來源與構(gòu)建：該細胞系以 CHO-K1 細胞為親本，通過慢病毒載體介導將人 HRH1 基因?qū)爰毎蚪M，經(jīng)嘌呤霉素抗性篩選及單克隆純化獲得穩(wěn)定株，“HRH1” 明確標識其表達的靶受體，與普通 CHO 細胞形成功能區(qū)分。構(gòu)建過程中采用 CMV 啟動子驅(qū)動表達，結(jié)合信號肽優(yōu)化序列，使 90% 以上的 HRH1 定位于細胞膜，確保受體與配體的高效結(jié)合。

形態(tài)與增殖：體外培養(yǎng)呈典型上皮樣形態(tài)，貼壁生長，細胞呈多邊形，排列規(guī)則，邊界清晰，核質(zhì)比正常，形態(tài)與親本 CHO-K1 細胞一致。在 37℃、5% CO?條件下，增殖穩(wěn)定，傳代周期約 24-30 小時，可適應(yīng)含 10% 胎牛血清的 F12K 培養(yǎng)基，傳代 60 次以上仍能維持 HRH1 高表達（表達量為親本細胞的 25-35 倍），受體活性無明顯衰減，顯著優(yōu)于瞬時轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。

表達特征：HRH1 為 G 蛋白偶聯(lián)受體（GPCR），膜表達量達（1.5-2.0）×10?分子 / 細胞（流式細胞術(shù)檢測），對組胺的親和力高（解離常數(shù) Kd≈2×10?? M）。激活后可快速啟動下游信號通路：通過 Gq 蛋白介導磷脂酶 C（PLC）激活，使胞內(nèi) IP3 水平升高，觸發(fā)鈣離子釋放（組胺刺激后胞內(nèi)鈣濃度峰值提升 3-5 倍），同時激活 MAPK/ERK 通路，功能活性接近人源組織中的天然受體。

優(yōu)勢：HRH1 表達穩(wěn)定，長期傳代后功能活性波動＜10%，實驗重復性優(yōu)于原代肥大細胞；遺傳背景清晰，與 CHO-K1 細胞同源性高，便于通過親本對照排除非特異性效應(yīng)；受體信號通路完整，可模擬體內(nèi)組胺反應(yīng)的級聯(lián)過程，功能更接近生理狀態(tài)；培養(yǎng)條件簡單，兼容貼壁與懸浮培養(yǎng)，適合高通量藥物篩選。

局限性：作為卵巢來源細胞，缺乏肥大細胞、內(nèi)皮細胞等 HRH1 主要表達細胞的微環(huán)境，部分組織特異性調(diào)控機制（如細胞因子對受體的調(diào)節(jié)）無法wan全模擬；倉鼠與人類的 G 蛋白亞型存在細微差異，可能導致部分信號傳導效率與人體存在偏差，需結(jié)合人源細胞驗證；高表達受體可能導致配體敏感性過高，實驗需嚴格控制組胺濃度。

培養(yǎng)條件：常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 F12K 培養(yǎng)基，添加 2μg/mL 嘌呤霉素維持抗性篩選，37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中生長良好。傳代時控制融合度在 70%-80%，采用溫和方法分離細胞，避免機械損傷影響受體膜定位。進行功能實驗前，建議用無血清培養(yǎng)基饑餓處理 16-24 小時，減少血清成分對 GPCR 信號的干擾。

質(zhì)控與安全：定期通過流式細胞術(shù)檢測 HRH1 膜表達量，Western blot 驗證蛋白完整性；STR 鑒定確保細胞純度，支原體檢測需為陰性。凍存使用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，液氮保存可維持活性 5 年以上，復蘇后傳代 2 次待狀態(tài)穩(wěn)定后再用于實驗，保證結(jié)果可靠性。