BY-1251 RG2 D74大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
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- 型號 BY-1251
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- 更新時間 2025/7/24 15:52:40
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RG2 [D74]大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
RG2 [D74]大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系是中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤研究的經(jīng)典模型，因能精準(zhǔn)模擬膠質(zhì)瘤的侵襲性生長特性，成為解析腦膠質(zhì)瘤發(fā)生機制及開發(fā)治療策略的核心工具，在神經(jīng)腫瘤學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
該細(xì)胞系起源于 20 世紀(jì) 70 年代，由 Benda 等研究者從甲基膽蒽誘導(dǎo)的大鼠腦膠質(zhì)瘤中分離建立，經(jīng)克隆篩選后命名為 RG2，其中 D74 亞型因具備穩(wěn)定的顱內(nèi)成瘤能力而被重點保留。與其他膠質(zhì)瘤細(xì)胞系相比，其du特之處在于顱內(nèi)接種后可沿神經(jīng)束、血管間隙侵襲生長，形成與人類膠質(zhì)母細(xì)胞瘤相似的彌漫性浸潤灶，這一特性使其成為研究腫瘤侵襲性的理想模型。
生物學(xué)特性方面，RG2 [D74] 細(xì)胞呈現(xiàn)典型的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤形態(tài)。體外培養(yǎng)時呈多角形或梭形，貼壁生長，部分細(xì)胞呈雙極或多極形態(tài)，類似神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的分支結(jié)構(gòu)；細(xì)胞核大而不規(guī)則，核仁明顯，核分裂象多見。生長特性上，其倍增時間約為 36-48 小時，在含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基中可穩(wěn)定傳代，傳至 40 代后仍保持強致瘤性，但若長期體外培養(yǎng)，侵襲能力可能略有下降，需定期通過大鼠顱內(nèi)傳代復(fù)壯。
功能特性上，該細(xì)胞系的核心價值在于模擬膠質(zhì)瘤的侵襲與耐藥機制。研究發(fā)現(xiàn)，其高表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶 - 2（MMP-2）和血管內(nèi)皮生長因子（VEGF），MMP-2 可降解腦內(nèi)基底膜成分，助力腫瘤細(xì)胞突破血腦屏障，而 VEGF 能誘導(dǎo)腫瘤新生血管形成，為其在顱內(nèi)的生長提供營養(yǎng)支持。同時，該細(xì)胞對替mo唑胺等常規(guī)hua療藥物存在一定耐藥性，這與細(xì)胞內(nèi) O?- 甲基鳥piao呤 - DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶（MGMT）的高表達(dá)密切相關(guān)，模擬了臨床膠質(zhì)瘤的hua療抵抗現(xiàn)象。
在研究應(yīng)用中，RG2 [D74] 細(xì)胞系的價值體現(xiàn)在多個領(lǐng)域。在腫瘤侵襲機制研究中，通過 Transwell 實驗結(jié)合腦切片共培養(yǎng)模型，可觀察細(xì)胞沿神經(jīng)纖維的遷移路徑，發(fā)現(xiàn)其表達(dá)的神經(jīng)鈣粘蛋白（N-cadherin）是介導(dǎo)侵襲的關(guān)鍵分子，沉默該基因后，侵襲距離縮短 40% 以上。在藥物篩選方面，該細(xì)胞系可用于評估新型靶向藥物的療效，通過構(gòu)建顱內(nèi)腫瘤模型，檢測藥物對腫瘤體積、生存期的影響，替mo唑胺與貝伐珠單抗的聯(lián)合用藥方案優(yōu)化曾依賴該模型驗證。
此外，該細(xì)胞系在基因治療研究中也具重要價值。其可高效表達(dá)外源基因，通過慢病毒介導(dǎo)的基因編輯技術(shù)，可構(gòu)建特定基因敲除或過表達(dá)的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系，用于驗證致癌基因的功能。例如，敲除 EGFRvIII 突變體后，細(xì)胞的增殖與侵襲能力顯著下降，為針對該突變的靶向治療提供了實驗依據(jù)。同時，利用其建立的顱內(nèi)腫瘤模型，可評估溶瘤病毒、免疫檢查點抑制劑的療效，推動免yi治療在腦膠質(zhì)瘤中的應(yīng)用。
培養(yǎng)與保存 RG2 [D74] 細(xì)胞需注意特定條件。體外培養(yǎng)時，需維持 37℃、5% CO?的恒溫環(huán)境，培養(yǎng)基需添加表皮生長因子（EGF）和堿性成纖維細(xì)胞生長因子（bFGF）以維持干細(xì)胞樣特性，傳代時采用 0.25% EDTA 溶液溫和消化，避免過度酶解損傷細(xì)胞表面受體。體內(nèi)傳代通過立體定位注射實現(xiàn)，將 1×10?個細(xì)胞精準(zhǔn)注入大鼠紋狀體區(qū)域，14-21 天后可形成可檢測的顱內(nèi)腫瘤，取腫瘤組織消化后可用于實驗或凍存。
凍存時，使用含 10% DMSO 的胎牛血清作為凍存液，梯度降溫后存入液氮，復(fù)蘇時 37℃水浴快速解凍，離心去除 DMSO，存活率可達(dá) 75% 以上。需注意的是，該細(xì)胞系對培養(yǎng)環(huán)境變化敏感，血清批次差異可能影響其侵襲能力，實驗中需保持培養(yǎng)條件的一致性。
與其他模型相比，RG2 [D74] 細(xì)胞系的優(yōu)勢在于顱內(nèi)成瘤的病理特征與人類膠質(zhì)瘤高度相似，且模型構(gòu)建技術(shù)成熟，實驗重復(fù)性高；但其局限性在于作為動物模型，與人膠質(zhì)瘤的遺傳背景存在差異，研究結(jié)果需結(jié)合人源腫瘤異種移植模型驗證。
總之，RG2 [D74] 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系憑借其穩(wěn)定的侵襲性表型和臨床相關(guān)性，成為連接基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化的重要橋梁，為腦膠質(zhì)瘤的機制解析和治療突破提供了不ke或缺的實驗平臺。
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