組織RNA保存液 （RNA Later）

產(chǎn)品描述

組織RNA保存液（RNA Later）（下文簡稱“RNA Later”）是一種液態(tài)、無毒的組織保存試劑，能迅速穩(wěn)定組織，保護(hù)非冷凍細(xì)胞RNA于原位且不會導(dǎo)致RNA的降解?？蓮V泛應(yīng)用于多種脊椎動物樣本（包括腦、心、腎、脾、肝、睪丸、骨骼肌、脂肪、肺和胸腺），對大腸桿菌、果蠅、組織培養(yǎng)細(xì)胞、全血細(xì)胞和一些植物也有效。

RNA Later不會影響樣品的后續(xù)處理，可以配合各種常見的 RNA抽提試劑盒使用，例如TRIzol（Cat#AN51L758）、RNAzol、各種RNA提取試劑盒、酚抽法以及利用Oligo（dT）原理的mRNA抽提試劑。

訂購信息

運輸與保存

常溫運輸。常溫保存，有效期12個月。

使用方法（只能用于新鮮組織，在浸入RNA Later之前不能冷凍組織）

1. 根據(jù)要保存的各樣本的體積，計算出所需RNA Later用量（應(yīng)當(dāng)是組織體積的5倍；離心收集2×10⁶細(xì)胞RNA Later的用量是1mL）。

2. 將RNA Later按需要量分裝入自備保存管中。

3. 快速將較大的組織切成切割至每個方向（長度、寬度或厚度）均<0.5 cm，立即浸入RNA Later中（確保RNA Later能夠滲透組織）。較小的組織（如大鼠的腎臟、脾臟，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNA Later。

4. 保存時先將樣本浸入RNA Later后置4℃冰箱過夜（4℃過夜是必需的，這樣可使RNA Later滲入到組織中），然后去除上清液（也可留存），再轉(zhuǎn)移至-20°C或-80°C進(jìn)行長期保存。

注：樣本在-20℃條件下不會凍結(jié)，但在存貯緩沖液中會有結(jié)晶形成，這并不影響隨后的RNA提取。樣本在-80℃條件下會凍結(jié)，測試表明，在RNA Later中保存的標(biāo)本，反復(fù)凍融至室溫20次不影響RNA的質(zhì)量。

5. RNA Later 中樣本的RNA提取：

(1)       組織：用消毒鑷子將組織從存貯溶液RNA Later中取出，浸泡在RNA提取溶液中。一旦將組織放入RNA提取溶液中，勻漿一定要迅速進(jìn)行。

(2)       細(xì)胞：從存貯在RNA Later中的細(xì)胞中提取RNA有兩種操作方法可供選擇：去除RNA Later或者從細(xì)胞與RNA Later的混合物中直接提取RNA。

注意事項

1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2. 本產(chǎn)品在4℃條件下會引起沉淀，加熱到37℃即可澄清。

3. 使用RNA Later：

(1)       動物組織：RNA Later不會溶解或破壞組織樣本的結(jié)構(gòu)。如果需要的話，仍可將已經(jīng)平衡在RNA Later溶液中的組織取出并分割成更小的塊再重新放入到RNA Later中。

(2)       植物組織：許多植物組織可以簡單浸泡在5倍體積的RNA Later中保存。具有自然屏障防止擴(kuò)散的植物如蠟表皮的葉組織可能需要先破壞其屏障，以允許RNA Later進(jìn)入組織。

(3)       培養(yǎng)細(xì)胞：沉淀細(xì)胞，先用PBS洗一次，再用少量的PBS懸浮細(xì)胞，然后加5~10倍體積的RNA Later保存。

(4)       白細(xì)胞：如果將白細(xì)胞從紅細(xì)胞和血清中分離出來，并按組織培養(yǎng)細(xì)胞一樣處理后，白細(xì)胞便能有效地保存在RNA Later中。不要將全血、血漿或血清中的RNA保存在RNA Later中，因為它們蛋白含量過高，與RNA Later混合后易形成不溶的沉淀。

(5)       細(xì)菌：RNA Later是抑菌的，雖然細(xì)菌在RNA Later中不能生長，但細(xì)胞仍保持其完整性。大腸桿菌保存在RNA Later中4℃條件下1個月仍很完整，產(chǎn)生不降解的RNA。

4. 去除RNA Later：因為RNA Later的濃度比典型的細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)的濃度高，因此用通常沉淀活細(xì)胞的離心力無法沉淀RNA Later中的細(xì)胞（HeLa細(xì)胞大約需要5000g）。

5. 對于多數(shù)在 RNA later 溶液樣本，在缺乏-20°C或-80°C長期保存條件時，RNA樣本可通過以下方式短期保存： ①4°C保存長達(dá) 1 個月，RNA 不會出現(xiàn)顯著降解；②25°C保存長達(dá) 1 周，RNA 質(zhì)量不會顯著下降。但2 周后，RNA 通常會出現(xiàn)輕微降解（尚可滿足 Northern 印跡分析的基本要求，仍適用于核酸酶保護(hù)實驗或 RT-PCR 分析）；③37°C下24小時內(nèi)RNA完整，3天后部分降解。

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