炎癥,往往在炎癥性脫髓鞘疾病(例如,多發(fā)性硬化癥)和感染(細(xì)菌性和病毒性腦炎)中發(fā)生,其特征是白細(xì)胞侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng)和血腦屏障(BBB)完整性破壞。淋巴細(xì)胞和骨髓細(xì)胞是組織損傷的主要介質(zhì),向組織輸送細(xì)胞因子,促進(jìn)炎癥級(jí)聯(lián)。研究顯示,許多促炎細(xì)胞因子是入侵白細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥中的關(guān)鍵因子,包括IL-23、IL-6、
細(xì)胞樣本的前處理2024/08/14
一、勻漿介質(zhì)一般采用0.05mol/LTris-HCl,pH7.4磷酸鹽緩沖液(PBS),客戶可根據(jù)樣本及測(cè)定指標(biāo)的情況自行設(shè)定濃度,目的是保持樣本的等滲環(huán)境。二、細(xì)胞樣本的前處理:1、細(xì)胞沉淀的收集:①懸浮細(xì)胞:對(duì)于懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞,直接通過(guò)離心收集細(xì)胞沉淀,將培養(yǎng)液在室溫條件下1000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,棄上清留細(xì)胞沉淀。②貼壁細(xì)胞:對(duì)于貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,用胰酶將細(xì)胞消化下來(lái),或用細(xì)胞刮將細(xì)胞刮下來(lái),將培養(yǎng)液在室溫條件下1000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,棄上清留細(xì)胞沉淀。我們一般建議客戶,細(xì)胞密度
花青素通路系列檢測(cè)2024/08/07
花青素(anthocyanidin)是自然界廣泛存在與植物中的水溶性天然色素,屬黃酮類化合物。是植物花瓣、水果、蔬菜等的主要呈色物質(zhì)。其基本結(jié)構(gòu)為2-苯基苯并吡喃。花青素核的苯環(huán)-C3橋-苯環(huán)是發(fā)色基團(tuán)。在B環(huán)的4c碳位、A環(huán)的5,7碳位及C環(huán)的3碳位上的取代羥基,構(gòu)成了花青素的助色基團(tuán)。花青素在波長(zhǎng)范圍分別為465~560nm和270~280nm有最大光吸收。1.花青素代謝通路是類黃酮的一部分,基本結(jié)構(gòu)為α-苯基苯并吡喃陽(yáng)離子,具有一個(gè)基本的C6(A環(huán))-C3(C環(huán))-C6(B環(huán))的碳骨架結(jié)構(gòu)
“感染診斷大佬”——降鈣素原(PCT)2024/08/07
降鈣素原(PCT)是機(jī)體在全身炎癥反應(yīng)特別是細(xì)菌感染時(shí)釋放的一種急性可溶性蛋白,是嚴(yán)重細(xì)菌感染和膿毒癥的早期診斷標(biāo)志物。PCT是一種由116個(gè)氨基酸組成的糖蛋白,是降鈣素的前體物質(zhì),沒(méi)有激素活性。它的結(jié)構(gòu)包括降鈣蛋白、降鈣素和N端殘基片段。生理情況下,PCT主要由甲狀腺C細(xì)胞合成分泌,并且PCT只有在裂解為其成熟形式降鈣素后,才會(huì)釋放到血液中,健康人體內(nèi)基本檢測(cè)不到,通常小于0.05ng/mL。PCT的生物學(xué)特征降鈣素原(Procalcitonin,PCT)是無(wú)激素活性的降鈣素前肽糖蛋白,正常生
Argonaute 2蛋白(AGO2)是什么?2024/07/31
