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無標(biāo)記定量蛋白組學(xué)

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無標(biāo)記定量蛋白組學(xué)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

無biāojìdìng量技術(shù)(Label-free)是研究定量dànbáizhì組學(xué)的技術(shù)之一,相較于傳統(tǒng)的biāojìdìng量技術(shù),無biāojìdìng量蛋白技術(shù)具有顯著的優(yōu)勢(shì)。傳統(tǒng)的biāojìdìng量方法通常涉及復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)步驟,耗時(shí)耗力,并且標(biāo)記試劑成本高昂。然而,無biāojìdìng量技術(shù)無需特殊的實(shí)驗(yàn)操作要求,省去了繁瑣的標(biāo)記步驟,使得實(shí)驗(yàn)流程更加簡(jiǎn)潔高效。此外,該技術(shù)成本相對(duì)較低,樣品制備也相對(duì)簡(jiǎn)單。目前使用zuì廣泛的非biāojìdìng量方法主要有2種,一種是基于質(zhì)譜峰的峰面積或峰強(qiáng)度來進(jìn)行定量,另外一種是基于蛋白的肽段鑒定數(shù)來進(jìn)行定量。


1、基于質(zhì)譜峰的峰面積或峰強(qiáng)度來進(jìn)行定量

其原理基于肽段質(zhì)譜信號(hào)與其含量之間的相關(guān)性,通過比較不同樣品中相同肽段的峰面積或峰強(qiáng)度,可計(jì)算出該肽段在不同樣品中的相對(duì)含量。這種方法也被稱為離子強(qiáng)度法或信號(hào)強(qiáng)度法。


2、基于蛋白的肽段鑒定數(shù)來進(jìn)行定量

豐度較高的蛋白酶解后,其產(chǎn)生的肽段在質(zhì)譜檢測(cè)中的可見性增強(qiáng),被檢測(cè)到的幾率也大大提高。基于這一原理,可觀察到蛋白的豐度與其酶解后產(chǎn)生的肽段鑒定數(shù)之間呈現(xiàn)出顯著的正相關(guān)關(guān)系。因此,可以通過比較不同樣品中蛋白的肽段鑒定數(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白的相對(duì)定量。


圖1 Label-free技術(shù)的實(shí)驗(yàn)過程


應(yīng)用場(chǎng)景:Label-free技術(shù)特別適用于分析復(fù)雜度較低的樣品,如Co-IP、pull-down、亞細(xì)胞組分、DARTS樣品等。在這些情況下,該技術(shù)能夠提供準(zhǔn)確且高效的dànbáizhì定量結(jié)果。此外,還常用于大樣本量的定量比較,以及對(duì)無法用biāojìdìng量實(shí)現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。


百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC色譜提供快速準(zhǔn)確的非biāojìdìng量dànbáizhì組分析服務(wù),只需要將您的實(shí)驗(yàn)?zāi)康母嬖V我們并將您的細(xì)胞寄給我們,我們會(huì)負(fù)責(zé)項(xiàng)目后續(xù)所有事宜,包括細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞標(biāo)記、蛋白提取、蛋白酶切、肽段分離、質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析、生物信息學(xué)分析,歡迎免費(fèi)咨詢。

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