BY-0314 QGY-7703人肝癌細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0314
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- 更新時間 2025/7/17 17:24:48
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QGY-7703人肝癌細(xì)胞系
QGY-7703人肝癌細(xì)胞系是我國自主建立的重要肝癌研究模型,以高表達(dá)甲胎蛋白(AFP)、攜帶 TP53 突變及強(qiáng)體內(nèi)成瘤能力為核心特征,在肝癌發(fā)生機(jī)制、藥物敏感性評估及腫瘤標(biāo)志物研究中應(yīng)用廣泛,為解析中國人群肝癌的分子特征提供了du特實驗載體。
來源與背景:該細(xì)胞系于 20 世紀(jì) 80 年代從我國肝癌患者的手術(shù)切除腫瘤組織中分離建立,是首ge由中國科研團(tuán)隊自主構(gòu)建并穩(wěn)定傳代的肝癌細(xì)胞系。與國外肝癌細(xì)胞系(如 HepG2)相比,其更貼近中國肝癌患者的遺傳背景(尤其是 HBV 感染相關(guān)肝癌特征),我國肝癌患者中約 80% 與 HBV 感染相關(guān),而 QGY-7703 的建立填bu了具有中國人群特征的肝癌研究模型空白。作為連接臨床樣本與基礎(chǔ)研究的橋梁,其與 HepG2 等細(xì)胞系的對比研究,為揭示不同地域肝癌的分子差異提供了關(guān)鍵視角,至今仍是國內(nèi)肝癌研究的常用參照。
細(xì)胞特性:形態(tài)上呈現(xiàn)典型的上皮樣與肝細(xì)胞樣混合特征,貼壁生長且排列較松散,細(xì)胞呈多邊形或不規(guī)則形,細(xì)胞質(zhì)豐富,可見顆粒狀物質(zhì),細(xì)胞核大而畸形,核仁明顯,核質(zhì)比約 1:1.2,具有肝癌細(xì)胞的典型惡性形態(tài)。核心特性體現(xiàn)為高表達(dá) AFP,免疫組化顯示 AFP 陽性率達(dá) 85%,血清 AFP 分泌量為 150-200ng/10?細(xì)胞 / 24h,與約 60% 的原發(fā)性肝癌患者一致;TP53 功能異常,攜帶 TP53 突變,導(dǎo)致 p53 通路部分失活,DNA 損傷修復(fù)能力下降 40%;增殖與成瘤能力,體外培養(yǎng)倍增時間約 48 小時,克隆形成率約 45%,裸鼠皮下接種成瘤率 100%,6 周腫瘤體積可達(dá) 1.2±0.3cm3,腹腔接種后肝內(nèi)轉(zhuǎn)移率約 60%,顯著高于正常肝細(xì)胞。傳代時采用常規(guī)消化液處理,因貼壁中等,需消化 4-5 分鐘,傳代比例 1:3-1:5,連續(xù)傳代 50 次后仍保持核心特性穩(wěn)定。
培養(yǎng)條件:適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基,添加 1% 抗菌劑,培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。細(xì)胞密度維持在 20%-70%,過度匯合會導(dǎo)致細(xì)胞增殖速率下降 25%,且 AFP 表達(dá)量降低 15%。對葡萄糖濃度敏感,培養(yǎng)基中葡萄糖濃度低于 4mmol/L 時,細(xì)胞凋亡率從 5% 升至 20%。傳代時用含血清培養(yǎng)基終止消化,凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清,復(fù)蘇后存活率可達(dá) 80% 以上,24 小時貼壁率超過 85%,細(xì)胞功能恢復(fù)正常。
檢測鑒定:經(jīng)微生物篩查,無支原體、細(xì)菌、真菌及常見病毒污染,符合實驗細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測顯示 AFP 強(qiáng)陽性,白蛋白弱陽性,證實其肝細(xì)胞起源及惡性特征。基因測序證實存在 TP53 突變,而 HBV DNA 整合陰性,與部分非 HBV 感染相關(guān)肝癌患者一致。染色體核型分析呈現(xiàn)亞四倍體核型,存在 1 號染色體長臂擴(kuò)增、8 號染色體三體等異常,與 40% 的中國肝癌患者遺傳學(xué)改變吻合。功能驗證中,流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示細(xì)胞周期 G2/M 期比例較高,約 25%,證實其增殖活躍。
應(yīng)用領(lǐng)域:在肝癌標(biāo)志物研究中,該細(xì)胞系被用于探索 AFP 的調(diào)控機(jī)制,發(fā)現(xiàn) HNF4α 可上調(diào) AFP 啟動子活性,使 AFP 表達(dá)量增加 30%,為理解 AFP 在肝癌中的高表達(dá)提供了分子依據(jù)。在藥物敏感性研究中,常用于評估hua療藥物對肝癌的療效,研究發(fā)現(xiàn)阿mei素對其 IC50 值約為 0.8μM,聯(lián)合索拉非尼后抑制率從單獨(dú)用藥的 40% 提升至 65%。在轉(zhuǎn)移機(jī)制研究中,通過 Transwell 實驗發(fā)現(xiàn),沉默 MMP-2 基因可使穿膜細(xì)胞數(shù)減少 50%,證實 MMP-2 在肝癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用。此外,該細(xì)胞系可用于研究肝癌細(xì)胞與肝星狀細(xì)胞的相互作用,發(fā)現(xiàn)其分泌的 TGF-β1 可促進(jìn)肝星狀細(xì)胞活化,為肝癌微環(huán)境研究提供了實驗基礎(chǔ)。
與其他肝癌細(xì)胞系相比,QGY-7703 的優(yōu)勢在于其源自中國肝癌患者,更貼近國內(nèi)肝癌的臨床特征,且高表達(dá) AFP,能較好地模擬 AFP 陽性肝癌的生物學(xué)行為。通過該細(xì)胞系的研究,為肝癌的診斷標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)及治療策略開發(fā)提供了重要實驗依據(jù),持續(xù)推動肝癌基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化的結(jié)合。
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