手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
BCA蛋白定量試劑盒檢測方法：
1. 試管檢測方法(樣品:BCA工作液=1:20)
(1) 各取100 μL 標準品和待測樣品加入到反應管中。
(2) 每管加入2.0 mL BCA 工作液，混勻。根據(jù)待測樣品的濃度范圍選擇孵育時間和溫度。
標準孵育方法：37℃ 孵育30 min 或者室溫2h(檢測范圍：20-2000 μg/mL)
增強孵育方法：60℃ 孵育30 min(檢測范圍：5-250 μg/mL)
【注】：BCA 檢測蛋白濃度，延長孵育時間會加深顏色反應。升高溫度會加快顯色反應，但是溫度升高和時間延長會降低檢測下限，以及降低工作線性范圍。若蛋白濃度很低，可在較高溫度孵育或者適當延長孵育時間。
(3) 冷卻到室溫。在分光光度計上進行檢測，設定波長為 562 nm，在10 min內(nèi)對所有樣品讀數(shù)?！咀ⅰ浚河捎贐CA 反應達不到真正的反應終點，即使溫度降低至室溫生色反應液會繼續(xù)。但是，由于室溫下生色比率相當?shù)停虼巳羰?0 min 內(nèi)能對所有的樣本進行 562 nm 吸光度的測試，不會導致明顯錯誤。
(4) 根據(jù)BSA 標準品的吸光度(減去標準品中空白孔的OD 值即最終的讀數(shù))，繪制標準曲線(X-蛋白濃度μg/mL；Y-最終的OD 562nm)。依據(jù)標準曲線和樣品的稀釋倍數(shù)計算樣品蛋白濃度。
2. 微孔板檢測方法(樣品: BCA工作液=1:20)
(1) 各取10 μL標準品和待測樣品加入到微孔板中。【注】：樣品與工作液比例為1:20，檢測范圍為125-2000 μg/mL。若樣品濃度非常低，可使用25μL 標準品和待檢測樣品進行檢測(即1:8)，這時試劑盒的檢測范圍為 20-2000 μg/mL。
(2) 每孔加入200 μL BCA 工作液，槍頭吹打充分混勻。蓋上微孔板，37℃ 孵育30 min。
(3) 冷卻到室溫，在酶標儀上的562 nm 波長范圍處檢測吸光度。
(4) 根據(jù)BSA標準品的吸光度(減去標準品中空白孔的OD值即最終的讀數(shù))，繪制標準曲線( X-蛋白濃度μg/mL；Y-最終的OD 562nm)。依據(jù)標準曲線和樣品的稀釋倍數(shù)計算樣品蛋白濃度。
BCA蛋白定量試劑盒注意事項：
本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。
若測定標準曲線時無梯度變化，表明存在BCA法檢測干擾物，詳細的BCA法干擾物質(zhì)兼容性表詳見官*。
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關權(quán)利。
采購中心