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微生物培養(yǎng)基相關(guān)資料匯總2024/09/29: 培養(yǎng)基是液體、半固體或固體形式的，含天然或合成成分，用于保證微生物繁殖或保持其活力的物質(zhì)。培養(yǎng)基的制備和使用是微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的重要環(huán)節(jié)，培養(yǎng)基自身質(zhì)量的優(yōu)劣、保存是否得當(dāng)、配制使用是否正確等都直接影響到檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。一、培養(yǎng)基的購(gòu)置與驗(yàn)收1.購(gòu)置從培養(yǎng)基自身的質(zhì)量來(lái)看，不同生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品，甚至同一廠家不同批號(hào)的產(chǎn)品都會(huì)存在差異。依據(jù)ISO/IEC17025《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》，對(duì)培養(yǎng)基的供應(yīng)企業(yè)進(jìn)行評(píng)價(jià)后選擇合格的供應(yīng)商，這是培養(yǎng)基購(gòu)買過程中重要的步驟。應(yīng)選擇產(chǎn)品市場(chǎng)信譽(yù)

驗(yàn)證生化試劑盒適用方式分述2024/09/23: 通常生化試劑盒可分為液體單試劑和液體雙試劑，前者特別適用于半自動(dòng)生化分析儀和小型自動(dòng)生化分析儀，使用方便，缺點(diǎn)是穩(wěn)定性較差。與單試劑相比，雙試劑提高了抗干擾能力，具有穩(wěn)定性能較好，可消除樣品自身空白等特點(diǎn)。此外還有多項(xiàng)同測(cè)組合試劑、濃縮試劑等。對(duì)新的試劑盒，我們首先要查看其資質(zhì)是否齊全，是否為合法有效試劑，是否有相關(guān)的臨床試驗(yàn)驗(yàn)證等。其次，在本實(shí)驗(yàn)室，可做以下工作來(lái)進(jìn)行驗(yàn)證是否適合使用。一、試劑空白吸光度用蒸餾水做空白，用zhi定的空白液加入試劑作為樣品測(cè)試，在測(cè)試主波長(zhǎng)下，記錄測(cè)試啟動(dòng)時(shí)的吸光

ELISA專用酶標(biāo)儀故障解決排除大全2024/09/19: 酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀，是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）的專用儀器又稱微孔板檢測(cè)器，酶標(biāo)儀檢測(cè)技術(shù)是一種高通量微孔板檢測(cè)技術(shù)，其核心是一個(gè)比色計(jì)，利用比色法來(lái)進(jìn)行分析。因其高靈敏度、高效率及操作簡(jiǎn)便，被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、生物制藥、體外診斷、食品安全、環(huán)境科學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域。任何儀器在使用時(shí)往往都會(huì)出現(xiàn)一些小故障，酶標(biāo)儀儀器也一樣，下面將與大家分享酶標(biāo)儀的一些常見故障及處理方法：1、打印機(jī)不工作⑴、酶標(biāo)儀后部DIL開關(guān)設(shè)置不正確。DIL標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置:左下下下下下下上下上上下下上下上上右(人站在儀器后部，

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制主要方法2024/09/09: 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制是一系列確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性和可靠性的措施和程序。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制主要包括以下幾方法：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)監(jiān)控、人員比對(duì)、方法比對(duì)、儀器設(shè)備比對(duì)、留樣復(fù)測(cè)、空白測(cè)試、重復(fù)測(cè)試、回收率試驗(yàn)、校準(zhǔn)曲線的核查以及使用質(zhì)量控制圖等。一、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)監(jiān)控1.1、質(zhì)控過程通常的做法是實(shí)驗(yàn)室直接用合適的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)樣品作為監(jiān)控樣品，定期或不定期將監(jiān)控樣品以比對(duì)樣或密碼樣的形式，與樣品檢測(cè)以相同的流程和方法同時(shí)進(jìn)行，檢測(cè)室完成后上報(bào)檢測(cè)結(jié)果給相關(guān)質(zhì)量控制人員，也可由檢測(cè)人員自行安排在樣品檢測(cè)時(shí)同時(shí)插人標(biāo)準(zhǔn)物

ELISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)目的抗原方法分享2024/09/02: ELISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)是一種廣泛應(yīng)用在測(cè)定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等（即抗原）直接或是以捕捉抗體（captureAb）固定在固相載體上，再加入一級(jí)檢測(cè)抗體（primarydetectionAb），形成一個(gè)抗原抗體的復(fù)合物。如果該抗體已經(jīng)用酶（enzyme）標(biāo)記了，即可用來(lái)直接測(cè)定抗原的量，若無(wú)，則可利用另一個(gè)酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。測(cè)定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)（substrate），作用后產(chǎn)生出現(xiàn)的顏色深

干粉培養(yǎng)基原倍液的配制2024/08/29: 1、配制過濾除菌的細(xì)胞培養(yǎng)基(1)閱讀培養(yǎng)基使用說明，確定需要添加何種添加劑（如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉、HEPES等）。(2)根據(jù)所需將培養(yǎng)基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）將袋內(nèi)殘留培養(yǎng)基洗下，并入容器。加注射用水至總體積的95％，輕微攪拌溶解。(3)加入規(guī)定量的碳酸氫鈉及所要添加的物質(zhì)。(4)輕微攪拌溶解，加注射用水至規(guī)定體積。(5)用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)pH至所需值。(6)用0.22μm濾膜正壓過濾除菌。(7)溶液應(yīng)在2℃－8℃下

ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)）測(cè)定結(jié)果計(jì)算方法2024/08/19: ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)）是一種常用的生物化學(xué)分析技術(shù)，用于檢測(cè)特定蛋白質(zhì)或其他生物分子的存在和濃度，ELISA數(shù)據(jù)分析和結(jié)果解讀是實(shí)驗(yàn)過程中至關(guān)重要的一步。ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法：例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來(lái)，得到世界科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣，尤其是國(guó)內(nèi)生化

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）樣本制備處理分述2024/08/12: 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay，ELISA）是免疫學(xué)和分子生物學(xué)中廣泛使用的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)，能夠應(yīng)用ELISA實(shí)驗(yàn)的樣本種類很多，有血清，血漿，細(xì)胞上清，細(xì)胞裂解液，尿液，關(guān)節(jié)滑液，腦脊液，肺泡灌洗液，各種組織的組織勻漿；采集和處理的方式都不相同。一、血清1、將全血收集到未經(jīng)處理的測(cè)試管中，或者到不含抗凝劑的管中，如BD血清用真空采血管。2、在室溫下連續(xù)孵育20分鐘。3、4℃3,000rpm離心10分鐘。4、立即分裝上清液（血漿）并在-80℃下保存

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制和標(biāo)定技術(shù)事項(xiàng)匯總2024/08/05: 標(biāo)準(zhǔn)溶液是指已知準(zhǔn)確濃度的試劑溶液，在容量分析中用作滴定劑，以滴定被測(cè)物質(zhì);或在儀器分析中，用作標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)系列來(lái)測(cè)定待測(cè)物的含量。標(biāo)準(zhǔn)溶液的取得有兩種方法，一種是用基準(zhǔn)物質(zhì)直接配制，一種是用基準(zhǔn)物質(zhì)或已知準(zhǔn)確濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行標(biāo)定來(lái)取得。用于配制或標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的-高純度化學(xué)試劑稱為基準(zhǔn)試劑或基準(zhǔn)物質(zhì)，用基準(zhǔn)試劑或基準(zhǔn)物質(zhì)配制成已知準(zhǔn)確濃度的溶液稱為標(biāo)準(zhǔn)溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度準(zhǔn)確與否直接關(guān)系檢測(cè)結(jié)果的精密度、準(zhǔn)確度。因此配制和標(biāo)定中你必須知道這些事：1、用于配制或標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的基準(zhǔn)物質(zhì)必須符

