泛素化蛋白檢測檢測技術服務詳情介紹

泛素化蛋白檢測是為了鑒定和量化dànbáizhì在經過泛素化翻譯后修飾后的狀態(tài)。以下是檢測泛素化蛋白的常用方法：

圖1.泛素化修飾研究路線

1、免疫印跡分析 (Western Blot)：

免疫印跡是檢測泛素化蛋白的常用方法。這個過程通常包括：

• 提取dànbáizhì樣本。

• 使用SDS-PAGE電泳分離dànbáizhì。

• 將dànbáizhì轉移到膜上。

• 使用針對泛素的抗體進行檢測，以識別泛素化的dànbáizhì。

2、免疫沉淀 (Immunoprecipitation, IP)：

• 目的: 富集特定的泛素化目標蛋白。

• 方法: 使用目標蛋白的特異性抗體進行免疫沉淀，然后進行Western blot，使用抗泛素抗體來檢測泛素化。

3、雙免疫沉淀 (Tandem Immunoprecipitation)：

• 目的: 鑒定與目標蛋白相關的特定泛素鏈類型。

• 方法: 首先使用抗泛素鏈特異性抗體（例如抗-K48或抗-K63鏈的抗體）進行沉淀，然后使用目標蛋白的抗體進行第二次沉淀。

4、質譜分析 (Mass Spectrometry)：

• 目的: 鑒定泛素化位點以及泛素鏈的類型。

• 方法: 利用LC-MS/MS技術鑒定泛素化的dànbáizhì和修飾位點。經常結合酶消化（如Trypsin消化）來產生肽段，然后進行分析。

5、熒光顯微鏡技術

• 使用標記泛素的熒光標簽，觀察泛素化蛋白在細胞中的位置和分布。這種方法可以用于實時監(jiān)測泛素化事件。

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