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電泳緩沖液的特點(diǎn)是什么？2024/07/08: 電泳緩沖液是核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳系統(tǒng)的一個重要組成，是電泳場中的導(dǎo)體，也是維持電泳系統(tǒng)恒定pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。電泳緩沖液的特點(diǎn)：1.TAE是使用廣泛的緩沖系統(tǒng)。其特點(diǎn)是超螺旋在其中電泳時更符合實(shí)際相對分子質(zhì)量(TBE中電泳時測出的相對分子質(zhì)量會大于實(shí)際分子質(zhì)量)，且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%，電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果，此外，回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。TAE的

固體樣本處理方法2024/07/04: 固體樣本處理方法：固體樣本處理原則：稱取1g的固體樣本，用9g的合適緩沖液溶解，分泌蛋白可以直接離心取上清檢測，細(xì)胞內(nèi)的蛋白，要先收集細(xì)胞，再用合適方法破碎，離心取上清測試。1、組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取1g組織，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清。分裝一份待檢測，其余冷凍備用，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。對于植物組織，不好勻漿的話，就用液氮研磨，將植物組織放在研缽中，加入適量液氮，充分研磨。

培養(yǎng)皿介紹及使用方法2024/07/02: 培養(yǎng)皿是一種用于盛載液體培養(yǎng)液或固體瓊脂培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的玻璃或塑料圓形器皿。培養(yǎng)皿由一個底和一個蓋組成，是用作培養(yǎng)細(xì)菌的化學(xué)器材，主要材質(zhì)是玻璃或塑料。培養(yǎng)皿質(zhì)地脆弱、易碎，因此在清洗及拿放時應(yīng)小心謹(jǐn)慎、輕拿輕放。使用完畢的培養(yǎng)皿最好及時清洗干凈，存放在安全、固定的位置，防止損壞、摔壞。培養(yǎng)皿的分類根據(jù)培養(yǎng)皿用途的不同可分為細(xì)胞培養(yǎng)皿和細(xì)菌培養(yǎng)皿；根據(jù)制造材料的不同分為塑料培養(yǎng)皿和玻璃培養(yǎng)皿，但進(jìn)口培養(yǎng)皿和一次性培養(yǎng)皿大都是塑料材料。根據(jù)大小的不同通?？煞譃橹睆綖?5mm，60mm，90mm

冰凍切片包埋劑制備注意事項(xiàng)2024/07/01: 操作步驟1、冰凍制片組織常規(guī)取材。2、取材后的組織材塊用干擦布或吸水紙充分吸干表面水分。3、在冷凍切片機(jī)里預(yù)冷的組織托上滴加冷凍切片組織包埋劑。4、待包埋劑底部變白后放上組織材塊。5、迅速放上冷凍錘(低于-25℃)，待組織與包埋劑冷凍凝固后取下冷凍錘。6、將組織托夾入切片夾頭，進(jìn)行切片。7、切片完成后可將組織托置于室溫下3-5分鐘解凍后變軟，用水將包埋劑沖洗干凈。8、將組織放入包埋盒，浸入中性緩沖福爾馬林固定液中進(jìn)行組織固定。結(jié)果1、包埋效果良好:包埋劑均勻圍繞組織，冷凍后包埋劑和組織變白，硬度

胎牛血清如何正確存放與解凍2024/06/24: 一、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?未拆封的血清，一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃，在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用，若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi)，再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融，或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。溶解后建議盡快使用，若長時間儲存在2-8℃，血清中的各種（脂）蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。二、血清中絮狀沉淀

即用型透析袋與干型透析袋的區(qū)別2024/06/21: 一、即用型透析袋即用型透析袋的制造過程沒有重金屬污染及硫化物，無需預(yù)處理，只需用去離子水清洗即可使用，滿足對截留分子量精確性和膜純度的應(yīng)用。1.韌性膜材料，不易破損2.雜質(zhì)含量極少，可無需預(yù)處理，只需用去離子水清洗即可使用3.孔徑標(biāo)準(zhǔn)均一4.對溶質(zhì)的吸附性小5.可選分子量范圍廣100-3000006.多種扁平寬度可選7.生物技術(shù)膜，不含硫化物及金屬雜質(zhì)二、普通干型透析袋1.PH穩(wěn)定范圍:5-92.污染物水平:硫化物3.化學(xué)兼容性:與很多鹽兼容，比如CaCl2,(NH4)2SO4；還可與分子生物學(xué)

