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蛋白質(zhì)組的差異分析

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蛋白質(zhì)組的差異分析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì組學(xué)是一門研究生物體內(nèi)所有dànbáizhì及其相互作用的學(xué)科,其中dànbáizhì組的差異分析是dànbáizhì組學(xué)的重要分支,旨在比較不同生物樣本間dànbáizhì表達(dá)的差異,以揭示生物過程和疾病機(jī)制。關(guān)于dànbáizhì組的差異性分析主要有兩種方法:一種是通過二維電泳技術(shù)篩選差異蛋白,然后進(jìn)行質(zhì)譜分析以鑒定差異dànbáizhì相關(guān)信息;另一種是wánquán基于質(zhì)譜儀的高通量測序技術(shù),通過對(duì)蛋白多肽標(biāo)記后進(jìn)行定量分析尋找出差異蛋白。


二維凝膠電泳技術(shù)(2-DE)

DE是dànbáizhì組學(xué)研究中zuì早應(yīng)用的技術(shù)。迄今為止,它仍是dànbáizhì組學(xué)研究中常用的分離手段。dànbáizhì組學(xué)研究的核心在于確保分離出的dànbáizhì具有高分辨率和可重復(fù)性,2-DE憑借它在分離上千dànbáizhì的同時(shí),還能通過顯色技術(shù)對(duì)差異表達(dá)dànbáizhì進(jìn)行定量分析,被廣泛應(yīng)用于dànbáizhì組學(xué)研究中。它的主要步驟包括:dànbáizhì樣品制備、等電聚焦(IEF)、SDS-PAGE、染色等。


圖1 2-DE一般流程


質(zhì)譜技術(shù)(MS)

在整個(gè)dànbáizhì組學(xué)研究中,準(zhǔn)確鑒定分離蛋白是zuì關(guān)鍵的步驟。質(zhì)譜鑒定技術(shù)具有高靈敏度、高通量、高時(shí)效性等特點(diǎn),在dànbáizhì組學(xué)研究中一直扮演著重要的角色。傳統(tǒng)的質(zhì)譜技術(shù)只能用于小分子量物質(zhì)的分析,但隨著科技的進(jìn)步質(zhì)譜技術(shù)也得到了長足發(fā)展,能對(duì)更加復(fù)雜的物質(zhì)進(jìn)行檢測同時(shí)自動(dòng)化程度和jīngquè度更高。常見dànbáizhì質(zhì)譜鑒定技術(shù)有:基質(zhì)輔助激光解析電離飛行質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)、電噴霧質(zhì)譜(ESI-MS)、蛋白指紋譜鑒定(PMF)、串聯(lián)質(zhì)譜法(MS/MS)、液相色譜聯(lián)用質(zhì)譜(LC-MS)等。


圖2 質(zhì)譜技術(shù)的一般流程

蛋白質(zhì)組的差異分析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

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