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高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別，它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相，適于分析高沸點不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。
使用高效液相色譜時，液體待檢測物被注入色譜柱，通過壓力在固定相中移動，由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱，通過檢測器得到不同的峰信號，最后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法，廣泛地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。
高效液相色譜跑梯度如何平衡基線？
首先，當(dāng)梯度完成時，基線漂移是正常的，但是基線漂移的嚴(yán)重性可以通過以下措施來改善：
1.梯度前，最好用純有機(jī)溶劑沖洗高效液相色譜柱，或使用新高效液相色譜柱，以防止高效液相色譜柱中的殘留物導(dǎo)致基線漂移。
2.試劑純度優(yōu)選為普通色譜純試劑。如果純度不夠，梯度過程中也會出現(xiàn)基線漂移。
3.控制室或柱溫，防止溫度波動
4.注射前，進(jìn)行溶劑空白試驗。如果基線漂移嚴(yán)重，可使用該空白進(jìn)行扣除，基線漂移將得到改善。
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