ELISA中必要的三個試劑2024/06/18: 完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);(5)酶聯(lián)物(結(jié)合物)及標(biāo)本的稀釋液;(6)洗滌液;(7)酶反應(yīng)終止液。免疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)干燥的條件下一般可保存6個月以上。有些不完整的試盒，僅供應(yīng)包被用抗原或抗體，檢測人員需自行包被。以下簡述固相載體和包被過程。固相載體固相載體在ELISA測定

實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞爬片的準(zhǔn)備及操作2024/06/17: 細(xì)胞爬片的準(zhǔn)備1、蓋玻片的選擇：爬片可用一般的蓋玻片，也可用專用細(xì)胞爬片（價格比較昂貴）但是細(xì)胞貼壁牢固，拍出照片效果好。2、爬片的剪裁：可根據(jù)自己的需要，到染色時再將之切開，這樣既保證了細(xì)胞均一性，又可同時做幾個指標(biāo)的染色剪裁成合適大小，置于6孔板、12孔板或24孔板。3、爬片的使用前處理：將剪裁好的爬片，置于濃硫酸中浸泡并過夜，第二天先用自來水沖洗20遍，再置于無水酒清中浸泡6小時，再用三蒸水沖洗3遍。細(xì)胞爬片的操作1、胰酶消化細(xì)胞后計(jì)數(shù)重懸細(xì)胞于培養(yǎng)基中。2、加細(xì)胞前，根據(jù)玻片的大小，先在

如何使用細(xì)胞篩網(wǎng)2024/06/13: 準(zhǔn)備濾器：選擇合適的細(xì)胞篩網(wǎng)，并根據(jù)需要在濾器上加上濾紙，使其更容易使用。準(zhǔn)備細(xì)胞懸液或培養(yǎng)基：將細(xì)胞懸液或培養(yǎng)基倒入容器中，并加入需要的藥物、酶、抗生素等。過濾細(xì)胞：將濾器輕輕地壓在溫和的細(xì)胞懸液或培養(yǎng)基中，讓其均勻地經(jīng)過細(xì)胞篩網(wǎng)的孔。收集過濾的細(xì)胞：過濾后的細(xì)胞可以直接通篩網(wǎng)被收集或者用無菌的器具從容器中進(jìn)行收集。細(xì)胞培養(yǎng)：若需要培養(yǎng)篩選的細(xì)胞，則將其收集到未被污染的細(xì)胞培養(yǎng)基中，并按照培養(yǎng)基配方進(jìn)行培養(yǎng)。此外，細(xì)胞篩網(wǎng)的使用還需注意以下幾點(diǎn)：1.細(xì)胞篩網(wǎng)的類型。細(xì)胞篩網(wǎng)通常分為單層和多層兩

PBS緩沖液的配置方法及作用2024/06/11: PBS緩沖液，是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaC和KCI，一般作為溶劑，起溶解保護(hù)試劑的作用。由于Na2HPO和KH2PO4有二級解離，緩沖的PH值范圍很廣，而NaCI和KCI主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1mmoI/LCaCI2和0.5mmoI/LMgCI2，以提供二價陽離子。01、配置方法分別稱取8g的NaCI、0.2g的KCI、1.44g的Na2HPO4、0.24g的KH2PO4，溶于800ml蒸餾水中，使用HCI調(diào)

影響ELISA試劑盒測定成果的解決辦法2024/06/06: 一、類風(fēng)濕因子人血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）能夠與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結(jié)合，然后導(dǎo)致假陽性。解決辦法:1.用F（ab）2替代完好的IgG；2.標(biāo)本用聯(lián)有熱變性（63℃，10min）IgG的固相吸附劑處理（將熱變性IgG加入到標(biāo)本稀釋液中同樣有用）；3.檢測抗原時，能夠用2-巰基yi醇等加入到標(biāo)本稀釋液中，使RF降解。二、補(bǔ)體ELISA系統(tǒng)中固相一抗和符號二抗過程中，抗體分子發(fā)作變構(gòu)，其FC段的補(bǔ)體C1q分子結(jié)合位點(diǎn)被暴露出來，使C1q能夠?qū)⒍哌B接起來，