Argonaute2蛋白(AGO2),亦稱真核翻譯起始因子2C2(eukaryotictranslationinitiationfactor2Csubunit2,EIF2C2)。含有N末端(amino-terminal)、PAZ、MID和PIWI四個(gè)球狀結(jié)構(gòu)域,以及L1、L2兩個(gè)連接域,屬于Argonaute蛋白(AGO)家族成員。AGO蛋白家足第一次分離于果蠅細(xì)胞,是相對(duì)分子質(zhì)量約為100kD的結(jié)構(gòu)高度保守的堿性蛋白。AGO2在生物體內(nèi)廣泛表達(dá),是RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體的核心成分。其具有核糖核酸
成骨細(xì)胞標(biāo)志物---Ⅰ型膠原氨基端延長(zhǎng)肽(PINP)2024/07/31
骨有機(jī)基質(zhì)的90%以上由膠原組成,其中Ⅰ型膠原約占97%。其合成與分解的代謝產(chǎn)物可間接反映骨轉(zhuǎn)換的狀況。Ⅰ型前膠原N端前肽(PINP)和Ⅰ型前膠原C端前肽(PICP)是成骨細(xì)胞和成纖維細(xì)胞增殖的特異性產(chǎn)物。當(dāng)骨骼、軟組織和皮膚合成Ⅰ型膠原時(shí),PINP和PICP被剪切而進(jìn)入血液,因而可反映骨形成的動(dòng)態(tài)變化。Ⅰ型膠原衍生自一個(gè)較大的蛋白質(zhì),即Ⅰ型前膠原。Ⅰ型前膠原在成骨細(xì)胞中合成,其羧基端和氨基端分別向兩端延伸,形成前Ⅰ型膠原的前體,向羧基端延伸的前肽稱PICP,向氨基端延伸的前肽稱PINP(見(jiàn)下圖
多糖單糖組成檢測(cè)方法2024/07/24
單糖組成分析是研究多糖結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及構(gòu)效關(guān)系的基礎(chǔ)。其研究中主要包括多糖水解的方法和條件、衍生化方法和單糖檢測(cè)方法,如圖1所示。常用的水解方法主要有酸水解法和酶解法,此外還有氧化降解法、超聲降解法、輻射降解法等。由于單糖不具有紫外與熒光吸收,檢測(cè)時(shí)常將其進(jìn)行衍生化處理。單糖組成常用的檢測(cè)方法一般有4種,分別是氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)、離子色譜法(IC)和薄層色譜法(TLC)。GC法較早用于分析多糖單糖組成,方法靈敏度高,各單糖的色譜峰的分離度良好。由于單糖不具有揮發(fā)性,采用G
多糖結(jié)構(gòu)研究的基礎(chǔ),單糖組成2024/07/24
單糖,顧名思義,就是單個(gè)糖分子。單糖是糖類的組成單元,單糖之前脫水形成糖苷鍵,并以糖苷鍵線性或分支連接成寡糖和多糖。因此,單糖組成分析是多糖結(jié)構(gòu)研究的基礎(chǔ)。單糖的種類天然產(chǎn)物多糖種類繁多、結(jié)構(gòu)復(fù)雜,這其中包括組成多糖的單糖種類眾多。常見(jiàn)的單糖有:果糖、巖藻糖、阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸等。此外,還有一些氨基糖、唾液酸等成分。單糖的水解單糖組成定性和定量分析,通常需要對(duì)樣品水解,樣品水解方法有甲醇水解、鹽酸水解、硫酸水解和TFA水解等。TFA水解法最為常
游離脂肪酸(NEFA)檢測(cè)2024/07/17
游離脂肪酸是一類有機(jī)酸,簡(jiǎn)稱:FFA。存在于人體內(nèi)的脂質(zhì),大致可以分為膽固醇、中性脂肪(三酸甘油脂)、磷脂質(zhì)等3種。游離脂肪酸是中性脂肪分解成的物質(zhì)之一。當(dāng)肌肉活動(dòng)所需能源——肝糖耗盡時(shí),脂肪組織會(huì)分解中性脂肪成為游離脂肪酸來(lái)充當(dāng)能源使用。所以,游離脂肪酸可說(shuō)是進(jìn)行持久活動(dòng)所需的物質(zhì)。游離脂肪酸又稱非酯化脂肪酸(nonestesterifiedfattyacidNEFA),血清中含量很少,如用小量血清標(biāo)本測(cè)定必須采用靈敏的方法,并要避免脂肪水解產(chǎn)生的脂肪酸的干擾。NEFA是由油酸,軟脂酸,亞油酸
維生素檢測(cè)2024/07/17
