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肽序列測定全解析:從原理到應(yīng)用

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百泰派克生物科技-生物藥物表征,生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Biotech Pack Scientific Co., Ltd. 簡稱BTP)從事以生物質(zhì)譜為依托的生物藥物表征,大分子物質(zhì)(包括蛋白質(zhì)、多肽、代謝物)質(zhì)譜分析以及小分子物質(zhì)檢測服務(wù)。

l 公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,專業(yè)提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù);

l 獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù);

l 業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白質(zhì)組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等;

l 7大質(zhì)量控制檢測平臺,滿足您一站式服務(wù)需求;

l 服務(wù)3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;

l 致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!






業(yè)務(wù)范圍主要圍繞蛋白和小分子代謝物檢測兩大板塊,從事蛋白質(zhì)和小分子代謝物的理化性質(zhì)分析及結(jié)構(gòu)解析等相關(guān)技術(shù)服務(wù),為客戶提供高性價比、高效率的技術(shù)服務(wù)。

價格 詢價

肽序列測定全解析:從原理到應(yīng)用檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

肽序列測定(Peptide Sequencing)基于高分辨質(zhì)譜(MS)技術(shù),通過對蛋白酶解產(chǎn)物的肽段進行質(zhì)量分析、碎片解析與生物信息學(xué)比對,推導(dǎo)肽段氨基酸序列,從而揭示dànbáizhì(或多肽)中各氨基酸殘基的線性順序,從而解析dànbáizhì的一級結(jié)構(gòu)。肽序列測定不僅可以揭示dànbáizhì的組成與結(jié)構(gòu),還可定位翻譯后修飾(PTMs)位點,幫助科研人員研究dànbáizhì的功能、相互作用及其在生命活動中的作用,推動蛋白zhìzǔxué、藥物開發(fā)、疾病機制研究。故從原理到應(yīng)用,掌握肽序列測定是蛋白組學(xué)研究、生命科學(xué)探索與生物醫(yī)藥開發(fā)中的重要一步。


一、肽序列測定核心原理

1、 蛋白酶解

使用yídànbáiméi、Lys-C、Glu-C等特異性酶將蛋白切割成適合質(zhì)譜分析的肽段。酶解反應(yīng)控制溫度、pH、酶量及時間,確保生成理想長度和覆蓋度的肽段。


2、離子化與質(zhì)譜檢測

肽段通過電噴霧(ESI)或基質(zhì)輔助激光解吸(MALDI)技術(shù)離子化。高分辨質(zhì)譜(如Orbitrap、FTICR)對肽段分子離子進行質(zhì)荷比(m/z)檢測,獲得肽段的整體質(zhì)量信息。


3、母離子選擇與碎片化(MS/MS)

選定特定母離子(前體肽段),在碰撞室中通過碰撞誘導(dǎo)解離(CID)、高能碰撞解離(HCD)或電子轉(zhuǎn)移解離(ETD)生成b、y離子系列,解析肽段序列信息。


4、數(shù)據(jù)分析與序列推導(dǎo)

結(jié)合數(shù)據(jù)庫搜索(如Mascot、MaxQuant)或de novo測序算法,解析碎片圖譜,推導(dǎo)肽段氨基酸序列,并定位翻譯后修飾(PTMs)位點。


二、肽序列測定的完整實驗流程

肽測序的實驗步驟主要包括以下八個環(huán)節(jié):

1、樣品制備與蛋白提取

(1)使用含緩沖鹽、去垢劑和還原劑的裂解液,結(jié)合超聲、機械破碎等方法提取蛋白。

(2)還原(DTT)與烷基化(IAA)處理破壞二硫鍵,確保蛋白wánquán展開。

(3) jīngquè定量(BCA/Bradford/紫外法),控制蛋白濃度。


2、 蛋白酶解

(1) 單酶(Trypsin)或多酶(Trypsin+Lys-C、Glu-C)組合。

(2)反應(yīng)條件:37°C,pH 7.8–8.0,12–16小時。


3、多肽純化與脫鹽

(1)使用C18固相萃?。⊿PE)去除鹽離子和雜質(zhì)。

(2)對復(fù)雜樣品采用凝膠切割或SDS-PAGE純化。


4、液相色譜分離(LC)

