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Plants-Basel東農：NMT發(fā)現耐寒番茄在低溫脅迫下保鉀
NMT作為生命科學底層核心技術，是建立活體創(chuàng)新科研平臺的*技術。2005年~2020年，NMT已扎根中國15年。2020年，中國NMT銷往瑞士蘇黎世大學，正式打開歐洲市場。
基本信息
主題：NMT發(fā)現耐寒番茄在低溫脅迫下保鉀能力更強
期刊：Plants-Basel
影響因子：2.762
研究使用平臺：NMT植物溫度脅迫創(chuàng)新平臺
標題：Gene Expression and K+ Uptake of Two Tomato C*rs in Response to Sub-Optimal Temperature
作者：東北農業(yè)大學吳鳳芝、高歡
檢測離子/分子指標
K+
檢測樣品
番茄根，距根尖400 μm根表上的點
次優(yōu)溫度會對番茄（Solanum lycopersicum）的生長產生不利影響，而K+在植物的耐寒性中起著重要作用。然而，番茄對次優(yōu)溫度的基因表達和K+吸收的反應仍不十分清楚。為了解決這些問題，將一個耐寒番茄栽培品種東農722（T722）和一個寒敏感栽培品種東農708（S708）分別暴露于次優(yōu)（15/10℃）和正常溫度（25/18℃）下，研究其生長、K+吸收特性和全局基因表達的差異。結果表明，與S708相比，T722表現出較低的植株生長速度、全株K+量和K+凈吸收率的降低，T722在亞優(yōu)溫度條件下還具有較高的過氧化物酶活性和較低的K+外排速率。RNA-seq分析表明，在S708和T722的根中分別發(fā)現了響應于次優(yōu)溫度的差異表達基因（DEGs）共1476個和2188個。功能分類顯示，大部分DEG參與了“植物激素信號轉導”、“苯丙醇生物合成”、“硫代謝”和 “細胞色素P450”。僅在T722中顯著上調的基因涉及“苯丙醇生物合成”和“植物激素信號轉導”途徑。此外，研究還發(fā)現，次優(yōu)溫度抑制了兩個栽培品種中編碼K+轉運體SIHAK5基因的表達，但僅在S708中降低了編碼K+通道AKT1基因的表達。總的來說，本研究結果揭示了番茄根部的低溫相應基因，為進一步研究亞低溫下番茄K+吸收的機制提供了基礎。
離子/分子流實驗處理方法
處理5 h后，在正常溫度（CK）和次優(yōu)溫度（T）下，T722根中K+內流，而在S708根中K+外排（圖1a）。在處理5 d時，正常溫度條件下，兩個品種都出現了K+內流。然而，在次優(yōu)溫度條件下，兩個品種的K+外排速率顯著增加，并且在S708中觀察到更明顯的增加（圖1a）。
圖1. 在正常溫度和次優(yōu)溫度條件下S708和T722根尖中K+的平均流速變化
處理后5 h，在正常和次優(yōu)溫度條件下，10 min的檢測期內兩個品種的K+均表現出穩(wěn)定且持續(xù)的流速（圖2b）。在處理5 d時，正常和次優(yōu)溫度條件下S708中K+的凈流速趨勢與T722中的相似。在次優(yōu)溫度條件下，10 min檢測期間，S708的K+流速從T722 pmol cm-2s-1增加到308 pmol cm-2s-1，T722從65.57 pmol cm-2s-1增加到92.62 pmol cm-2s-1（圖2b）。
圖2. 在正常溫度和次優(yōu)溫度條件下S708和T722根尖中K+的凈流速變化
其他實驗結果
次優(yōu)溫度處理5 d后顯著降低了S708的株高、植物生長率、根表面積和總根長。
次優(yōu)溫度處理會增加MDA含量和POD活性，降低全株K+含量。
次優(yōu)溫度顯著降低了兩個番茄品種的K+凈吸收率和轉運率。
T722中上調或下調的差異基因數量遠高于S708。
在次優(yōu)溫度條件下，兩個品種中編碼水通道蛋白的兩個基因均被抑制。
結論
測試液
0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.3 mM MES, pH 6.0