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高效液相色譜分析時如何選擇流動相？2022/08/26
高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而實(shí)現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用。高效液相色譜儀分析時流動相的選擇原則：1.選擇色譜醇的溶劑作為流動相不要隨意加滿溶劑瓶。作為分析流動相，應(yīng)避免不必要的浪費(fèi)，防止污染環(huán)境，危害身體健康。應(yīng)該根據(jù)樣哦數(shù)量，計(jì)算需要使用的溶劑體積，添加適
中壓制備色譜柱的材質(zhì)主要有三種2022/08/22
中壓制備色譜是一般由泵提供壓力，壓力在5~20bar。中低壓色譜柱與常壓柱、HPLC柱有比較大的不同：在使用是是封閉的，但是可以比較方便的打開與調(diào)節(jié)長度，這與中低壓色譜常常固體上樣相適應(yīng)的。中低壓制備色譜柱的材質(zhì)主要有塑料柱、玻璃柱、不銹鋼柱三種。中壓制備色譜的主要部件為輸液泵、進(jìn)樣閥、檢測器、餾分收集器等，早期的中壓液相制備色譜，其輸液泵大流速可達(dá)156mL/min，并配有阻尼器，以保證液流的穩(wěn)定；進(jìn)樣器配有0.5-50mL的不同體積的定量管；檢測器有紫外和示差折光檢測器，流通池體積比較大，允
高效液相色譜分析過程中對定性分析有哪些要求2022/05/18
HPLC過程中影響待測組分遷移的因素較多，同一組分在不同色譜條件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作條件下，同一組分在不同色譜柱上的保留值也可能有很大差別。因此，在高效液相色譜分析過程中，對定性分析方法提出了更高的要求。（1）利用檢測器的選擇性進(jìn)行定性將經(jīng)色譜柱分離后的樣品引入并聯(lián)或串聯(lián)的幾種不同檢測器，根據(jù)它們不同的檢測性能，視其出峰情況可以初步判別出未知化合物的具體類別。（2）反相色譜中的“a、C”指數(shù)定性在以硅膠為固定相的反相色譜中，待測組分保留值與流動相組成關(guān)系式中的系數(shù)能夠反映待測
如何改善高效液相色譜基線漂移的嚴(yán)重性2022/05/17
高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別，它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相，適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。使用高效液相色譜時，液體待檢測物被注入色譜柱，通過壓力在固定相中移動，由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱，通過檢測器得到不同的峰信號，最后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法，廣泛地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜跑梯度如何平衡基線？首先，當(dāng)梯度完成
實(shí)驗(yàn)室級別的制備型液相色譜主要用于以下領(lǐng)域2022/04/21
制備型液相色譜通常都被認(rèn)為和大容量色譜柱和高流速有關(guān)聯(lián)的。然而并不是以設(shè)備的大小和系統(tǒng)消耗的流動相的多少來決定制備高效液相色譜，而是依據(jù)分離目的來決定。分析液相的目的是給一種組份進(jìn)行定量和定性。制備液相的目的是對產(chǎn)品的單體進(jìn)行提取和純化。與傳統(tǒng)的純化方法（如蒸餾、萃?。┍容^，制備液相是一種更有效的分離方法，因此被廣泛應(yīng)用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上。隨著合成、植化、生化和制藥等領(lǐng)域?qū)Ω呒兌冉M份的需求不斷增加，制備型液相色譜儀應(yīng)用的領(lǐng)域也在迅速的擴(kuò)大發(fā)展。實(shí)驗(yàn)室級別的制備型液相色譜主要用于以下領(lǐng)域：
介紹制備色譜柱常用的材質(zhì)及其特點(diǎn)2022/04/18