什么是細(xì)胞培養(yǎng)？2024/06/04: 培養(yǎng)的細(xì)胞從哪里來？1.細(xì)胞株簡單說就是買的或送的。2.原代細(xì)胞組織或血液中提取的。一般細(xì)胞株可以連續(xù)傳代，而原代細(xì)胞養(yǎng)著養(yǎng)著就掛了。培養(yǎng)細(xì)胞的生長方式有哪些？1.貼壁生長必須貼附于支持物表面才能生長。見于各種腫瘤細(xì)胞等。（你把培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶底朝上，細(xì)胞也不會掉下來。2.懸浮生長于懸浮狀態(tài)下即可生長，不需要貼附于支持物表面。見于各種造血系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞等。每代貼附生長細(xì)胞的生長過程分為：1）游離期：細(xì)胞接種后在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)，也稱懸浮期。2）貼壁期：細(xì)胞貼附于（膠原、玻璃、塑料、其他細(xì)胞等）。3

即用型RC膜的使用方法2024/05/20: 一、膜技術(shù)參數(shù)：生物技術(shù)RC膜（再生纖維素），重金屬離子和硫化物含量為痕跡級別，干型，膜表面有甘油保護(hù)層，使用前用溫水（60℃以內(nèi)）浸泡10分鐘左右后，再以蒸餾水沖洗干凈即可。RC膜擁有廣泛的化學(xué)兼容性，能承受弱酸弱堿或稀釋的強(qiáng)酸強(qiáng)堿，絕大部分的醇類物質(zhì)。弱極性有機(jī)物或者稀釋過的強(qiáng)極性有機(jī)物，如DMSO，接觸強(qiáng)極性有機(jī)溶劑可能會損害RC膜。標(biāo)準(zhǔn)RC膜能適用pH值2-12以及溫度4-132°C之間。二、儲存條件:透析膜表面有甘油保護(hù)層，封放置于4-37°C之間環(huán)境。建議密封放在冰箱冷藏室4℃保存。

尖底離心管與圓底離心管的區(qū)別2024/05/16: 尖底離心管和圓底離心管的主要區(qū)別在于它們的底部形狀和設(shè)計(jì)，這些差異影響了它們的使用范圍和性能。以下是兩者之間的主要區(qū)別：形狀：①尖底離心管的底部是尖銳的錐形，這種設(shè)計(jì)可以集中樣品的沉淀于底部，從而提高沉淀物在底部的濃度和純度。②圓底離心管的底部是圓形的，有助于平衡樣品的沉淀和防止樣品干燥。用途：①尖底離心管則更適合用于分離較大的固體，如細(xì)胞、組織等，以及在需要進(jìn)行密度梯度收集的情況下。②圓底離心管通常用于沉淀較小的顆粒物或分離液體中的成分，以及在進(jìn)行加熱或高速旋轉(zhuǎn)的實(shí)驗(yàn)時，因?yàn)樗鼈兊拿芊庑暂^好。

影響培養(yǎng)基滅菌效果的因素有哪些2024/05/11: 1.營養(yǎng)成分的保持濕熱滅菌時，微生物被殺死的同時，培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞，特別是氨基酸和維生素。如在121℃，僅20min，就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞，蛋氨酸和色氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應(yīng)，造成培養(yǎng)基中原有營養(yǎng)成分的數(shù)量變化，因而影響培養(yǎng)基質(zhì)量。2.微生物的耐熱性細(xì)菌芽孢的熱阻較大，滅菌所需要的時間取決于把細(xì)菌芽孢減少到所規(guī)定數(shù)目的時間。3.pH值pH值對微生物的耐熱性影響很大。pH值介于6.0~8.0時，微生

牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中的作用2024/05/10: 牛血清白蛋白（BSA）在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,接下來為大家介紹其中兩種作用。牛血清白蛋白測定蛋白濃度：按50：1配置BCA工作液。10ulC液（蛋白標(biāo)準(zhǔn)）+90ulPBS液稀釋成0.5mg/ml的蛋白標(biāo)準(zhǔn)液。再分別以0、1、2、4、8、12、16、20ul將蛋白標(biāo)準(zhǔn)液加入96孔板的第1~8標(biāo)準(zhǔn)孔中，在其他樣品孔中加入10ul待測樣品。分別加PBS定容至20ul。各孔中加入200ulBCA工作液，室溫放置2小時。用酶標(biāo)儀測定蛋白濃度：測定A562，依標(biāo)準(zhǔn)曲線算出蛋白濃度。牛血清白蛋白SDS-PA

透析袋的使用技巧2024/04/29: 1）除鹽透析時將高鹽的樣本加入透析袋中，夾緊，用你選擇的保存液進(jìn)行透析，一般在2-8度透析過夜，中間要更換一到兩次透析液，另外透析液體積盡量大些。先把透析液放進(jìn)容器中（容器的直徑小于透析袋長度），再將夾好的透析袋豎直放進(jìn)去，這樣透析袋與透析液的接觸面積是最大的，幾乎整個透析袋都與透析液接觸，溶液的置換面積最大，置換速度最快。如果夾子很穩(wěn)，那就夾好，先把透析液放進(jìn)容器中（容器的直徑小于透析袋長度），再將夾好的透析袋豎直放進(jìn)去，這樣透析袋與透析液的接觸面積是最大的，幾乎整個透析袋都與透析液接觸，溶液

ELISA和WB區(qū)別2024/04/24: ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）用到了免疫學(xué)原理和化學(xué)反應(yīng)顯色，待測的樣品多是血清、血漿、尿液、細(xì)胞或組織培養(yǎng)上清液，因而沒有用到組織包埋、切片等技術(shù)，這是與免疫組化的主要區(qū)別，操作上開始需要將抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面，從而使后來形成的抗原-抗體-酶-底物復(fù)合物粘附在載體上，這就是“吸附”的含義。免疫組化和elisa所用到的原理大致相同，只是因?yàn)樗鶛z測的樣品不同，從而在操作方法上有所不同。elisa多用于定量分析，其靈敏度非常高。Westernbolt（蛋白質(zhì)印跡法）先要進(jìn)行SDS-PAGE，

針頭式過濾器的使用方法2024/04/22: 1.確保針頭式過濾器的濾芯是干凈和完好的，不存在損壞或污垢。確保濾座和濾頭也是完好的，沒有任何堵塞或損壞。收集所需的工具和材料，如螺絲刀、密封膠、連接管等。2.安裝過濾器:根據(jù)需要選擇合適的位置來安裝過濾器。確保過濾器安裝的位置能夠方便操作和維護(hù)，并且不會對其他設(shè)備的正常工作造成于擾。根據(jù)管道的直徑，選擇合適的連接管，并使用密封膠確保連接緊密。使用螺絲刀將過濾器固定在合適的位置上。3.準(zhǔn)備濾芯:將濾芯按照過濾要求選擇合適的型號，并確保濾芯的有效期沒有過期。如果需要，將濾芯浸泡在清水中一段時間以去

爬片的特點(diǎn)與注意事項(xiàng)2024/04/19: 爬片又名細(xì)胞爬片，是指讓玻片浸在細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)，細(xì)胞在玻片上生長，主要用于組織學(xué)，免疫組織學(xué)，冰凍切片，細(xì)胞涂片，原位雜交等。細(xì)胞爬片特點(diǎn)1.玻片表面經(jīng)過TC處理，雙面均可使用.2.ybeita射線滅菌,保證無菌.3.使用便捷,只需打開包裝,將爬片放入孔板內(nèi),將細(xì)胞懸液滴到爬片上即可培養(yǎng).4.爬片厚度為0.17mm,直徑為8mm/14mm/20mm/25mm.分別適用于48孔細(xì)胞培養(yǎng)板/24孔細(xì)胞培養(yǎng)板/12孔細(xì)胞培養(yǎng)板/6孔細(xì)胞培養(yǎng)板5.吸附強(qiáng)：該玻片表面具有陽離子電荷,可以通過靜電作用吸附冰凍

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