BY-1262 ALLRPISC2012大鼠胰島干細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-1262
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- 更新時(shí)間 2025/7/24 10:02:13
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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
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ALLRPISC2012大鼠胰島干細(xì)胞系
ALLRPISC2012大鼠胰島干細(xì)胞系作為源自大鼠胰島組織的成體干細(xì)胞模型,因具備顯著的胰島細(xì)胞分化潛能及穩(wěn)定的干細(xì)胞特性,在胰島發(fā)育機(jī)制、糖尿病病理及細(xì)胞治療研究中具有重要價(jià)值,成為探究胰島干細(xì)胞功能及相關(guān)疾病治療的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)工具。
細(xì)胞特性與來源背景:該細(xì)胞系源自大鼠胰島組織,經(jīng)膠原酶消化結(jié)合流式分選(基于 Ngn3 標(biāo)志物)獲得。細(xì)胞形態(tài)呈圓形或橢圓形,胞體較小,直徑約 10-15μm,胞質(zhì)透亮,可見少量顆粒,細(xì)胞核呈圓形,核質(zhì)比高,核仁明顯。生長方式為貼壁生長,呈集落狀分布,邊緣細(xì)胞向外伸展,傳代后 24 小時(shí)貼壁率達(dá) 88%。核心參數(shù)表現(xiàn)出胰島干細(xì)胞特征:倍增時(shí)間約 65 小時(shí),連續(xù)傳代 25 次后仍保持穩(wěn)定的干細(xì)胞特性;表面標(biāo)志物表達(dá)du特,神經(jīng)元素 3(Ngn3)陽性率達(dá) 95%,配對(duì)盒基因 6(Pax6)陽性率 93%,干細(xì)胞標(biāo)志物 Sox2 陽性率 89%,而成熟胰島細(xì)胞標(biāo)志物胰島素(Insulin)、胰高血糖素(Glucagon)在基礎(chǔ)狀態(tài)下陽性率均低于 2%;具有正常的二倍體核型(染色體數(shù) 42 條),無染色體異常;無微生物污染,細(xì)胞純度達(dá) 96%,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價(jià)值:在胰島發(fā)育研究中,ALLRPISC2012 細(xì)胞經(jīng)視huang酸處理 5 天后,Ngn3 表達(dá)量增加 4.2 倍,胰島前體細(xì)胞標(biāo)志物 NeuroD 表達(dá)量提升 3.8 倍,可模擬胰島細(xì)胞的早期分化過程,為解析胰島細(xì)胞譜系形成機(jī)制提供理想模型。
在胰島 β 細(xì)胞再生研究方面,該細(xì)胞在含煙xian胺、β 細(xì)胞素的分化培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,18 天后胰島素陽性細(xì)胞率達(dá) 45%,形成類胰島樣細(xì)胞團(tuán),培養(yǎng)液中胰島素分泌量達(dá) 120μU/mL,且對(duì)葡萄糖刺激呈現(xiàn)劑量依賴性響應(yīng),高糖環(huán)境下胰島素釋放量是低糖環(huán)境的 3.2 倍,可用于探究胰島 β 細(xì)胞再生的分子調(diào)控機(jī)制。
糖尿病研究領(lǐng)域,將該細(xì)胞移植到鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病模型大鼠腹腔內(nèi),6 周后大鼠空腹血糖水平下降 55%,血清胰島素水平提升 48%,移植細(xì)胞在脾臟部位形成功能性胰島樣結(jié)構(gòu),未出現(xiàn)腫瘤形成,體現(xiàn)了其在糖尿病細(xì)胞治療中的應(yīng)用潛力。此外,該細(xì)胞在高糖環(huán)境下,抗氧化酶 SOD 活性下降 35%,凋亡率增加 28%,可用于探究高糖誘導(dǎo)的胰島干細(xì)胞損傷機(jī)制。
培養(yǎng)與保存規(guī)范:推薦使用含 12% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基,添加 15ng/mL 干細(xì)胞因子(SCF)、10ng/mL 白細(xì)胞抑制因子(LIF)及 1% 抗生素混合液,培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 2 天更換一次,以維持干細(xì)胞特性。傳代時(shí),用 PBS 沖洗細(xì)胞 2 次,加入適量細(xì)胞解離液(不含yi酶成分),37℃孵育 6-8 分鐘,待集落邊緣細(xì)胞脫落,輕輕吹打分離細(xì)胞,傳代比例為 1:2,每 6-7 天傳代一次,避免細(xì)胞過度分散影響集落形成能力。
凍存液采用培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,細(xì)胞濃度調(diào)整為 3×10?個(gè) /ml,經(jīng)程序降溫(-20℃1 小時(shí)→-80℃過夜→液氮保存)后,復(fù)蘇存活率達(dá) 86% 以上,3-4 代內(nèi)可恢復(fù)正常的生長和分化能力。運(yùn)輸采用干冰冷凍運(yùn)輸或培養(yǎng)瓶活細(xì)胞運(yùn)輸,收到細(xì)胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時(shí),更換培養(yǎng)基后觀察細(xì)胞集落形態(tài),確認(rèn)無異常漂浮物后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞系僅限科研使用,操作需符合生物安全規(guī)范。
ALLRPISC2012 大鼠胰島干細(xì)胞系以其穩(wěn)定的胰島干細(xì)胞特性、強(qiáng)大的 β 細(xì)胞分化潛能及良好的安全性,在胰島生物學(xué)研究與糖尿病細(xì)胞治療探索中發(fā)揮著重要作用,為揭示胰島發(fā)育機(jī)制和開發(fā)糖尿病新型治療策略提供了可靠的細(xì)胞平臺(tái)。
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