分析色譜的目的，是分析出混合物中一個（或者幾個）純物質(zhì)的含量。制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質(zhì)。為了加快分離的時間與提高分離的效率，制備色譜的的進(jìn)樣品量很大，導(dǎo)致制備色譜柱子的分離負(fù)荷的相應(yīng)加大，也就必須加大色譜柱填料，增大制備色譜的直徑和長度，使用的相對多的流動相。然而，當(dāng)色譜柱上樣品負(fù)載加大的時候，往往導(dǎo)致柱效急劇下降而得不到純的產(chǎn)品。制備色譜，要解決容量與柱子效果之間的矛盾，對重現(xiàn)性也要考慮。從經(jīng)濟(jì)上來說。制備色譜要爭取少用填料，少用溶劑，要盡可能多的得到產(chǎn)品。制備色譜柱子由于處理的
說一說制備色譜常用的三種模式2022/03/25
制備色譜是以分離出純物質(zhì)為目的的色譜系統(tǒng)，分析色譜是以分析出樣品組分信息為目的的色譜系統(tǒng)，基于他們目的的不同，制備色譜相對于分析色譜有很多不同特征，不能簡單等同。當(dāng)我們在實(shí)驗(yàn)室中想得到納克乃至毫克級的純物質(zhì)時，稍微改裝下分析型色譜系統(tǒng)就能簡單輕松的完成，不過，若所需制備的純品量很大，此時，再用分析型色譜系統(tǒng)分離純化，可以預(yù)見這將是一場“災(zāi)難”。制備色譜常用的色譜模式有低壓，中壓，高壓三種，以應(yīng)對不同類型和不同純度要求的樣品的分離，同時盡可能減少成本。低壓：一般而言，低壓適合易分離化合物，但分離時
高效液相色譜系統(tǒng)常用的三種實(shí)驗(yàn)方法介紹2022/03/16
高效液相色譜系統(tǒng)使用液體作為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)將不同極性的單一溶劑或流動相，如不同比例的混合溶劑和緩沖液，泵入裝有固定相的色譜柱中。色譜柱中的組分分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而實(shí)現(xiàn)樣品的分析。高效液相色譜系統(tǒng)根據(jù)分離機(jī)制的不同，HPLC原理可分為離子交換色譜法、分子排阻色譜法及液液分配色譜法。1、離子交換高效液相色譜法：固定相是離子交換樹脂。樹脂上可電離離子與流動相中具有相同電荷的離子及被測組分的離子進(jìn)行交換，根據(jù)各離子與離子交換基團(tuán)具有不同的電荷吸引力而分離。2、分子排阻色譜法：分子排
高效液相色譜儀的試管使用要注意哪些2021/12/29
高效液相色譜儀是分析實(shí)驗(yàn)室常用的測試儀器之一，其應(yīng)用越來越廣泛。高效液相色譜儀在使用過程中，難免會出現(xiàn)各種各樣的問題，并將直接影響到所測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和儀器的正常工作。1、試管的潔凈問題：高效液相色譜儀分析法是一個很靈敏的分析方法，如果因使用不潔凈的試管，便會影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如，在用甲醇作溶劑來溶解樣品時，所用的小試管是用橡膠塞來做蓋子的，因此，在每次進(jìn)樣時，都有一個保留時間固定的干擾峰存在，后經(jīng)證實(shí)，此干擾峰是由甲醇浸泡橡膠塞而溶下的組分所產(chǎn)生，換用玻璃試管后，干擾峰消除。2、塑料試管的
制備型液相色譜的分離目的是從混合物中得到純物質(zhì)2021/12/22
制備型液相色譜通常都被認(rèn)為和大容量色譜柱和高流速有關(guān)聯(lián)的。然而并不是以設(shè)備的大小和系統(tǒng)消耗的流動相的多少來決定制備液相色譜，而是依據(jù)分離目的來決定。分析液相的目的是給一種組份進(jìn)行定量和定性。制備液相的目的是對產(chǎn)品的單體進(jìn)行提取和純化。與傳統(tǒng)的純化方法（如蒸餾、萃取）比較，制備液相是一種更有效的分離方法，因此被廣泛應(yīng)用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上。隨著合成、植化、生化和制藥等領(lǐng)域?qū)Ω呒兌冉M份的需求不斷增加，制備型液相色譜儀應(yīng)用的領(lǐng)域也在迅速的擴(kuò)大發(fā)展。制備型液相色譜的分離目的是從混合物中得到純物質(zhì)。
制備型液相色譜可分為這幾種類型2021/12/18
制備型液相色譜，按照色譜柱和樣品量的大小，可分為以下類型：(1)低壓液相色譜；(2)中壓液相色譜；(3)高壓液相色譜；(4)快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜1、快速色譜柱壓通常為2bar(或30psi)左右，對于那些容易分離的簡單混合物，由于快速色譜具有操作簡便、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn)，常常是實(shí)驗(yàn)室的選擇。但快速色譜不同于一般的層析分離，這種分離沒有壓力，而快速分離通常使用瓶裝氮?dú)饧訅海沽鲃酉嗑哂幸欢ǖ牧魉?，從而縮短了分離時間。快速色譜使用的柱子一般是玻璃柱，柱直徑為3～10cm.長度為7～15cm。快
