A2780人卵巢癌細(xì)胞系
A2780人卵巢癌細(xì)胞系源自人體卵巢癌組織,是研究卵巢癌發(fā)病機(jī)制、開發(fā)新型治療方案及篩選抗癌藥物的重要實(shí)驗(yàn)?zāi)P?。在顯微鏡下,A2780 細(xì)胞呈現(xiàn)出典型的癌細(xì)胞形態(tài)特征,多為不規(guī)則多邊形,以貼壁方式生長,細(xì)胞間連接松散,常堆疊形成多層細(xì)胞集落。細(xì)胞胞質(zhì)豐富,經(jīng)染色后呈嗜酸性,內(nèi)部細(xì)胞器異常發(fā)達(dá),線粒體數(shù)量增多且形態(tài)腫脹,為癌細(xì)胞的快速增殖提供充足能量;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體擴(kuò)張,參與合成和分泌大量促癌蛋白及細(xì)胞因子。細(xì)胞核大而畸形,核質(zhì)比例嚴(yán)重失調(diào),核仁明顯且數(shù)目增多,異常核分裂象頻繁出現(xiàn),這些形態(tài)學(xué)表現(xiàn)充分體現(xiàn)了其惡性腫瘤細(xì)胞的本質(zhì)。
A2780 細(xì)胞具有復(fù)雜且du特的生物學(xué)特性。在細(xì)胞增殖調(diào)控方面,其細(xì)胞周期蛋白 Cyclin D1、CDK4 表達(dá)顯著上調(diào),驅(qū)動(dòng)細(xì)胞周期加速運(yùn)轉(zhuǎn),在適宜培養(yǎng)條件下,細(xì)胞倍增時(shí)間約為 24 - 30 小時(shí)。細(xì)胞內(nèi)的 PI3K/AKT、MAPK 等信號(hào)通路異常激活,PI3K/AKT 通路激活后,AKT 蛋白磷酸化水平顯著升高,通過抑制促凋亡蛋白 Bad、激活 mTORC1,增強(qiáng)細(xì)胞代謝活性并抑制細(xì)胞凋亡,從而促進(jìn)細(xì)胞存活與增殖;MAPK 通路中的 BRAF、MEK、ERK 蛋白組成的級(jí)聯(lián)反應(yīng)持續(xù)活躍,持續(xù)激活下游轉(zhuǎn)錄因子,調(diào)控細(xì)胞周期相關(guān)基因表達(dá),促使細(xì)胞快速通過 G1 期進(jìn)入 S 期。在侵襲轉(zhuǎn)移能力上,A2780 細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP - 2 和 MMP - 9 的能力較強(qiáng),這些蛋白酶可降解細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白、層粘連蛋白等成分,破壞基底膜完整性;細(xì)胞表面整合素家族蛋白和上皮 - 間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)蛋白表達(dá)上調(diào),增強(qiáng)細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的黏附、脫離能力,以及細(xì)胞的遷移能力,助力癌細(xì)胞突破卵巢組織屏障、發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。此外,A2780 細(xì)胞對(duì)傳統(tǒng)hua療藥物如shun鉑、紫shan醇存在一定耐藥性,耐藥相關(guān)蛋白如 P - gp、MRP1 在細(xì)胞表面高表達(dá),導(dǎo)致藥物外排增加,這一特性使其成為研究卵巢癌耐藥機(jī)制的理想樣本。
培養(yǎng) A2780 人卵巢癌細(xì)胞系需遵循嚴(yán)格的操作規(guī)范。常用含 10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)體系,胎牛血清中豐富的生長因子、激素和營養(yǎng)物質(zhì),能夠充分滿足細(xì)胞生長和代謝需求;添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液,防止細(xì)菌污染。將細(xì)胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中,模擬人體生理環(huán)境,維持細(xì)胞內(nèi)酸堿平衡與酶活性。當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí),使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液進(jìn)行消化傳代,消化過程需在顯微鏡下實(shí)時(shí)觀察,避免過度消化損傷細(xì)胞,傳代比例一般控制在 1:3 - 1:5 。凍存時(shí),采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液,遵循程序降溫原則,先于 - 80℃冰箱過夜,再轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存。在培養(yǎng)過程中,還需定期通過臺(tái)盼藍(lán)染色檢測細(xì)胞活力、利用 Western blot 檢測 CA125、OVCAR 等標(biāo)志物表達(dá),確保細(xì)胞特性穩(wěn)定,為實(shí)驗(yàn)提供可靠的細(xì)胞模型。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,A2780 細(xì)胞系發(fā)揮著不可替代的作用。在卵巢癌發(fā)病機(jī)制研究中,科研人員借助該細(xì)胞系深入探究 BRCA1、BRCA2 等基因突變與卵巢癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)聯(lián),發(fā)現(xiàn) BRCA1 基因突變可協(xié)同激活 PI3K/AKT 通路,加速卵巢癌細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化。在藥物研發(fā)方面,A2780 細(xì)胞是篩選抗卵巢癌藥物的重要模型,新型的 PARP 抑制劑在該細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)中,能夠顯著抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;針對(duì)其耐藥特性開展的聯(lián)合用藥研究,如shun鉑聯(lián)合 P - gp 抑制劑,在 A2780 細(xì)胞上取得了良好的協(xié)同抗腫瘤效果,為臨床卵巢癌治療提供了新策略。此外,A2780 細(xì)胞還用于評(píng)估卵巢癌的新型治療方案,如納米顆粒載藥系統(tǒng)、免疫細(xì)胞治療策略等,持續(xù)推動(dòng)卵巢癌診療技術(shù)的發(fā)展。
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