BY-0082 THP-1人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
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- 型號(hào) BY-0082
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THP-1人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
THP-1人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系是研究單核細(xì)胞及巨噬細(xì)胞生物學(xué)特性的經(jīng)典模型，因具備可誘導(dǎo)分化為巨噬細(xì)胞的du特能力及穩(wěn)定的單核細(xì)胞表型，在免疫調(diào)控、炎癥反應(yīng)及白血病發(fā)病機(jī)制研究中應(yīng)用廣泛，為解析單核細(xì)胞的分化過(guò)程及免疫細(xì)胞與疾病的關(guān)聯(lián)提供了可靠工具。
來(lái)源與背景：該細(xì)胞系于 1980 年從一名 1 歲急性單核細(xì)胞白血病患兒的外周血中分離建立，屬于急性髓系白血病細(xì)胞系。與其他單核細(xì)胞系（如 U937）相比，其更貼近正常單核細(xì)胞的分化潛能，尤其適合研究單核細(xì)胞向巨噬細(xì)胞的分化機(jī)制，為探索 “白血病細(xì)胞惡性增殖 - 分化異?！?的分子關(guān)聯(lián)提供了理想樣本，填bu了單核細(xì)胞白血病分化研究模型的空白。其明確的來(lái)源和長(zhǎng)期傳代穩(wěn)定性，使其成為免疫細(xì)胞生物學(xué)與白血病研究的重要橋梁。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈圓形或類圓形，懸浮生長(zhǎng)為主，部分細(xì)胞輕微貼壁，細(xì)胞質(zhì)豐富，可見(jiàn)少量嗜天青顆粒，細(xì)胞核呈腎形或馬蹄形，核質(zhì)比高，具有單核細(xì)胞的典型形態(tài)特征。核心特性為可誘導(dǎo)分化能力，經(jīng)佛波酯（PMA）處理后，可迅速分化為貼壁的巨噬細(xì)胞，形態(tài)變?yōu)椴灰?guī)則形，伸出偽足，吞噬能力顯著增強(qiáng)，CD14、CD68 等巨噬細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)上調(diào)，這一特性使其成為研究單核 - 巨噬細(xì)胞分化的理想模型；單核細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)，高表達(dá) CD11b、CD13、CD33，部分表達(dá) CD14，符合單核細(xì)胞的分子表型；高增殖活性，體外培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞倍增時(shí)間約 36-48 小時(shí)，克隆形成率約 50%，高于多數(shù)原代單核細(xì)胞，能在體外持續(xù)增殖，解決了原代單核細(xì)胞難以長(zhǎng)期培養(yǎng)的問(wèn)題。傳代時(shí)無(wú)需消化處理，直接吹打懸浮細(xì)胞即可，傳代比例 1:3-1:5，連續(xù)傳代 50 次后仍保持分化潛能，但增殖速率可能略有下降。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 2mM 谷an酰胺和 50μM 2 - 巰基乙醇以維持細(xì)胞活性及分化潛能。培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度，每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基，細(xì)胞密度維持在 2×10?-1×10?個(gè) /ml 之間，密度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞聚團(tuán)并影響活性。與貼壁細(xì)胞系不同，其對(duì)振蕩敏感，培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)避免劇烈晃動(dòng)，傳代時(shí)通過(guò)離心（1000rpm，5 分鐘）收集細(xì)胞，用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種，凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清，復(fù)蘇后存活率可達(dá) 85% 以上，復(fù)蘇后 24 小時(shí)即可恢復(fù)正常增殖。
檢測(cè)鑒定：經(jīng)微生物篩查，無(wú)支原體、細(xì)菌、真菌及常見(jiàn)病毒污染，符合實(shí)驗(yàn)細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示，CD11b、CD13、CD33 陽(yáng)性率均超過(guò) 90%，CD14 陽(yáng)性率約 30%-40%，符合單核細(xì)胞的免疫表型特征。分化功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中，PMA 處理 48 小時(shí)后，細(xì)胞貼壁率達(dá) 90% 以上，吞噬熒光微球的能力比未處理細(xì)胞提高 5-10 倍，CD68 表達(dá)上調(diào) 3-5 倍，證實(shí)其向巨噬細(xì)胞分化的能力。染色體核型分析呈現(xiàn)亞四倍體核型，存在多種染色體異常，包括 1 號(hào)染色體三體、17 號(hào)染色體缺失等，與急性單核細(xì)胞白血病患者的遺傳學(xué)改變部分吻合。
應(yīng)用領(lǐng)域：在免疫機(jī)制研究中，該細(xì)胞系常用于解析單核 - 巨噬細(xì)胞在炎癥反應(yīng)中的作用，研究發(fā)現(xiàn)其分化的巨噬細(xì)胞在脂多糖（LPS）刺激下，可大量分泌腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）、白細(xì)胞介素 - 6（IL-6）等炎癥因子，通過(guò)激活 NF-κB 信號(hào)通路參與炎癥調(diào)控，為理解炎癥反應(yīng)的分子機(jī)制提供了關(guān)鍵線索。在白血病研究方面，適用于探索單核細(xì)胞白血病的發(fā)病機(jī)制，通過(guò)研究其異常增殖與分化受阻的原因，發(fā)現(xiàn)某些融合基因的表達(dá)可抑制其向巨噬細(xì)胞分化，同時(shí)促進(jìn)細(xì)胞增殖，為白血病的靶向治療提供潛在靶點(diǎn)。在藥物篩選方面，是評(píng)估免疫調(diào)節(jié)藥物及白血病治療藥物的常用模型，通過(guò)檢測(cè)藥物對(duì)其增殖、分化及細(xì)胞因子分泌的影響，篩選能有效誘導(dǎo)白血病細(xì)胞分化或抑制炎癥反應(yīng)的候選藥物，如某些維甲酸類藥物可促進(jìn)其向成熟單核細(xì)胞分化。此外，該細(xì)胞系可用于研究巨噬細(xì)胞與腫瘤微環(huán)境的相互作用，將其分化的巨噬細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)，可觀察到巨噬細(xì)胞表型向 M2 型極化，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，為解析腫瘤微環(huán)境的免疫抑制機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
該細(xì)胞系的優(yōu)勢(shì)在于能穩(wěn)定模擬單核細(xì)胞的生物學(xué)特性及向巨噬細(xì)胞的分化過(guò)程，為研究單核 - 巨噬細(xì)胞的 “增殖 - 分化 - 功能” 調(diào)控網(wǎng)絡(luò)提供了理想模型。通過(guò)與原代單核細(xì)胞的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，可清晰識(shí)別白血病細(xì)胞與正常單核細(xì)胞在分化潛能上的差異，為單核細(xì)胞白血病的診斷和治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
總之，THP-1 人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系憑借其可誘導(dǎo)分化為巨噬細(xì)胞的du特能力、典型的單核細(xì)胞特征及穩(wěn)定的生物學(xué)特性，成為免疫細(xì)胞研究與白血病研究的重要工具，為解析單核細(xì)胞的分化機(jī)制、開(kāi)發(fā)免疫調(diào)節(jié)藥物及白血病治療方案提供了堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
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