BY-1233 ND7/23大鼠/小鼠神經(jīng)元融合細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1233
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- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/23 15:18:00
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ND7/23大鼠/小鼠神經(jīng)元融合細胞系
ND7/23大鼠/小鼠神經(jīng)元融合細胞系作為大鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元與小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞融合產(chǎn)生的雜交細胞模型，因兼具神經(jīng)元電生理特性與腫瘤細胞增殖能力，在疼痛信號傳導(dǎo)、神經(jīng)元分化及神經(jīng)毒性研究中具有du特jia值，成為探究外周神經(jīng)功能與神jing病理性疼痛的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系通過大鼠背根神經(jīng)節(jié)原代神經(jīng)元與小鼠 N18TG2 神經(jīng)母細胞瘤細胞融合構(gòu)建，經(jīng)克隆化篩選獲得。細胞形態(tài)在未分化狀態(tài)下呈多極形，胞體直徑約 20-30μm，發(fā)出 2-5 個細長突起，突起長度可達胞體直徑的 8-10 倍；經(jīng)誘導(dǎo)分化后，突起進一步延長并形成網(wǎng)絡(luò)狀連接，胞體體積增大 25%，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)明顯的尼氏小體。生長方式為半貼壁生長，部分細胞呈懸浮狀態(tài)，傳代后 24 小時貼壁率達 85%。核心參數(shù)表現(xiàn)出雜交細胞特征：倍增時間約 36 小時，連續(xù)傳代 50 次后染色體核型穩(wěn)定（染色體數(shù)約 68-72 條）；神經(jīng)元標志物神經(jīng)絲蛋白（NF-200）、微管相關(guān)蛋白 2（MAP2）免疫熒光陽性率分別為 92% 和 88%，同時表達神經(jīng)母細胞瘤標志物 Thy-1；具有自發(fā)動作電位，靜息膜電位約 - 65mV，動作電位幅度達 75mV；無微生物污染，細胞純度達 96%，保障實驗結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價值：在疼痛機制研究中，ND7/23 細胞經(jīng)辣椒素刺激后，瞬時受體電位香草酸亞型 1（TRPV1）通道電流增加 4.3 倍，降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）分泌量上升 3.8 倍，可模擬外周傷害性刺激引起的神經(jīng)元興奮過程，為解析痛覺信號傳導(dǎo)機制提供理想模型。神經(jīng)毒性評估方面，該細胞在hua療藥物紫shan醇處理下，突起長度縮短 42%，微管蛋白聚合度下降 35%，神經(jīng)突生長指數(shù)降低 58%，能很好地反映藥物誘導(dǎo)的外周神經(jīng)損傷，助力神經(jīng)毒性藥物的安全性評價。在神經(jīng)元分化研究領(lǐng)域，該細胞經(jīng)神經(jīng)生長因子（NGF）誘導(dǎo) 72 小時后，突觸素（Synaptophysin）表達量增加 5.2 倍，電壓門控鈉通道電流密度提升 3.6 倍，可用于探究神經(jīng)元成熟的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。此外，將該細胞與雪旺細胞共培養(yǎng)，能構(gòu)建體外神經(jīng) - 膠質(zhì)細胞相互作用模型，用于研究神經(jīng)膠質(zhì)細胞對痛覺信號的調(diào)制作用。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：基礎(chǔ)培養(yǎng)推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培養(yǎng)基，添加 2ng/ml NGF 及 1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱。誘導(dǎo)分化時采用含 2% 馬血清的培養(yǎng)基，同時加入 50ng/ml 腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF），處理時間為 5-7 天，分化率可達 65% 以上。培養(yǎng)基需每 2 天更換一次，更換時采用半量換液方式以避免擾動細胞突起。傳代時采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液處理，37℃孵育 8-10 分鐘，待細胞突起回縮后加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，傳代比例為 1:2-1:3，每 3-4 天傳代一次，維持細胞密度在 2×10?-5×10?個 /ml。凍存液配方為基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復(fù)蘇細胞存活率達 88% 以上，3-4 代內(nèi)可恢復(fù)正常的電生理活性。運輸采用 T-25 培養(yǎng)瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時，更換培養(yǎng)基后觀察細胞突起形態(tài)，確認無異常漂浮物后進行后續(xù)實驗。該細胞系僅限科研使用，操作時需避免頻繁晃動培養(yǎng)瓶，防止細胞突起斷裂。
ND7/23 大鼠 / 小鼠神經(jīng)元融合細胞系以其du特的雜交細胞特性、穩(wěn)定的神經(jīng)元功能及易于培養(yǎng)的優(yōu)勢，在神經(jīng)科學(xué)研究領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用，為揭示神經(jīng)信號傳導(dǎo)機制和開發(fā)新型鎮(zhèn)痛藥物提供了可靠的實驗平臺。
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