維生素是人體生長(zhǎng)發(fā)育、新陳代謝、生理功能調(diào)節(jié)過(guò)程中所必須的一類有機(jī)物質(zhì)。大多數(shù)維生素不能在體內(nèi)自行合成,必須通過(guò)進(jìn)食后胃腸道消化吸收獲得。維生素長(zhǎng)期缺乏,會(huì)導(dǎo)致人體生理功能障礙,誘發(fā)多種疾病。維生素根據(jù)它的溶解性分為水溶性維生素和脂溶性維生素。水溶性維生素包括:維生素B1,B2,B3,B5,B6,B7,B9,B12,維生素C等。脂溶性維生素則包括:維生素A,維生素E,維生素D(D2,D3)和維生素K(K1,K2)。脂溶性維生素(包括維生素A、維生素D2/D3、維生素E和維生素K)一旦補(bǔ)充過(guò)多很容
肌酐(Creatinine)是什么?2024/07/09
肌酐(creatinine,Cre),化學(xué)式是C4H7N3O,是肌肉在人體內(nèi)代謝的產(chǎn)物,主要由腎小球?yàn)V過(guò)排出體外。每20g肌肉代謝可產(chǎn)生1mg肌酐,在肉類食物攝入量穩(wěn)定時(shí),身體的肌肉代謝又沒(méi)有大的變化,肌酐的生成就會(huì)比較恒定。血中肌酐來(lái)自外源性和內(nèi)源性兩種,外源性肌酐是肉類食物在體內(nèi)代謝后的產(chǎn)物;內(nèi)源性肌酐是體內(nèi)肌肉組織代謝的產(chǎn)物。血中的肌酐來(lái)源包括外源性和內(nèi)源性兩部分,血肌酐幾乎全部經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)進(jìn)入原尿,并且不被腎小管重吸收;內(nèi)源性肌酐每日生成量幾乎保持恒定,嚴(yán)格控制外源性肌酐的攝入時(shí),血肌酐
鄰苯二甲酸酯(PAEs)檢測(cè)2024/07/03
鄰苯二甲酸酯(PAEs)是鄰苯二甲酸酐與醇類在酸性條件下酯化而成的一類重要有機(jī)化合物,由一個(gè)苯環(huán)和兩個(gè)相鄰的烷基側(cè)鏈構(gòu)成,根據(jù)烷基側(cè)鏈的不同可形成多種結(jié)構(gòu)。PAEs包含30多種化合物,多為無(wú)色、無(wú)味、油狀粘稠液體,不易揮發(fā),難溶于水,易溶于甲醇、丙酮、苯等有機(jī)溶劑,沸點(diǎn)在190~530℃之間,熔點(diǎn)基本小于-25℃。這類化合物的低熔點(diǎn)和高沸點(diǎn)特性使它們能用作增塑劑、傳熱液和梳理劑被廣泛應(yīng)用。目前全球PAEs的年產(chǎn)量約3億噸,預(yù)計(jì)到2050年將達(dá)到5億噸。鄰苯二甲酸酯檢測(cè)方法已非常成熟,國(guó)內(nèi)外都發(fā)布
白細(xì)胞分化抗原(CD)是什么2024/07/03
白細(xì)胞分化抗原(LeucocyteDifferentiationAntigen,LDA)是指不同譜系(1ineage)血細(xì)胞在正常分化,成熟,活化過(guò)程中出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面標(biāo)志,多是跨膜蛋白或糖蛋白,少數(shù)為碳水化合物半抗原。采用單克隆抗體鑒定方法識(shí)別的白細(xì)胞分化抗原又稱CD(clusterofdifferentiation)抗原。分化簇CD命名系統(tǒng)是為了對(duì)白細(xì)胞表面抗原進(jìn)行分類而設(shè)計(jì)。人CD的序號(hào)已從CD1命名至CD363(2010年),可大致劃分為T(mén)細(xì)胞、B細(xì)胞、髓細(xì)胞、NK細(xì)胞、血小板、粘附
土壤中磷脂脂肪酸(PLFA)的測(cè)定2024/07/03
PLFAs是幾乎所有活體細(xì)胞膜的主要成分,周轉(zhuǎn)速率極快且隨細(xì)胞死亡而迅速降解,脂肪酸結(jié)構(gòu)與種類多樣,對(duì)環(huán)境因素敏感,分析結(jié)果重復(fù)性較好。既可用簡(jiǎn)單試劑和設(shè)備測(cè)定由PLFAs轉(zhuǎn)化的磷酸鹽以確定微生物總量,也可以根據(jù)不同菌群的特定脂肪酸C鏈長(zhǎng)度、飽和度及羥基等取代基位置差異研究特殊功能菌群。在微生物定量及活力測(cè)定方面,PLFAs與微生物量C、底物誘導(dǎo)呼吸(SIR)及ATP等測(cè)定方法所得結(jié)果十分吻合。因此,PLFAs在土壤微生物學(xué)研究中很有潛力。磷脂脂肪酸在土壤中的功能主要包括以下幾個(gè)方面:(1)作為
