BY-1227 CCC-REPF-1大鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1227
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- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/24 11:25:34
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CCC-REPF-1大鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
CCC-REPF-1大鼠胚胎成纖維細(xì)胞系作為源自大鼠胚胎間充質(zhì)組織的正常成纖維細(xì)胞模型，因保留胚胎成纖維細(xì)胞的增殖分化潛能及營養(yǎng)支持功能，在胚胎發(fā)育調(diào)控、組織修復(fù)機制及成纖維細(xì)胞相關(guān)疾病研究中具有重要價值，成為探究胚胎成纖維細(xì)胞生理功能及相關(guān)生命活動的關(guān)鍵實驗工具。
細(xì)胞特性與來源背景：該細(xì)胞系源自大鼠 14-16 天胚胎的軀干間充質(zhì)組織，經(jīng)原代培養(yǎng)和純化獲得。細(xì)胞形態(tài)呈長梭形，胞體大小均勻（長度約 80-120μm，寬度約 15-20μm），胞質(zhì)呈弱嗜堿性，可見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，約 15% 細(xì)胞可見分支狀突起，細(xì)胞核呈長橢圓形，位于細(xì)胞中央，核仁小而清晰。生長方式為貼壁生長，呈平行排列或漩渦狀分布，具有接觸抑制現(xiàn)象，傳代后 24 小時貼壁率達(dá) 94%。核心參數(shù)表現(xiàn)出胚胎成纖維細(xì)胞特征：倍增時間約 48 小時，連續(xù)傳代 25 次后仍保持穩(wěn)定的生物學(xué)特性；表面標(biāo)志物表達(dá)du特，波形蛋白（vimentin）陽性率達(dá) 98%，成纖維細(xì)胞特異性蛋白 1（FSP1）陽性率 95%，血小板源性生長因子受體 α（PDGFRα）陽性率 92%；具有正常的二倍體核型（染色體數(shù) 42 條），無染色體畸變；可分泌 Ⅰ 型和 Ⅲ 型膠原蛋白，基礎(chǔ)分泌量分別達(dá) 85ng/mL 和 60ng/mL，纖維連接蛋白分泌量達(dá) 55ng/mL；具有一定的收縮能力，膠原凝膠收縮率達(dá) 40%；無微生物污染，細(xì)胞純度達(dá) 97%，保障實驗結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價值：在胚胎發(fā)育研究中，CCC-REPF-1 細(xì)胞與胚胎干細(xì)胞共培養(yǎng)時，可促進(jìn)胚胎干細(xì)胞向中胚層分化，中胚層標(biāo)志物 Brachyury 表達(dá)量增加 4.5 倍，細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白網(wǎng)絡(luò)為胚胎干細(xì)胞提供了適宜的微環(huán)境，可模擬胚胎發(fā)育過程中間充質(zhì)細(xì)胞對干細(xì)胞分化的調(diào)控作用，為解析胚胎組織形成機制提供理想模型。
組織修復(fù)研究方面，該細(xì)胞經(jīng)腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）處理后，遷移速率增加 55%，基質(zhì)金屬蛋白酶 - 2（MMP-2）活性提升 60%，趨化因子 CXCL12 分泌量增加 3.8 倍，可模擬創(chuàng)傷后成纖維細(xì)胞向損傷部位聚集的過程，適用于探究胚胎期組織修復(fù)的分子機制。
成纖維細(xì)胞功能異常研究領(lǐng)域，該細(xì)胞經(jīng)轉(zhuǎn)化生長因子 -β1（TGF-β1）處理后，α- 平滑肌肌動蛋白（α-SMA）陽性率提升 50%，膠原蛋白分泌量增加 3 倍，細(xì)胞收縮能力增強 65%，能很好地模擬纖維化過程中成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，為探究瘢痕形成、器官纖維化等疾病的發(fā)病機制提供實驗基礎(chǔ)。此外，該細(xì)胞作為飼養(yǎng)層細(xì)胞時，可使胚胎干細(xì)胞的未分化標(biāo)志物 Oct4 表達(dá)量維持 85% 以上達(dá) 15 代，為干細(xì)胞培養(yǎng)體系的建立提供支持。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培養(yǎng)基，添加 2mM 谷an酰胺、1mM 丙酮酸鈉及 1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 2 天更換一次，以維持細(xì)胞的高增殖活性。傳代時，用 PBS 沖洗細(xì)胞 2 次，加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 混合液，37℃孵育 5-7 分鐘，待細(xì)胞變圓后輕輕吹打使細(xì)胞脫落，傳代比例為 1:5-1:8，每 3-4 天傳代一次，避免細(xì)胞過度密集導(dǎo)致形態(tài)改變。
凍存液采用培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，細(xì)胞濃度調(diào)整為 5×10?個 /ml，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復(fù)蘇存活率達(dá) 88% 以上，2-3 代內(nèi)可恢復(fù)正常的生長和分泌功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養(yǎng)瓶活細(xì)胞運輸，收到細(xì)胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時，更換培養(yǎng)基后觀察細(xì)胞形態(tài)，確認(rèn)無異常漂浮物且排列規(guī)則后進(jìn)行實驗。該細(xì)胞系僅限科研使用，操作時需避免頻繁更換血清批次，以防影響細(xì)胞增殖穩(wěn)定性。
CCC-REPF-1 大鼠胚胎成纖維細(xì)胞系以其穩(wěn)定的胚胎成纖維細(xì)胞特性、強大的增殖能力及多樣的生理功能，在胚胎發(fā)育研究、組織修復(fù)機制探索及干細(xì)胞培養(yǎng)支持等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用，為揭示成纖維細(xì)胞在生命活動中的調(diào)控機制和開發(fā)相關(guān)疾病的治療策略提供了可靠的細(xì)胞模型。
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