Romas人淋巴瘤細(xì)胞系
Romas人淋巴瘤細(xì)胞系源自淋巴瘤患者病變組織,是研究淋巴瘤發(fā)生發(fā)展、探索有效治療策略的重要工具。在顯微鏡下觀察,Romas 細(xì)胞呈現(xiàn)典型的淋巴細(xì)胞形態(tài),多為圓形或類圓形,細(xì)胞大小相對均一,以懸浮狀態(tài)生長于培養(yǎng)液中,常單個散在分布,偶爾聚集成小細(xì)胞簇。細(xì)胞胞質(zhì)較少,經(jīng)染色后呈弱嗜堿性,胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器以線粒體、核糖體等為主,滿足細(xì)胞基本代謝需求;細(xì)胞核大且圓,占據(jù)細(xì)胞大部分體積,染色質(zhì)致密,核仁明顯,部分細(xì)胞可見異常核分裂象,直觀展現(xiàn)出其惡性腫瘤細(xì)胞特征。
Romas 細(xì)胞具有獨(dú)te且顯著的生物學(xué)特性。其增殖能力異常旺盛,細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)基因表達(dá)失調(diào),Cyclin D1、CDK4 等細(xì)胞周期蛋白及其依賴性激酶高表達(dá),促使細(xì)胞周期從 G1 期快速進(jìn)入 S 期,在適宜培養(yǎng)條件下,細(xì)胞倍增時間約為 24 - 36 小時,遠(yuǎn)超正常淋巴細(xì)胞的增殖速度。同時,Romas 細(xì)胞內(nèi) JAK/STAT、PI3K/AKT 等信號通路持續(xù)激活,JAK/STAT 通路激活后,增強(qiáng)細(xì)胞對細(xì)胞因子的響應(yīng),促進(jìn)細(xì)胞增殖與存活;PI3K/AKT 通路的異?;罨瘎t抑制細(xì)胞凋亡,進(jìn)一步強(qiáng)化細(xì)胞的代謝與增殖能力。此外,Romas 細(xì)胞表面抗原表達(dá)發(fā)生改變,除了表達(dá)淋巴細(xì)胞常見標(biāo)志物如 CD2、CD3 外,還表達(dá)一些腫瘤特異性抗原,這些抗原變化與腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸密切相關(guān),使得 Romas 細(xì)胞能夠逃避機(jī)體免疫系統(tǒng)的監(jiān)視和清除,在體內(nèi)持續(xù)增殖擴(kuò)散。值得注意的是,Romas 細(xì)胞對部分hua療藥物存在耐藥性,這一特性為研究淋巴瘤耐藥機(jī)制提供了良好的實(shí)驗材料。
培養(yǎng) Romas 人淋巴瘤細(xì)胞系需嚴(yán)格遵循特定的操作規(guī)范。常用含 10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)體系,胎牛血清中豐富的生長因子、激素、氨基酸等物質(zhì),能夠充分滿足細(xì)胞生長和代謝需求;添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液,有效防止細(xì)菌污染。將細(xì)胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中,模擬人體生理環(huán)境,維持細(xì)胞內(nèi)酸堿平衡與酶活性。由于 Romas 細(xì)胞為懸浮生長,當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 5×10? - 1×10?個 /mL 時,需及時進(jìn)行傳代,傳代方式為離心后更換新鮮培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,傳代比例根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)控制在 1:3 - 1:5 。凍存時,采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液,按照程序降溫原則,先在 - 80℃冰箱過夜,再轉(zhuǎn)入液氮中長期保存。在培養(yǎng)過程中,還需定期檢測細(xì)胞的生長狀態(tài)、抗原表達(dá)情況,確保細(xì)胞特性穩(wěn)定,為實(shí)驗提供可靠的細(xì)胞模型。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,Romas 細(xì)胞系發(fā)揮著不可替代的作用。在淋巴瘤發(fā)病機(jī)制研究中,科研人員借助基因編輯技術(shù),在 Romas 細(xì)胞中深入探究相關(guān)基因突變與淋巴瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)聯(lián),發(fā)現(xiàn)某些關(guān)鍵基因的突變可激活異常信號通路,推動正常淋巴細(xì)胞向淋巴瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)化,為揭示淋巴瘤發(fā)病機(jī)制提供了新線索。在藥物研發(fā)方面,Romas 細(xì)胞系是篩選抗淋巴瘤藥物的重要模型,新型的靶向 JAK/STAT 通路抑制劑、免疫檢查點(diǎn)調(diào)節(jié)劑在該細(xì)胞系實(shí)驗中,能夠顯著抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;針對其耐藥特性開展的聯(lián)合用藥研究,也在 Romas 細(xì)胞上取得了多項突破,為克服淋巴瘤耐藥難題提供了創(chuàng)新思路。此外,Romas 細(xì)胞還用于探索淋巴瘤的免疫逃逸機(jī)制,評估新型免yi治療策略的有效性,持續(xù)推動淋巴瘤診療技術(shù)的革新與進(jìn)步。
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