Edman降解是什么？蛋白質(zhì)測序的核心技術(shù)解析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì是生命活動的執(zhí)行者，其一級結(jié)構(gòu)（氨基酸序列）決定了其功能。要研究dànbáizhì的結(jié)構(gòu)與功能，首先必須了解其氨基酸組成和排列順序。因此，dànbáizhì測序成為現(xiàn)代生命科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)中的關(guān)鍵步驟。而在眾多測序方法中，Edman降解（Edman degradation）被譽為dànbáizhì一級結(jié)構(gòu)解析的“經(jīng)典之選"。

一、什么是Edman降解？

Edman降解是一種用于確定dànbáizhìN端氨基酸序列的化學(xué)方法，由澳大利亞化學(xué)家Pehr Edman于1950年開發(fā)。其核心原理是：通過苯異硫氰酸酯（PITC）選擇性標記肽鏈的N端氨基酸，在溫和條件下裂解形成可識別的PTH-氨基酸衍生物，同時保留剩余肽鏈用于下一輪循環(huán)。這種逐步“剝離"氨基酸的方式，可以順序解析出dànbáizhìN端的氨基酸組成。

二、Edman降解的反應(yīng)流程：

1、標記：PITC與肽鏈N端游離氨基反應(yīng)，形成環(huán)狀酰胺中間體。

2、裂解：在酸性條件下切斷N端dìyī個氨基酸，與PITC形成穩(wěn)定的PTH-氨基酸。

3、鑒定：使用高效液相色譜（HPLC）或其他方法檢測PTH-氨基酸種類。

4、重復(fù)循環(huán)：重復(fù)以上步驟，逐個剝離氨基酸，直到達到測序上限（一般為30個殘基以內(nèi)）。

三、Edman降解的優(yōu)勢與局限

? 優(yōu)勢：

• 高保真度：逐個氨基酸識別，序列準確性高。

• 無需標簽：不需要對目標蛋白進行同位素或熒光標記。

• 對已純化蛋白有效：適用于單一dànbáizhì樣本的序列驗證。

? 局限性：

• N端封閉限制：若蛋白N端被修飾（如乙?；⒓柞；?，將無法進行Edman反應(yīng)。

• 不適合復(fù)雜混合物：只能對單一、多肽純度較高的樣本有效。

• 序列長度有限：一般測序上限為20–30個氨基酸殘基，無法覆蓋全長蛋白。

• 對蛋白量有要求：通常需要≥1 pmol級別的純蛋白輸入量。

四、Edman降解在科研中的應(yīng)用

盡管現(xiàn)代質(zhì)譜（MS）技術(shù)逐漸成為主流，Edman降解依然在以下領(lǐng)域具有dútè價值：

1、dànbáizhìN端驗證

在重組蛋白表達與純化后，研究人員常使用Edman降解確認目標蛋白是否有N端截斷、修飾，或起始密碼子翻譯是否正確。

2、抗體表位測序

Edman法適用于對單一多肽（如抗原肽、B細胞表位）進行序列確認，特別是在開發(fā)多克隆或單克隆抗體時。

3、結(jié)合質(zhì)譜進行雙重驗證

在某些關(guān)鍵項目中，如臨床級蛋白藥物開發(fā)、蛋白工程研究，研究者會同時使用Edman降解和LC-MS/MS對序列進行交叉確認，確保結(jié)果無誤。

五、Edman降解 vs 質(zhì)譜測序：互為補充

? 實踐經(jīng)驗顯示，在Nduāncèxù、藥物質(zhì)量控制、定量標準品開發(fā)等領(lǐng)域，兩者聯(lián)用效果zuì佳。

Edman降解作為dànbáizhì測序的奠基性技術(shù)，其高精度與可解釋性在某些應(yīng)用中依然wúkětìdài。百泰派克生物科技堅持以科研需求為導(dǎo)向，致力于為高校課題組、科研機構(gòu)及生物醫(yī)藥研發(fā)團隊提供高標準、可信賴的蛋白測序解決方案與技術(shù)支持。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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