不對(duì)稱二甲基精氨酸檢測(cè)2024/06/28
不對(duì)稱二甲基精氨酸(NG,NG-二甲基-l-精氨酸,ADMA)是l-精氨酸的天然類似物。在精氨酸殘基的翻譯后甲基化過(guò)程中,它被一組稱為蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶和蛋白水解的甲基轉(zhuǎn)移酶釋放到細(xì)胞質(zhì)中。腎臟負(fù)責(zé)清除循環(huán)系統(tǒng)中的游離ADMA。除腎臟排泄外,ADMA還可被二甲基精氨酸二甲氨基水解酶(DDAH)家族和丙氨酸-乙醛酸氨基轉(zhuǎn)移酶2(AGXT2)水解。作為一種競(jìng)爭(zhēng)性的內(nèi)源性一氧化氮合酶(NOS)抑制劑,ADMA能夠降低NOS活性,從而減少一氧化氮(NO)。非對(duì)稱性二甲基精氨酸(ADMA)是一種新的心血
甲基丙二酸檢測(cè)2024/06/26
甲基丙二酸是一種有機(jī)酸,丙酸、胸腺嘧啶等代謝過(guò)程產(chǎn)生的MMCoA,分解生成MMCoA,直至生成甲基丙二酸。甲基丙二酸是MMCoA的代謝產(chǎn)物,正常情況下在甲基丙二酰甲基鈷胺CoA變位酶及維生素B12的作用下轉(zhuǎn)化生成琥珀酸,參與三羧酸循環(huán)。甲基丙二酰COA變位酶缺陷或維生素B12代謝障礙導(dǎo)致甲基丙二酸、丙酸、甲基枸櫞酸等代謝物異常蓄積,琥珀酸脫氫酶活性下降,線粒體能量合成障礙,引起神經(jīng)、肝臟、腎臟、骨髓等多臟器損傷??刹捎酶咝б合嗌V(HPLC)和液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)法,可高效、精準(zhǔn)的檢測(cè)甲基丙二
什么是木質(zhì)素酚檢測(cè)2024/06/11
木質(zhì)素是陸生維管植物適應(yīng)環(huán)境的進(jìn)化特征之一,同時(shí)也是構(gòu)成其細(xì)胞壁的主要成分之一,主要存在于植物木質(zhì)化程度高的硬組織中。木質(zhì)素和纖維素、半纖維素等多糖分子通過(guò)氫鍵、共價(jià)鍵等作用交聯(lián)在一起,通常起到增強(qiáng)細(xì)胞壁的沉積、提高細(xì)胞壁機(jī)械強(qiáng)度及硬度的作用,具有較強(qiáng)的不滲水性,對(duì)病原體具有抗氧化、阻燃、機(jī)械支持及生物防御等功能。木質(zhì)素作為植物細(xì)胞壁的主要組成部分,與纖維素、半纖維素、果膠等物質(zhì)交叉連接。木質(zhì)素的合成能夠?qū)χ参锛?xì)胞起重要的保護(hù)作用,增強(qiáng)植物細(xì)胞抵抗病害和逆境的能力。木質(zhì)素是一種聚合體,其單體主要
乙烯的生理作用是什么?2024/06/11
乙烯是一種氣體,高等植物的各個(gè)器官都能產(chǎn)生乙烯。乙烯的生理作用非常廣泛,其中最重要的一個(gè)作用就是能促進(jìn)果實(shí)成熟。在很早的時(shí)候,我國(guó)人民就懂得用煙熏催熟的方法促進(jìn)梨子成熟,也是因?yàn)闊熤杏幸蚁┐嬖诘木壒?。乙烯除了有催熟的作用外,還可以促進(jìn)葉片和果實(shí)脫落,解除休眠,誘導(dǎo)某些植物兩性花中的雌花的形成。一、解除休眠植物在惡劣的自然條件下能夠生存,與它們的休眠機(jī)能有密切關(guān)系。休眠后的種子、塊莖或球莖在適宜環(huán)境下則重新開(kāi)始生長(zhǎng)發(fā)育,我們對(duì)這種自然現(xiàn)象發(fā)生的時(shí)間及控制機(jī)能仍缺乏了解。據(jù)報(bào)道,乙烯對(duì)休眠可能有部分
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