(1) 采用納流LC(nano-LC)結(jié)合C18反相柱,基于疏水性分離肽段。

(2) 梯度優(yōu)化(流動相水-乙腈+酸),提高分辨率和檢測靈敏度。


5、 離子化與質(zhì)譜檢測

(1)在線LC-ESI-MS/MS(液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜)。

(2) 高分辨質(zhì)譜(Orbitrap、FTICR)提供亞ppm質(zhì)量精度。


6、母離子選擇與碎片生成

(1)動態(tài)排除與自動增益控制(AGC),確保檢測低豐度肽段。

(2) 碎片模式:CID(適合常規(guī)碎片)、HCD(豐富碎片)、ETD(保護修飾信息)。


7、數(shù)據(jù)采集與序列解析

(1)數(shù)據(jù)庫搜索:匹配理論碎片譜(質(zhì)量偏差MS1:±10 ppm,MS2:±0.02 Da)。

(2)de novo測序:直接從碎片譜推導(dǎo)未知序列。

(3)多引擎(Mascot、MaxQuant、Byonic)與AI輔助(如Prosit)提高解析效率。


8、修飾定位與多維驗證

結(jié)合保留時間、碎片圖譜、同位素分布,定位磷酸化、糖基化等修飾位點。


三、肽序列測定的應(yīng)用領(lǐng)域與前沿趨勢

1、應(yīng)用領(lǐng)域

(1) 蛋白zhìzǔxué研究:系統(tǒng)解析細胞、組織、血漿等樣品蛋白組。

(2)翻譯后修飾研究:定位磷酸化、乙?;⑻腔?、泛素化等關(guān)鍵修飾位點,揭示功能調(diào)控機制。

(3)新抗原發(fā)現(xiàn):在腫瘤miǎnyìzhìliáo、疫苗研發(fā)中發(fā)現(xiàn)新抗原肽段。

(4)生物標志物開發(fā):篩選疾病相關(guān)肽段,用于早篩、診斷和療效預(yù)測。

(5)生物制藥質(zhì)量控制:驗證蛋白藥物純度與批次一致性。


2、前沿趨勢

(1) 單細胞與空間層次肽測序:推動單細胞、組織空間維度蛋白組學(xué)研究。

(2) 多技術(shù)融合:結(jié)合MS/MS、質(zhì)譜成像(MSI)、原位質(zhì)譜(DESI-MS),實現(xiàn)全景蛋白組解析。

(3) AI與深度學(xué)習(xí)輔助:提升復(fù)雜樣本中肽段鑒定和修飾定位的精度與效率。


作為蛋白組學(xué)和多肽測序領(lǐng)域的lǐngxiān服務(wù)商,百泰派克生物科技依托*的高分辨質(zhì)譜平臺(Orbitrap Fusion Lumos、Q-Exactive HF-X、MALDI-TOF/TOF)、自主開發(fā)的樣品制備和數(shù)據(jù)分析流程,為全球科研人員和企業(yè)客戶提供:從樣品到結(jié)果的全鏈路多肽測序解決方案; jīngzhǔn檢測低豐度、多修飾肽段,提升數(shù)據(jù)質(zhì)量;AI與多引擎算法(MaxQuant、Byonic、Mascot)提高解析準確率與效率; zhuānyè團隊定制化支持,解決復(fù)雜樣本中的多肽測序難題。


百泰派克生物科技特色項目


一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù),包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù),對蛋白序列進行分析。


※服務(wù)優(yōu)勢:

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。



二、蛋白zhìzǔxué

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,提供定量蛋白zhìzǔxué、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種蛋白zhìzǔxué分析服務(wù)。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白zhìzǔxué服務(wù),助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。


※服務(wù)優(yōu)勢:

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,分析更系統(tǒng)準確。



三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質(zhì)量譜,zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。


※服務(wù)優(yōu)勢:

1.技術(shù)*,*技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù),避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大,成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質(zhì)譜技術(shù)一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾;

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。



四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進行免疫肽組學(xué)分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。



五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),MALDI TOF,高效色譜分離技術(shù),提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù),幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。



百泰派克生物科技七大檢測平臺

肽序列測定全解析:從原理到應(yīng)用




百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則,通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設(shè)備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù);

2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù);

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等;

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,滿足您一站式服務(wù)需求;

5.服務(wù)3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!



肽序列測定全解析:從原理到應(yīng)用檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹



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