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上海吉至生化科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ （125mg）,IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進(jìn)口 100g |
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2019-8-14 閱讀(335)
彈性蛋白酶，是由動(dòng)物的胰臟用水提取而成，也可用細(xì)菌的培養(yǎng)液在低溫下用水提取獲得。
彈性酶是由240個(gè)氨基酸組成的多肽，其CAS:39445-21-1，分子從鏈走向和空間構(gòu)造型與胰凝乳蛋白酶相似。彈性酶是有絲氨酸的蛋白酶，它存在于所有動(dòng)物的胰臟中。在人的動(dòng)脈、皮膚、血小板和白血球中也存在彈性酶活力的物質(zhì)。除此之外，一些微生物和植物中也具有彈性酶活力物質(zhì)。
彈性蛋白是一種單純蛋白、它不含輔助基和金屬離子，其活性中心取決于特異的三維結(jié)構(gòu)，當(dāng)其中發(fā)生兵役，構(gòu)型將會(huì)改變、引起失活。
彈性蛋白酶制備提取：
一般由動(dòng)物的胰臟用水提取而得，也可用細(xì)菌的培養(yǎng)液在低溫下用水提取而得。
彈性蛋白酶檢測(cè)步驟：（僅供參考）
（1）準(zhǔn)備適當(dāng)數(shù)量的包被微孔。標(biāo)準(zhǔn)品、稀釋標(biāo)本加樣量均為100μl/孔。五個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為3000、1500、750、375 和0ng/ml（以標(biāo)本稀釋液作為0 標(biāo)準(zhǔn)）。
（3）棄去封板膜。洗板： 以洗滌液注滿微孔,每次浸泡1min,共洗板5 次。
?。?）每孔加酶結(jié)合物100μl。用封板膜封板。以孵育振蕩器（ 350 ～400rpm） 室溫（18 ～28℃）反應(yīng)45min。
（5）棄去封板膜。洗板：以洗滌液注滿微孔，每次浸泡1min, 共洗板5 次。
?。?）每孔加顯色液100μl, 室溫避光反應(yīng)20min[顯色液臨用前配制。方法是：顯色劑A: 顯色劑B按體積比40: 1混合（ 如顯色劑A 400μl + 顯色劑B 10μl）,顯色液配制后30min 內(nèi)使用。
（7） 每孔加終止液100μl,充分混勻。15min 內(nèi)上酶標(biāo)儀雙波長(zhǎng)450/630nm 比色。
