來源與篩選：該細(xì)胞系以 CHO-K1 為親本，通過亞硝ji胍化學(xué)誘變結(jié)合表觀遺傳表型篩選獲得。經(jīng)多輪單克隆純化，挑選出第 9 株組蛋白修飾譜改變zui顯著的克?。ā癑J-9” 標(biāo)識誘變批次與克隆編號）。篩選過程未引入基因編輯，僅通過檢測組蛋白修飾整體水平（如乙酰化、甲基化總含量）確定陽性克隆，全基因組測序顯示與親本相似度＞99.5%，確保遺傳背景的穩(wěn)定性。

形態(tài)與增殖：體外培養(yǎng)呈上皮樣形態(tài)，貼壁生長時細(xì)胞鋪展均勻，較野生型 CHO 稍大且邊界清晰；因染色質(zhì)功能異常，懸浮培養(yǎng)易聚集成團（直徑 50-100μm），故主要以貼壁方式培養(yǎng)。37℃、5% CO?條件下，增殖周期約 36-42 小時，較野生型延長 6-8 小時，適應(yīng)含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基，傳代 60 次以上組蛋白修飾異常表型穩(wěn)定（整體波動＜8%），凍存復(fù)蘇后存活率超 84%。

功能特征：核心優(yōu)勢在于組蛋白修飾的廣泛性改變：整體組蛋白乙?；捷^野生型升高 25%，甲基化水平降低 18%，導(dǎo)致全基因組染色質(zhì)開放度顯著變化（ATAC-seq 顯示 18% 的基因組區(qū)域可及性改變），其中增強子區(qū)域開放度差異最tu出（上調(diào)區(qū)域占 12%，下調(diào)區(qū)域占 15%）。ChIP-seq 驗證顯示，多個組蛋白修飾（如 H3K4me3、H3K27ac）的分布模式改變，使涉及細(xì)胞代謝、應(yīng)激響應(yīng)的 843 個基因表達量出現(xiàn) 2-5 倍差異，模擬了復(fù)雜表觀遺傳擾動下的基因調(diào)控表型。

貼壁培養(yǎng)操作：

組蛋白修飾檢測：

凍存流程：取對數(shù)生長期細(xì)胞，1000rpm 離心 5 分鐘，用凍存液（70% wan全培養(yǎng)基 + 20% 胎牛血清 + 10% DMSO）重懸至 5×10?個 /mL，分裝至凍存管，程序降溫盒 - 80℃過夜，次日轉(zhuǎn)移至液氮保存，保存期可達 5 年以上，復(fù)蘇后需傳代 2-3 次再進行表觀遺傳相關(guān)實驗（確保修飾狀態(tài)穩(wěn)定）。

優(yōu)勢：組蛋白修飾改變范圍廣，可模擬復(fù)雜表觀遺傳擾動；表型穩(wěn)定，傳代 60 次整體修飾水平波動＜8%；無外源基因整合，保留天然表觀遺傳互作網(wǎng)絡(luò)；適合多靶點藥物篩選，檢測效率較單一修飾模型提升 40%。

局限性：修飾改變的復(fù)雜性使單一調(diào)控機制解析難度增加（需結(jié)合單修飾模型驗證）；貼壁依賴性強，懸浮培養(yǎng)會導(dǎo)致修飾譜改變（約 12%）；部分實驗需配套多組學(xué)數(shù)據(jù)分析，技術(shù)門檻較高。