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miRNA定量——艾美捷miRNA定量檢測試劑盒方案

時間:2021/4/12閱讀:214
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miRNA定量檢測是艾美捷的重點關(guān)注領(lǐng)域,通過提供如miRNA定量檢測試劑盒等精彩方案,來幫助客戶解決miRNA檢測難題。

 

一、前提概要

 

作為一種內(nèi)源性非編碼小分子RNA, miRNA在許多生命活動中起著重要作用如當(dāng)機體內(nèi)的某些miRNA表達下調(diào)時就會更容易罹患癌癥和其他一系列疾病。這一現(xiàn)象提示人們可通過對miRNA進行定量檢測來實現(xiàn)對相關(guān)疾病的早期診斷。

 

二、miRNA定量PCR技術(shù)服務(wù)

 

1.加尾法原理:

miRNA.jpg

特色:

RNA加尾和引物延伸法,樣本用量少(1μg)且不需分離miRNA。

②采用通用反轉(zhuǎn)錄引物,一次反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可用于上百個miRNA檢測。

③檢測通量高,可同時檢測數(shù)十個miRNAs

④不同末端成熟miRNA都能被加尾和反轉(zhuǎn)錄,保證定量準(zhǔn)確性。

⑤配合QIAGEN試劑盒,保證實驗可靠性,示意圖如下;

⑥擴增產(chǎn)物特異性高,通過產(chǎn)物熱解離曲線(融解曲線)判斷。

 

2.莖環(huán)法原理:

miRNA-1.jpg

 

三、microRNA純化試劑盒

 

microRNA Purification Kit【microRNA純化試劑盒 Cat#21300】基于Norgen純化柱與無苯酚配方,適用于動物細(xì)胞,組織,細(xì)菌,血液,植物組織。

特色:

25分鐘提取高質(zhì)量和純度的miRNA< 200 nt

②兩柱體系:在純化柱上消除大RNA,在第二根純化柱上捕獲microRNA

③洗脫的microRNA可用于RT-qPCR, Microarrays, Northern Blotting以及NGS等應(yīng)用.

 

miRNA-2.png

從Hela細(xì)胞中提取microRNA

 

miRNA-3.png

qPCR檢測不同品牌的提取效果

 

來源:艾美捷科技

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