高效液相色譜儀系統(tǒng)構(gòu)造介紹2021/11/23
高效液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。1.進(jìn)樣系統(tǒng)一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作進(jìn)樣量是恒定的。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。2.輸液系統(tǒng)該系統(tǒng)包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強(qiáng)為l.47~4.4X107Pa流速可調(diào)且穩(wěn)定，當(dāng)高壓流動相通過層析柱時，可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng)，可加快其在柱中的移動速度，這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存錯和梯度儀，可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而
液相色譜儀和氣相色譜儀的區(qū)別有哪些？2021/08/29
液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上，引用了氣相色譜的理論，在技術(shù)上，流動相改為高壓輸送(Zgao輸送壓力可達(dá)4.9×10^7Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達(dá)幾萬或幾十萬);同時柱后連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進(jìn)行連續(xù)檢測氣相色譜是一種物理的分離方法。利用被測物質(zhì)各組分在不同兩相間分配系數(shù)(溶解度)的微小差異，當(dāng)兩相作相對運(yùn)動時，這些物質(zhì)在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配，使原來只有微小的性質(zhì)差異產(chǎn)生很大的效果，而使不同組分得到分離。氣相
選購液相色譜儀要考慮這幾個因素2021/08/23
液相色譜儀利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進(jìn)行先分離，而后分析鑒定的儀器。由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。液相色譜儀開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相，稱為經(jīng)典液相色譜儀，此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。高效液相色譜儀是在經(jīng)典液相色譜儀的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜儀的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相
流動相和過濾器在高效液相色譜中的作用2021/08/23
高效液相色譜法的應(yīng)用范圍十分廣泛，對樣品的適用性廣，不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，幾乎所有的化合物包括高沸點(diǎn)、極性、離子型化合物和大分子物質(zhì)均可用高效液相色譜法分析測定，因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。下面講講流動相和過濾器在高效液相色譜中的作用：1、流動相流動相就比如人體的血液，其質(zhì)量直接影響到整個系統(tǒng)的正常運(yùn)行與否。應(yīng)該使用HPLC級的溶劑，不能互相混溶的溶劑不可以直接切換！一般在水相和與其不混溶的溶劑切換時，使用異丙醇作為過渡溶劑。注意溶劑的截止波長。截止波長是指該溶劑可以在紫外檢測器中
制備色譜到底是什么呢以及產(chǎn)品特點(diǎn)介紹2021/08/20
