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初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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DNA 5mC&5hmC甲基化水平檢測(cè)解決方案

時(shí)間:2021/4/9閱讀:1679
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關(guān)于DNA甲基化檢測(cè),有很多有趣有意思的資料,那么接下來就聊一聊DNA甲基化檢測(cè)吧~

 

DNA甲基化檢測(cè)是什么意思呢?它是指利用各種方法對(duì)腫瘤細(xì)胞DNA甲基化程度進(jìn)行測(cè)定。在惡性腫瘤的發(fā)展中,甲基化的狀態(tài)并不是一成不變,腫瘤細(xì)胞內(nèi)全基因組的低甲基化程度與疾病進(jìn)展、腫瘤大小和惡性程度都有密切的關(guān)系,DNA甲基化檢測(cè)對(duì)腫瘤惡性程度的判斷有重要意義。

 

所以DNA甲基化檢測(cè)的臨床意義,簡(jiǎn)言之就是可用于腫瘤的預(yù)測(cè)。

 

如何定量檢測(cè)某DNA的甲基化水平呢?

 

1、DNA 5mC甲基化水平檢測(cè)

以DNA甲基化5mC定量檢測(cè)試劑盒(P-1026)為例,利用抗體結(jié)合和ELISA原理方式,定量分析DNA5-mc。它可以直接檢測(cè)哺乳動(dòng)物,植物,真菌細(xì)菌,病毒,細(xì)胞,組織,血清/血漿以及其它體液中的總DNA樣本的5-mc的甲基化程度。

5mC.png

 

2、DNA 5hmC甲基化水平檢測(cè)

以BisulPlus Loci 5mC & 5hmC Detection PCR Kit(P-1067)為例,可鑒定并檢測(cè)5hmC和5mC。此試劑盒操作簡(jiǎn)便,只需三步:

步:重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化待測(cè)DNA,未甲基化C轉(zhuǎn)化為U,PCR擴(kuò)增后轉(zhuǎn)化為T,5mC不變,5hmC被轉(zhuǎn)化為5-亞甲基磺酸胞嘧啶(CMS

第二步: APOBEC脫氨酶催化亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化后的DNA,將5mC轉(zhuǎn)化為T,而CMS不變,PCR擴(kuò)增后仍為C。

5hmC.png

第三步:通過qPCR分析比較處理和未處理的DNA序列,實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA 5mC&5hmC甲基化的定量和定位檢測(cè)。

5hmC-1.png

 

關(guān)于DNA甲基化檢測(cè),就介紹DNA 5mC甲基化水平檢測(cè)和DNA 5hmC甲基化水平檢測(cè)以上兩種啦,歡迎討論并提出意見~

 

文章來源:艾美捷科技

 

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