BY-0196 786-O 786-0人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0196
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- 更新時(shí)間 2025/7/17 16:19:41
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786-O [786-0]人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
786-O [786-0]人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞系是研究腎透明細(xì)胞癌的經(jīng)典模型，以 VHL 基因缺失、缺氧適應(yīng)能力強(qiáng)及典型的透明細(xì)胞表型為核心特征，在腎癌發(fā)生機(jī)制、血管生成及靶向治療研究中應(yīng)用廣泛，為解析腎透明細(xì)胞癌的du特生物學(xué)特性提供了可靠實(shí)驗(yàn)工具。
來源與背景：該細(xì)胞系于 1985 年從 58 歲男性患者的腎透明細(xì)胞腺癌組織中分離建立，屬于 VHL 基因缺失型腎癌細(xì)胞系。與其他腎癌亞型細(xì)胞系相比，其源自典型的腎透明細(xì)胞癌，更能反映該亞型（占腎癌的 70%-80%）的生物學(xué)特性，尤其適合研究 VHL 基因功能缺失相關(guān)的癌變機(jī)制。作為首ge被證實(shí)存在 VHL 基因純合缺失的腎癌細(xì)胞系，長期傳代后仍穩(wěn)定保持該特征及透明細(xì)胞表型，填bu了 VHL 驅(qū)動型腎癌研究模型的空白，至今仍是腎癌靶向藥物研發(fā)的重要參照。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈現(xiàn)典型的透明細(xì)胞特征，貼壁生長且排列緊密，細(xì)胞呈多邊形，細(xì)胞質(zhì)豐富且透明，富含脂質(zhì)和糖原顆粒，細(xì)胞核小而圓，核仁不明顯，核質(zhì)比約 1:2，具有腎透明細(xì)胞癌的典型形態(tài)。核心特性體現(xiàn)為VHL 基因缺失，攜帶 VHL 基因純合缺失，導(dǎo)致 HIF-1α、HIF-2α 等缺氧誘導(dǎo)因子持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)，該特征與約 60% 的腎透明細(xì)胞癌患者一致，是研究缺氧信號通路異常激活的理想模型；強(qiáng)血管生成能力，分泌的 VEGF 水平是正常腎上皮細(xì)胞的 10-15 倍，裸鼠皮下接種后腫瘤組織內(nèi)血管密度顯著高于其他腎癌模型，體現(xiàn)了腎透明細(xì)胞癌富血管的典型特征；增殖與侵襲能力，體外培養(yǎng)倍增時(shí)間約 36-48 小時(shí)，克隆形成率約 50%，裸鼠皮下接種成瘤率 100%，Transwell 實(shí)驗(yàn)中穿透基質(zhì)膜的細(xì)胞數(shù)雖低于高侵襲性腫瘤細(xì)胞系，但仍顯著高于正常腎細(xì)胞。傳代時(shí)采用常規(guī)消化液處理，因貼壁中等，需消化 2-4 分鐘，傳代比例 1:3-1:5，連續(xù)傳代 50 次后仍保持 VHL 缺失及透明細(xì)胞表型。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 抗菌混合液以維持細(xì)胞活性。培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度，每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基，細(xì)胞密度維持在 20%-70% 之間，過度匯合會導(dǎo)致細(xì)胞透明性下降及 HIF-1α 表達(dá)上調(diào) 15%-20%。與其他腎癌細(xì)胞系相比，其對缺氧環(huán)境耐受性更強(qiáng)，在 1% 氧濃度下仍能保持 80% 以上的活性，傳代時(shí)消化后需用含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)，凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清，復(fù)蘇后存活率可達(dá) 85% 以上，24 小時(shí)貼壁率超過 90%，細(xì)胞功能恢復(fù)正常。
檢測鑒定：經(jīng)微生物篩查，無支原體、細(xì)菌、真菌及常見病毒污染，符合實(shí)驗(yàn)細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測顯示碳酸酐酶 IX（CAIX）、CD10 呈陽性表達(dá)，這兩種標(biāo)志物在腎透明細(xì)胞癌中特異性高，符合該亞型的分子表型?；驕y序證實(shí) VHL 基因純合缺失，Western blot 顯示 HIF-1α、HIF-2α 蛋白持續(xù)高表達(dá)。染色體核型分析呈現(xiàn)亞三倍體核型，存在 3 號染色體短臂缺失（涉及 VHL 基因所在區(qū)域）等異常，與 70% 的腎透明細(xì)胞癌患者遺傳學(xué)改變吻合。
應(yīng)用領(lǐng)域：在機(jī)制研究中，該細(xì)胞系被廣泛用于揭示 VHL-HIF 通路異常在腎癌發(fā)生中的作用，研究發(fā)現(xiàn) HIF-2α 通過激活下游 Cyclin D1、VEGF 等靶基因促進(jìn)細(xì)胞增殖和血管生成，為理解 “缺氧信號 - 增殖 - 血管生成” 的協(xié)同作用提供了依據(jù)。在靶向治療研究中，是 VHL-HIF 通路抑制劑及抗血管生成藥物（如舒尼替尼）療效評估的常用模型，其對舒尼替尼的敏感性較高，IC50 值約為 1μM，通過該細(xì)胞系發(fā)現(xiàn)聯(lián)合 HIF-2α 抑制劑可顯著提高治療效果，協(xié)同指數(shù)達(dá) 0.5。在藥物篩選領(lǐng)域，因其典型的 VHL 缺失特征，被用于篩選針對該通路的新型藥物，近期研究發(fā)現(xiàn)新型 E3 泛素連接酶激動劑可恢復(fù) VHL 功能，降低 HIF 表達(dá)，抑制細(xì)胞增殖。此外，該細(xì)胞系可用于研究腫瘤微環(huán)境的影響，與腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)后，其侵襲能力提升 30%，證實(shí)微環(huán)境在腎癌進(jìn)展中的促進(jìn)作用，為聯(lián)合靶向腫瘤微環(huán)境提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
與其他腎癌細(xì)胞系相比，786-O 細(xì)胞系的優(yōu)勢在于其典型的 VHL 缺失、透明細(xì)胞表型及富血管特征，能更真實(shí)地模擬大多數(shù)腎透明細(xì)胞癌的生物學(xué)特性，為該亞型腎癌的發(fā)病機(jī)制研究及靶向藥物研發(fā)提供了不可替代的實(shí)驗(yàn)工具，持續(xù)推動腎透明細(xì)胞癌精準(zhǔn)診療的發(fā)展。
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