賽默飛色譜及質(zhì)譜
離子色譜與質(zhì)譜聯(lián)用高靈敏同時(shí)分析19種多組寡糖同分異構(gòu)體
檢測樣品:超純水 50%氫氧化鈉水溶液 乙腈(色譜純,F(xiàn)isherChemical公司,美國)
檢測項(xiàng)目:19種多組寡糖同分異構(gòu)體
方案概述:采用Orbitrap 靜電場軌道阱質(zhì)譜QE Focus進(jìn)行定性和定量分析,ESI源,掃描方式為Full Scan-ddMS2。結(jié)果表明:該方法對所有目標(biāo)物均有很好的保留和峰形,四組單、雙糖同分異構(gòu)體分離效果理想,質(zhì)譜相比傳統(tǒng)檢測手段具有優(yōu)異的靈敏度和高選擇性,可以很好的適用于復(fù)雜基質(zhì)中低含量寡糖的分析。
糖類化合物是生命體中最重要的三類生物分子之一,參與了生命特別是多細(xì)胞生命的全部時(shí)間和空間過程,在細(xì)胞之間的識(shí)別和互相作用、癌癥的發(fā)生和轉(zhuǎn)移、機(jī)體的免疫和免疫抑制、細(xì)胞凝集等生物過程中都起著關(guān)鍵作用。隨著現(xiàn)代分離分析技術(shù)和分子生物學(xué),特別是細(xì)胞生物學(xué)的飛速進(jìn)步,不斷揭示出糖類化合物的各種結(jié)構(gòu)和諸多生物學(xué)功能。要了解復(fù)雜的生命現(xiàn)象,就必須對糖的結(jié)構(gòu)和功能有更深入的了解,糖類化合物的分離分析工作則是糖類結(jié)構(gòu)功能學(xué)研究的基礎(chǔ)。
糖類化合物的分離分析是糖學(xué)研究的熱點(diǎn)之一,同時(shí)具有很大的挑戰(zhàn)性,主要是由于糖類化合物結(jié)構(gòu)的“微觀不均一性”,存在大量的位置異構(gòu)體和差向異構(gòu)體,使其分離極其困難。由于寡糖分子的極性非常大,無論在親水型還是正向色譜柱,保留表現(xiàn)都不是很理想,色譜峰形差強(qiáng)人意,并且有較多同分異構(gòu)體存在時(shí),不能實(shí)現(xiàn)較好分離?;谀繕?biāo)物的化學(xué)特征,離子色譜對糖類物質(zhì)有很好的保留和分離效果,相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道已有很多,一些糖測定標(biāo)準(zhǔn)方法也是使用離子色譜法。相較于傳統(tǒng)的檢測手段,質(zhì)譜具有高靈敏度、高通量和高選擇性等優(yōu)勢,被認(rèn)為是化合物定量的黃金標(biāo)準(zhǔn),也是在糖類物質(zhì)檢測中的重要分析方法之一。
因此離子色譜和質(zhì)譜聯(lián)用進(jìn)行糖類等強(qiáng)極性化合物的分析具有無法比較的優(yōu)勢,可以解決諸多難題,目前尚屬于較新的應(yīng)用技術(shù),本實(shí)驗(yàn)則建立了基于IC-QE Focus有效分離分析19種單、雙糖的方法,為食品科學(xué)、生物工程、生物樣品中單、雙糖的分離分析提供可靠、前沿的分析方法。
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