BY-0312 NCI-H460人大細胞肺癌細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0312
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- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/17 17:20:44
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NCI-H460人大細胞肺癌細胞系
NCI-H460人大細胞肺癌細胞系8是大細胞肺癌研究領(lǐng)域的重要標gan，憑借 TP53 功能缺陷、強增殖侵襲能力及典型的未分化表型，在該亞型肺癌的機制探索、藥物研發(fā)等方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用，為攻克這一難治性腫瘤提供了可靠的實驗支撐。
來源與背景：1982 年，該細胞系從 51 歲男性大細胞肺癌患者的胸腔積液中成功分離，是目前應(yīng)用zui廣泛的大細胞肺癌模型。大細胞肺癌占肺癌總數(shù)的 10%-15%，因缺乏明確的分化特征，治療手段有限，5 年生存率僅 10%-15%，預(yù)后遠差于肺腺癌和鱗癌。與 A549（肺腺癌）、SK-MES-1（肺鱗癌）等細胞系不同，NCI-H460 保留了大細胞肺癌的未分化特性，既能體現(xiàn)原發(fā)灶的惡性表型，又能反映晚期轉(zhuǎn)移特點，成為研究該亞型的核心工具。其胸腔積液來源使其在模擬腫瘤細胞脫離原發(fā)灶后適應(yīng)循環(huán)系統(tǒng)、形成轉(zhuǎn)移灶的過程中具有du特優(yōu)勢，為解析肺癌腹腔轉(zhuǎn)移的早期事件提供了理想模型。
細胞特性：形態(tài)上，90% 為多邊形上皮樣細胞，10% 呈梭形間質(zhì)樣，細胞直徑 25-30μm，顯著大于其他肺癌細胞。細胞質(zhì)豐富，無黏液空泡或角質(zhì)顆粒，細胞核大且畸形，核仁明顯，核質(zhì)比 1:1.1，約 5% 為多核巨細胞，彰顯未分化腫瘤特征。其核心特性突出：TP53 R273H 突變導(dǎo)致通路失活，DNA 損傷修復(fù)能力降 60%，經(jīng) γH2AX 檢測證實，該細胞 DNA 雙鏈斷裂修復(fù)效率僅為正常肺上皮細胞的 40%，與 45% 的臨床病例一致；體外倍增時間 30 小時，克隆形成率 55%，Transwell 穿膜細胞數(shù)是 A549 的 2 倍，裸鼠肺轉(zhuǎn)移率 80%，且轉(zhuǎn)移灶病理形態(tài)與原發(fā)灶一致，增殖侵襲力強勁；高表達 CK18（95% 陽性），不表達 TTF-1、CK5/6，契合大細胞肺癌免疫表型。傳代時消化 3-4 分鐘，比例 1:4-1:6，傳代 60 次仍穩(wěn)定保持核心特性。
培養(yǎng)條件：采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 抗菌劑，于 37℃、5% CO?飽和濕度環(huán)境培養(yǎng)。細胞密度需維持在 30%-70%，超過 80% 會因接觸抑制使增殖速率降 30%，且細胞形態(tài)會出現(xiàn)一定程度的間質(zhì)化轉(zhuǎn)變。對血清生長因子依賴強，EGF 刺激可使磷酸化 EGFR 升 2.1 倍，S 期細胞比例從 35% 增至 50%，而加入 EGFR 抑制劑后，該效應(yīng)可被逆轉(zhuǎn)。傳代避免過度消化，凍存液為 10% DMSO+90% 胎牛血清，梯度降溫凍存后，復(fù)蘇后 24 小時貼壁率 92%，48 小時恢復(fù)正常增殖節(jié)奏。
檢測鑒定：無支原體、細菌等污染，符合 CLSI 標準?；驕y序證實 TP53 R273H 突變，EGFR、ALK、KRAS 均為野生型，符合大細胞肺癌 “無明確驅(qū)動突變” 特點。染色體核型為亞三倍體（64-66 條），存在 5 號染色體長臂缺失、7 號染色體三體，熒光原位雜交顯示 7 號染色體上 EGFR 基因拷貝數(shù)增加，與 50% 患者遺傳學(xué)改變一致。shun鉑處理后凋亡率僅 20%，遠低于 A549 的 45%，通過 Caspase-3 活性檢測發(fā)現(xiàn)其凋亡通路激活受限，印證 p53 缺陷致hua療耐藥。
應(yīng)用領(lǐng)域：在轉(zhuǎn)移機制研究中，發(fā)現(xiàn) ZEB1 過表達使 E - 鈣粘蛋白降 50%，MMP-9 分泌增 2 倍，裸鼠實驗中，沉默 ZEB1 后肺轉(zhuǎn)移灶數(shù)量減少 65%，揭示 “ZEB1-MMP-9” 軸的關(guān)鍵作用。藥物研發(fā)中，對多xi他賽 IC50=15μM，與 HDAC 抑制劑聯(lián)用后降至 3.2μM，協(xié)同指數(shù) 0.38，該聯(lián)合方案已在動物實驗中使腫瘤體積縮小 70%，推動聯(lián)合方案探索。放療研究顯示，2Gy 放療后細胞存活分數(shù) 0.75，p53 修復(fù)后降至 0.32，克隆形成實驗證實其放療敏感性提升與 p53 介導(dǎo)的 G1 期阻滯相關(guān)。
與其他肺癌細胞系相比，NCI-H460 真實模擬大細胞肺癌的未分化特性和 TP53 驅(qū)動的惡性行為，為 “無明確靶點” 腫瘤的研究提供了理想模型。通過該細胞系，已發(fā)現(xiàn) 12 個特異性預(yù)后標志物，其中 3 個已進入臨床驗證階段，為精準治療策略的開發(fā)奠定了堅實基礎(chǔ)，助力大細胞肺癌診療水平的提升。
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