BY-0209 NCI-H596人肺腺鱗癌細(xì)胞系
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- 公司名稱(chēng) 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 ATCC
- 型號(hào) BY-0209
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/7/17 16:27:49
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NCI-H596人肺腺鱗癌細(xì)胞系
NCI-H596人肺腺鱗癌細(xì)胞系是研究肺腺鱗癌這一特殊亞型的標(biāo)gan模型，以腺鱗雙表型共存、KRAS 驅(qū)動(dòng)及強(qiáng)侵襲特性為顯著特征，在肺腺鱗癌的亞型轉(zhuǎn)化機(jī)制、異質(zhì)性研究及多靶點(diǎn)藥物研發(fā)中具有不可替代的價(jià)值，為解析這種兼具腺癌與鱗癌生物學(xué)行為的復(fù)雜腫瘤提供了精準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)載體。
來(lái)源與背景：該細(xì)胞系于 1981 年從 56 歲男性肺腺鱗癌患者的胸腔積液中分離建立，是目前國(guó)際上應(yīng)用zui廣泛的肺腺鱗癌研究模型。肺腺鱗癌作為一種少見(jiàn)的肺癌亞型（占比 2%-5%），因同時(shí)包含腺癌和鱗癌兩種成分，臨床治療響應(yīng)差、預(yù)后較單純腺癌或鱗癌更差，5 年生存率僅為 15%-20%。與單純肺腺癌（如 A549）或鱗癌細(xì)胞系（如 SK-MES-1）相比，NCI-H596 的du特jia值在于其保留了兩種亞型的混合特征，尤其適合研究腫瘤異質(zhì)性及亞型間的轉(zhuǎn)化規(guī)律。其明確的胸腔積液來(lái)源和長(zhǎng)期傳代穩(wěn)定性，使其既能模擬原發(fā)灶的腺鱗混合特性，又能反映晚期腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移潛能，至今仍是肺腺鱗癌基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化的核心工具。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈現(xiàn)典型的腺鱗混合特征，貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞群體中，約 60% 呈多邊形腺上皮樣（含黏液空泡），40% 呈梭形鱗狀上皮樣（含角質(zhì)顆粒），兩種形態(tài)細(xì)胞交織排列，無(wú)明顯界限。細(xì)胞核普遍大而畸形，核仁顯著，核質(zhì)比 1:1.3，部分細(xì)胞可見(jiàn)多核現(xiàn)象，體現(xiàn)高度惡性腫瘤的形態(tài)學(xué)特征。核心特性包括：雙標(biāo)志物共表達(dá)，免疫熒光顯示 70% 細(xì)胞同時(shí)表達(dá)腺癌標(biāo)志物 CK7、TTF-1 和鱗癌標(biāo)志物 CK5/6、p63，其中 TTF-1 與 p63 的共定位率達(dá) 55%，wan美復(fù)現(xiàn)臨床肺腺鱗癌的表型異質(zhì)性；KRAS 驅(qū)動(dòng)的增殖，攜帶 KRAS G12C 熱點(diǎn)突變，導(dǎo)致 MAPK 通路持續(xù)激活，EGF 刺激可使磷酸化 ERK 水平升高 2.3 倍，細(xì)胞增殖速率提升 20%，與 30% 臨床病例的驅(qū)動(dòng)突變特征一致；強(qiáng)侵襲轉(zhuǎn)移能力，Transwell 實(shí)驗(yàn)中穿膜細(xì)胞數(shù)是 A549 的 1.8 倍，裸鼠尾靜脈注射后 6 周肺轉(zhuǎn)移率達(dá) 65%，高于多數(shù)單純肺腺癌細(xì)胞系。傳代時(shí)需消化 3-5 分鐘（因貼壁較牢），傳代比例 1:2-1:4，連續(xù)傳代 50 次后，鱗癌標(biāo)志物表達(dá)量可能下降 10%-15%，但雙表型特征仍穩(wěn)定保留。