影響ELISA檢測(cè)質(zhì)量因素分析2024/07/30: ELISA測(cè)定的陽(yáng)性判斷值,通常是將大量陰性和陽(yáng)性人群的測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后確定的,其確定依據(jù)為判斷結(jié)果的假陽(yáng)性和假陰性率最di。在陽(yáng)性判斷值周圍一定范圍內(nèi)之外的測(cè)定結(jié)果可歸為可疑,亦即ELISA測(cè)定的“灰區(qū)”?！盎覅^(qū)”的大小可用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法確定。測(cè)定結(jié)果處于“灰區(qū)”的樣本,可通過確認(rèn)試驗(yàn)或追蹤檢測(cè)來(lái)確定到底是陽(yáng)性還是陰性ELISA“灰區(qū)”是把定量分析的正常值范圍引入定性分析而建立的概念?；覅^(qū)的設(shè)置有二種:(1)CO×(1±C),C為該試劑的批內(nèi)C(一般在15%～20%間);(2)CO±2S,S

ELISA測(cè)定結(jié)果通常計(jì)算方法簡(jiǎn)述2024/07/22: ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法：例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來(lái)，得到世界科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣，尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)

PCR反應(yīng)準(zhǔn)備工作及操作步驟2024/07/15: PCR（PolymeraseChainReaction，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是現(xiàn)代生物學(xué)中一項(xiàng)重要的技術(shù)，能進(jìn)行體外擴(kuò)增DNA序列，為基因組研究和分子診斷提供了有力的工具。PCR原理是指在DNA聚合酶催化下，以母鏈DNA為模板以特定引物為延伸起點(diǎn)，利用脫氧核苷三磷酸(dNTP)，通過變性、退火、延伸等步驟，體外復(fù)制出與母鏈模板DNA互補(bǔ)的子鏈DNA的過程。PCR反應(yīng)開始前的準(zhǔn)備工作：PCR反應(yīng)開始前，你需要準(zhǔn)備好DNA模板（基因組DNA或者反轉(zhuǎn)錄制備的cDNA）,特異性的引物（手動(dòng)設(shè)計(jì)或利用軟件設(shè)計(jì)

影響ELISA檢測(cè)試劑盒測(cè)定結(jié)果操作因素匯集2024/07/08: ELISA全稱叫酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，ELISA原理：測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)，用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與溶液中的其他物質(zhì)分開，再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)結(jié)合在固相載體上，加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中要檢測(cè)的目標(biāo)物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。影響ELISA檢測(cè)試劑盒測(cè)定結(jié)果操作因素如下：1、嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。2、檢測(cè)前應(yīng)將試劑放置室溫平衡半小時(shí)，洗滌液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，同時(shí)觀察濃縮洗滌

實(shí)驗(yàn)室樣品收集及培養(yǎng)基滅菌使用2024/07/01: 樣品的采集及檢測(cè):一、保證采樣器具的無(wú)菌性1.玻璃器皿：采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌，保證恒溫、時(shí)間足夠（但不可時(shí)間過長(zhǎng)，導(dǎo)致玻璃器皿易裂紋而報(bào)廢）。2.取樣筐：使用前要用75%酒精進(jìn)行噴灑消毒3.取樣勺、濃奶取樣提子：要保證其清潔消毒，清潔后用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒。4.取樣袋：可現(xiàn)用酒精進(jìn)行擦拭消毒，再在超凈臺(tái)用紫外燈照射消毒，（包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒）。5.電子稱表面用75%酒精消毒。二、人員操作1.保證手部的清洗、消毒：取樣前及做樣前都要先洗手再消毒。2.取樣要具有代表性（隨機(jī)樣

多克隆抗體和單克隆抗體的作用用途2024/06/24: 單克隆抗體的定義:單克隆抗體是僅與目標(biāo)蛋白某一特定表位結(jié)合的單一抗體。單克隆抗體的制備：簡(jiǎn)單來(lái)說就是將免疫原注射到宿主動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng)，之后把B細(xì)胞從脾臟中移出，單種B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤，成為一個(gè)永生化胞株。這樣一來(lái)，雜交瘤的B細(xì)胞就會(huì)一直產(chǎn)出只識(shí)別單一表位的單克隆抗體，通常這個(gè)胞株會(huì)有一個(gè)特定的克隆號(hào)（clonenumber），用來(lái)與其他胞株區(qū)分。雜交瘤接下來(lái)可以被注射到小鼠的腹腔中大量，雜交瘤分泌富含抗體的一種液體，被稱作腹水，用注射器抽取純化，就可獲得大量的單克隆抗體。