制備色譜到底是什么?制備色譜是指采用色譜技術(shù)制備純物質(zhì)，即分離、收集一種或多種色譜純物質(zhì)。制備色譜中的“制備”這一概念指獲得足夠量的單一化合物，以滿足研究和其它用途。制備色譜的出現(xiàn)，使色譜技術(shù)與經(jīng)濟(jì)利益建立了聯(lián)系。制備量大小和成本高低是制備色譜的兩個重要指標(biāo)。其中，氣相制備色譜主要用于石油化工產(chǎn)品和揮發(fā)性天然產(chǎn)物的色譜純樣品制備。分析色譜的目的，是分析出混合物中一個(或者幾個)純物質(zhì)的含量。制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質(zhì)。為了加快分離的時間與提高分離的效率，制備色譜的的進(jìn)樣品量很大，導(dǎo)致
HPLC色譜對流動相的一般要求，常見故障及維護(hù)2021/08/18
色譜法的分離原理是：溶于流動相中的各組分經(jīng)過固定相時，由于與固定相發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同，在固定相中滯留時間不同，從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。高效液相色譜法的應(yīng)用范圍十分廣泛，對樣品的適用性廣，不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，幾乎所有的化合物包括高沸點(diǎn)、極性、離子型化合物和大分子物質(zhì)均可用高效液相色譜法分析測定，因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機(jī)化合物中，可用氣相色譜分析的約占20%，而80%則需用高效液相色譜來分析。與氣相色譜不同的是
分析色譜與制備色譜的區(qū)別及兩者的關(guān)系2021/08/16
一、分析色譜與制備色譜的區(qū)別：1、分析色譜、制備色譜的設(shè)備基礎(chǔ)是什么？分析色譜、制備色譜的共同的*是高效液相色譜，高效液相色譜的優(yōu)點(diǎn)是：（1）分辯率高于其它色譜法；（2）速度快，十幾分鐘到幾十分鐘內(nèi)可完成；（3）實(shí)驗(yàn)重復(fù)性高；（4）高效相色譜柱可反復(fù)使用；（5）自動化操作，分析精確度高。根據(jù)用途不一樣，逐漸區(qū)分出來：分析型用來做樣品定性，純度檢測的，即為分析色譜；制備型是用來快速分離和純化產(chǎn)品的，即為制備色譜。2、分離純化量上，如何區(qū)別，分析色譜與制備色譜？滿足常規(guī)儀器分析，所需要的純樣品的量：
高效液相色譜儀使用過程中會出現(xiàn)的癥狀及處理方法2021/08/09
北京創(chuàng)新通恒科技LC3000U型高效液相色譜儀是一款基于嵌入式操作系統(tǒng)，全新設(shè)計(jì)的新一代色譜儀系統(tǒng)。本系統(tǒng)主要由P3000U.UV3000U(或UV3000UD)組成，外觀美觀大方,操作便利，運(yùn)行可靠，是常規(guī)分析實(shí)驗(yàn)室常用的分析儀器。本系統(tǒng)可廣泛的用于醫(yī)藥、制藥、食品、衛(wèi)生防疫、環(huán)保等多個領(lǐng)域。下面講講使用過程可能會遇到的癥狀及處理方法：癥狀：(一)保留時間變化可能的原因:解決方法1.柱溫變化:柱恒溫；2.等度與梯度間未能充分平衡:至少用10倍柱體積的流動相平衡柱；3.緩沖液容量不夠:用25mm
HPLC色譜產(chǎn)品概述以及液相色譜基線漂移的原因2021/08/04
HPLC色譜概述液相色譜法(HPLC)是上個世紀(jì)七十年代迅速發(fā)展起來的一項(xiàng)快速的分析分離技術(shù)，是現(xiàn)代分離測試的重要手段。色譜法的分離原理是：溶于流動相(mobilephase)中的各組分經(jīng)過固定相時，由于與固定相(stationphase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同，在固定相中滯留時間不同，從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。HPLC是在經(jīng)典的液相色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，其以液體作為流動相，并采用顆粒極細(xì)的固定相的柱色譜分離技術(shù)。其分離機(jī)制與常規(guī)柱色譜相同，但填
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