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蛋白翻譯后修飾 (PTM, post-translational modification) 指的是在dànbáizhì翻譯后發(fā)生的化學(xué)修飾,這些修飾可以影響dànbáizhì的活性、穩(wěn)定性、親和力、半衰期和細(xì)胞內(nèi)的定位。
脫酰胺是指dànbáizhì在翻譯后失去酰胺基團(tuán)(通常是去除氨基酸側(cè)鏈上的酰胺基),這種改變可能影響dànbáizhì的結(jié)構(gòu)、定位、功能以及與其他分子的相互作用。例如,在神經(jīng)遞質(zhì)釋放、細(xì)胞信號傳遞等過程中,脫酰胺修飾的dànbáizhì起著調(diào)節(jié)作用。因此,準(zhǔn)確檢測和理解脫酰胺修飾對于揭示細(xì)胞機(jī)制至關(guān)重要。
圖1.dànbáizhì脫酰胺化修飾過程
傳統(tǒng)上,脫酰胺修飾的檢測是一個挑戰(zhàn),因為這種修飾往往是微妙且不穩(wěn)定的。然而,隨著質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展,特別是液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)的應(yīng)用,研究人員現(xiàn)在能夠更準(zhǔn)確地識別和定量這些修飾。通過jīngquè測量dànbáizhì或肽段的質(zhì)量變化,可以推斷出脫酰胺事件的發(fā)生。
此外,結(jié)合特定的酶切策略和富集方法,如使用特異性抗體富集脫酰胺修飾的dànbáizhì或肽段,可以提高檢測的靈敏度和特異性。這些技術(shù)的結(jié)合使得研究人員能夠在復(fù)雜的生物樣本中,如細(xì)胞提取物或體液中,探測到微量的脫酰胺修飾。
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