PCR反應(yīng)引物條件優(yōu)化2024/06/12: PCR（Polymerasechainreaction，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是模擬體內(nèi)DNA復(fù)制過程，對(duì)特定DNA序列進(jìn)行大量擴(kuò)增的一種技術(shù)。PCR反應(yīng)是以4種dNTP為底物，引物引導(dǎo)，DNA聚合酶催化作用下，在單鏈DNA模板3’末端開始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的延伸，多次反復(fù)的擴(kuò)增使特定DNA序列以指數(shù)增加。PCR反應(yīng)體系參與PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要為包括：引物、酶、dNTP、Buffer、模板和Mg2+。引物是兩段與待擴(kuò)增靶DNA序列互補(bǔ)的寡核苷酸片段，兩引物間距離決定擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度，兩引物的5’端決定擴(kuò)增產(chǎn)物的

實(shí)際篩選血清方式推送2024/06/03: 細(xì)胞培養(yǎng)液中添加的血清有牛血清、馬血清、人血清等，其中牛血清是常用的血清，分為胎牛血清和新生小牛血清。胎牛血清是從母牛破腹取出的胎牛中分離出的血清，價(jià)格昂貴。新生小牛血清是從剛出生的尚未哺乳的小牛中分離出來(lái)的血清，如廠家能做到這一點(diǎn)，新生小牛血清的質(zhì)量與胎牛血清的質(zhì)量相差不大。如小牛出生后已哺乳，從這種小牛中取出的血清中可能含有較多的生物活性物質(zhì)，其質(zhì)量明顯不如前兩種。血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。細(xì)胞培養(yǎng)中血清的主

貼壁細(xì)胞與懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)有有哪些方面區(qū)別2024/05/27: 貼壁細(xì)胞:概念：貼壁細(xì)胞是指那些在體外培養(yǎng)時(shí)需要附著在固體表面(如玻璃、塑料)上才能生長(zhǎng)和分裂的細(xì)胞。這類細(xì)胞在自然狀態(tài)下，通常存在于實(shí)體組織中，如皮膚、肌肉、器官等。形態(tài)特征：貼壁細(xì)胞通常會(huì)附著在培養(yǎng)瓶底部，可能會(huì)形成緊密的細(xì)胞間連接，如緊密形成單層或多層的細(xì)胞層。它們的形狀多樣，可以是扁平的，長(zhǎng)方形的，或者是多邊形的等。貼壁細(xì)胞通常會(huì)有明顯的核和細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見各種細(xì)胞器。細(xì)胞之間連接、間隙連接等。生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞的生長(zhǎng)通常需要一定的時(shí)間，因?yàn)樗鼈冃枰雀街谂囵B(yǎng)瓶底部，然后才能開始分

胎牛血清白蛋白（BSA）獲取途徑及其用途2024/05/20: 胎牛血清白蛋白，英文名稱BovineSerumAlbumin（BSA），也稱CohnFractionV，是牛血清中的一種白蛋白，包含583個(gè)氨基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用，例如在westernblot中作為Blockingagent;在酶切反應(yīng)緩沖液中加入BSA，通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度，對(duì)酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性，能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱，表面張力及化學(xué)因素引起的變性。是胎牛血清中的一種球蛋

ELISA實(shí)驗(yàn)顯色淡詳細(xì)解讀2024/05/13: ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）是一種用于檢測(cè)抗原或抗體濃度的免疫學(xué)試驗(yàn)。如果ELISA實(shí)驗(yàn)的顯色淡或靈敏度低，可能有多種原因。ELISA實(shí)驗(yàn)顯色淡的原因及解決方案：原因一：試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng)，溫度太高。解決方案：盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間，夏季應(yīng)放冰塊降溫。原因二：試劑盒未充分平衡。解決方案：試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）。原因三：培養(yǎng)箱溫度不足37℃。解決方案：注意培養(yǎng)箱溫度，放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定，非隔水式培

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