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腫瘤細(xì)胞如何進(jìn)行傳代？2018/5/17
腫瘤細(xì)胞是科研實(shí)驗(yàn)中常用到的細(xì)胞，當(dāng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞達(dá)到90%融合時(shí)，需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)。首先培養(yǎng)瓶的準(zhǔn)備：用纖維粘連蛋白（BPF，貨號(hào)#8248）包被培養(yǎng)瓶，包被濃度為2ug/cm2，包被時(shí)間為...
原代細(xì)胞因子中全血的標(biāo)本處理方法2018/5/15
原代細(xì)胞因子中全血的標(biāo)本處理方法分析：我們針對(duì)全血：使用肝素鈉抗凝的真空采血管采血，不易采用肝素鋰、EDTA和ACD抗凝劑，血樣在8小時(shí)內(nèi)分析，超過8小時(shí)會(huì)導(dǎo)致活性的損失，一般細(xì)胞因子陽性細(xì)胞會(huì)減少5...
細(xì)胞系如何分配任務(wù)并解決問題2018/5/10
從生物學(xué)角度了解不同類型細(xì)胞系如何一起工作是一個(gè)極大的未知數(shù)。例如，我們不知道大腦中每種細(xì)胞的數(shù)量，甚至連腦細(xì)胞的類型都還處于持續(xù)爭(zhēng)論狀態(tài)。一個(gè)恰當(dāng)?shù)睦碚摽蚣?，可以集中所有的?shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和觀點(diǎn)，共同用于理...
細(xì)胞株計(jì)數(shù)的難題與解決方案2018/5/8
細(xì)胞株和病毒的放大培養(yǎng)面臨挑戰(zhàn)。當(dāng)需要量增加千倍時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶對(duì)于工業(yè)規(guī)模是不可行的。微載體為生物反應(yīng)器中貼壁細(xì)胞的生長(zhǎng)提供了方便，微載體充當(dāng)貼壁細(xì)胞可附著的支架，允許它們?cè)鲋常锓磻?yīng)器使細(xì)胞-微...
原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法2018/4/26
原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)（一）包涵體的檢測(cè)。1.血片及白細(xì)胞涂片制備采集的抗凝血標(biāo)本盡快用血球?qū)油蒲?，待干燥后冷丙酮固?0min；或提取抗凝血中的白細(xì)胞并進(jìn)行涂片，待干燥后冷丙酮固定10min。2.染色...
原代細(xì)胞增殖生長(zhǎng)數(shù)值的步驟2018/4/17
測(cè)定原代細(xì)胞增長(zhǎng)數(shù)值常用zui簡(jiǎn)便的方法。一般過程為1.接種21孔/24孔板細(xì)胞（如用培養(yǎng)瓶時(shí)則21瓶）。2.分7組，每組3孔（或瓶），培養(yǎng)一周（7天），期間逐日檢測(cè)一組，計(jì)數(shù)。3.把7天中的細(xì)胞數(shù)值...
保持原代細(xì)胞其多能性的蛋白質(zhì)的方法2018/4/12
蛋白質(zhì)Tet能幫助原代細(xì)胞保持多能性。Zhang研究組分析了Tet1在整個(gè)小鼠胚胎干細(xì)胞基因組中的存留時(shí)間。他們發(fā)現(xiàn)Tet1采用雙管齊下的辦法維持小鼠胚胎干細(xì)胞的狀態(tài)。一方面，Tet1可對(duì)分化起重要作...
如何判斷原代細(xì)胞污染了？2018/4/10
狀態(tài)1：原代細(xì)胞培養(yǎng)液變渾濁了，經(jīng)常見到是米湯樣，黃色液體，一般認(rèn)為細(xì)菌污染。狀態(tài)2：細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)含有能動(dòng)的小黑點(diǎn)，一般認(rèn)為是黑膠蟲。狀態(tài)3：胞培養(yǎng)基清亮，但是能看到飄在培養(yǎng)液帶有毛毛的白色的菌狀物質(zhì)...
腫瘤細(xì)胞活力評(píng)估難度低2018/4/8
傳統(tǒng)的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)主要是通過顯微鏡下形態(tài)學(xué)變化以及傳代培養(yǎng)周期的變化預(yù)估細(xì)胞生長(zhǎng)生存狀態(tài)。這種主觀判斷既無法量化，也無法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。因此，目前對(duì)細(xì)胞存活質(zhì)量的判斷并沒有準(zhǔn)確、客觀的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，并且對(duì)...
原代細(xì)胞中的核糖核酸可分為哪些種類？2018/4/3
根據(jù)原代細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的不同，細(xì)胞中的RNA可分為三類：即信使（mRNA）、轉(zhuǎn)運(yùn)RNA（tRNA）和核糖體RNA（rRNA）。mRNA以DNA為模板，在RNA聚合酶的催化下，按堿基互補(bǔ)原則，從分子的5...
原代細(xì)胞培養(yǎng)新技巧2018/3/29
研究人員發(fā)現(xiàn)了一個(gè)能提高人類原代細(xì)胞，以及誘導(dǎo)多能干細(xì)胞iPS三倍數(shù)量的新方法，而且這種方法還無需一般培養(yǎng)方法中都需要的小鼠飼養(yǎng)細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞和iPS細(xì)胞由于其杰出的再生能力，吸引了眾多科學(xué)家，這些...
如何對(duì)原代細(xì)胞進(jìn)行保存和培養(yǎng)？2018/3/27
原代細(xì)胞形成的單層細(xì)胞匯合以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生成空間不足或由于細(xì)胞密度過大引起營(yíng)養(yǎng)枯竭，都將影響細(xì)胞的生長(zhǎng)，這一程序常稱為傳代或傳代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)在傳代時(shí)即為細(xì)胞系，能連續(xù)培養(yǎng)下去的...
腫瘤細(xì)胞增殖檢測(cè)：3H同位素滲入法實(shí)例2018/3/22
一、原理腫瘤細(xì)胞在有絲分裂原PHA、ConA等的刺激下，產(chǎn)生增殖反應(yīng)，DNA和RNA合成明顯增加，如在培養(yǎng)液中加入3H－胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），則可被轉(zhuǎn)化中的細(xì)胞攝入。測(cè)定標(biāo)記淋巴細(xì)胞的放射強(qiáng)度...
細(xì)胞株雙重效果2018/3/20
在細(xì)胞株早期的研究中，SohailTavazoie實(shí)驗(yàn)室已研究了一個(gè)被稱作ApoE的基因及其在抑制黑色素瘤從它的原發(fā)性部位擴(kuò)散到其他器官中的作用。他們已發(fā)現(xiàn)增加ApoE表達(dá)通過破壞癌細(xì)胞浸潤(rùn)健康組織和...
原代細(xì)胞極化過程2018/3/13
原代細(xì)胞極性對(duì)于細(xì)胞的分化、發(fā)育與功能發(fā)揮起著舉足輕重的作用，其破壞與腫瘤生成及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。細(xì)胞極性建立的共性，是一些極性蛋白復(fù)合物被特異地招募到膜區(qū)域，并發(fā)生顯著的局部聚集，然而具體機(jī)制仍未闡明。...
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