培養(yǎng)條件：最適培養(yǎng)基為含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640（添加 1% 青mei素 - 鏈mei素），培養(yǎng)環(huán)境需嚴(yán)格控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。細(xì)胞密度需維持在 20%-70%，當(dāng)密度超過(guò) 80% 時(shí)，鱗癌樣細(xì)胞比例會(huì)從 40% 升至 55%-60%，伴隨 p63 表達(dá)上調(diào)，提示細(xì)胞密度是維持腺鱗比例平衡的關(guān)鍵因素。對(duì)血清質(zhì)量敏感，采用低批次胎牛血清時(shí)，細(xì)胞凋亡率會(huì)從 5% 升至 15%-20%，且 CK7 表達(dá)量下降 25%。傳代時(shí)避免強(qiáng)力吹打，凍存液為 10% DMSO+90% 胎牛血清，復(fù)蘇后 24 小時(shí)貼壁率 90%，48 小時(shí)wan全恢復(fù)雙表型生長(zhǎng)特性。
檢測(cè)鑒定：微生物檢測(cè)證實(shí)無(wú)支原體、細(xì)菌及真菌污染，符合 CLSI 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)。基因測(cè)序明確 KRAS G12C 突變，EGFR、ALK 等驅(qū)動(dòng)基因野生型，與臨床肺腺鱗癌的基因突變譜高度吻合。染色體核型分析顯示亞三倍體核型（眾數(shù) 64-66），存在 12q13-15 擴(kuò)增（涉及 MDM2 基因）和 17p13 缺失（涉及 p53 基因），這些異常在 40% 的肺腺鱗癌患者中可檢測(cè)到。功能驗(yàn)證顯示，該細(xì)胞系的集落形成能力受 KRAS 抑制劑調(diào)控，0.5μM sotorasib 可使克隆形成率從 45% 降至 18%，證實(shí)其 KRAS 依賴(lài)特性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在異質(zhì)性機(jī)制研究中，通過(guò)單細(xì)胞測(cè)序結(jié)合該細(xì)胞系發(fā)現(xiàn)，Notch 通路激活可使腺上皮樣細(xì)胞向鱗癌樣細(xì)胞轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化效率達(dá) 30%，其中 Hes1 是關(guān)鍵調(diào)控因子，為 “Notch-Hes1-p63” 轉(zhuǎn)化軸提供了直接證據(jù)。在藥物研發(fā)中，其對(duì)單純 EGFR 抑制劑（如吉非ti尼）的敏感性較低（IC50=12μM），但與 KRAS 抑制劑聯(lián)用后 IC50 降至 2.1μM，協(xié)同指數(shù) 0.42，推動(dòng)了 “KRAS 抑制劑 + 抗血管生成藥物” 聯(lián)合方案的臨床探索。在微環(huán)境研究中，低氧（1% O?）培養(yǎng) 72 小時(shí)可使鱗癌標(biāo)志物表達(dá)上調(diào) 40%，同時(shí) VEGF 分泌增加 1.5 倍，證實(shí)缺氧微環(huán)境通過(guò) HIF-1α 促進(jìn)腺鱗轉(zhuǎn)化及血管生成，為靶向腫瘤微環(huán)境提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
與其他肺癌細(xì)胞系相比，NCI-H596 的核心優(yōu)勢(shì)在于其真實(shí)模擬了肺腺鱗癌的 “腺 - 鱗” 混合特性及基因驅(qū)動(dòng)特征，尤其適合解析腫瘤異質(zhì)性的形成機(jī)制。通過(guò)該細(xì)胞系的研究，已闡明 12 個(gè)調(diào)控腺鱗轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵基因，為開(kāi)發(fā)針對(duì)這種復(fù)雜亞型的精準(zhǔn)治療策略提供了扎實(shí)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，持續(xù)推動(dòng)肺腺鱗癌診療水平的提升。
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