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液相色譜法測(cè)定人血漿中齊留通

閱讀:1208        發(fā)布時(shí)間:2016-6-17

  齊留通是一種在體內(nèi)和體外有效的選擇性5.脂氧合酶抑制劑,臨床應(yīng)用為其外消旋體。由美國(guó)公司研制開發(fā),1997年3月在美國(guó)上市。齊留通可以直接抑制5.脂氧合酶的活性,減少白三烯的合成,從而減輕支氣管內(nèi)炎癥,降低氣道反應(yīng)性,達(dá)到控制哮喘發(fā)作的治療目的。

  為研究齊留通在中國(guó)健康志愿者體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué),需要建立靈敏可靠的生物樣品的分析方法。國(guó)外有文獻(xiàn)采用HPLC-UV法測(cè)定生物樣品齊留通濃度,其定量限均可達(dá)到0.01mg/L,但血漿樣品的處理采用固相萃取。  

  血漿樣品經(jīng)液液萃取的齊留通HPLC-UV血藥濃度測(cè)定法,定量限為0.0781mg/L。該法準(zhǔn)確+靈敏且回收率高,可用于齊留通臨床血藥濃度的監(jiān)測(cè)、藥物動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究。

  檢測(cè)儀器:液相色譜儀,工作站,臺(tái)式高速離心機(jī),微量旋渦混合儀。

  色譜條件:流動(dòng)相:磷酸二氫鈉(20mmol/L,pH4.0左右)-乙腈-四氫呋喃(75:25:5)流速1.5ml/min;柱溫35℃;檢測(cè)波長(zhǎng)260nm。

  測(cè)定方法:精密稱取齊留通和乙酰苯胺適量,以甲醇分別配成1000mg/L"齊留通的對(duì)照儲(chǔ)備液和64mg/L的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液。用蒸餾水稀釋儲(chǔ)備液得到相應(yīng)濃度的工作溶液,置0℃冰箱保存待用。

  取血漿樣品0.5mL,加入乙酰苯胺溶液(64mg/L)50µL,混勻。加入二氯甲烷-無水乙醇(9:1)6mL,旋渦混勻2min,2500r/min離心5min,取下清液,置35℃水浴中氮?dú)獯蹈?。殘?jiān)眉状?水(1:1)100µL溶解,進(jìn)樣20µL,記錄色譜圖及峰面積。以齊留通的峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值定量。

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