BY-0140 HCT 116 HCT116人結直腸腺癌細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0140
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- 更新時間 2025/7/17 16:09:08
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HCT 116 [HCT116]人結直腸腺癌細胞系
HCT 116 [HCT116]人結直腸腺癌細胞系是結直腸癌研究的重要模型,以野生型 KRAS 基因、穩(wěn)定的基因組特性及優(yōu)異的基因編輯兼容性為核心特征,在結直腸癌的基因功能研究、藥物敏感性評估及精準治療策略開發(fā)中應用廣泛,為解析結直腸癌的發(fā)生發(fā)展機制提供了可靠的實驗工具。
來源與背景:該細胞系于 1979 年從一名男性結直腸癌患者的原發(fā)灶中分離建立,屬于微衛(wèi)星不穩(wěn)定型結直腸腺癌細胞系。與轉移灶來源的細胞系(如 COLO 205)相比,其保留了更多原發(fā)腫瘤的生物學特性,尤其適合研究結直腸癌的早期發(fā)生機制。作為首ge被成功應用于 CRISPR/Cas9 基因編輯的結直腸癌細胞系,其基因組穩(wěn)定性較高,長期傳代后仍能保持關鍵基因的野生型狀態(tài),填bu了野生型 KRAS 結直腸癌研究模型的空白,至今仍是基因功能研究的常用參照。
細胞特性:形態(tài)上呈現(xiàn)典型的上皮樣特征,貼壁生長且排列緊密,細胞呈多邊形,邊界清晰,細胞質(zhì)豐富,細胞核呈圓形或橢圓形,核仁明顯,核質(zhì)比約 1:1.3,具有原發(fā)結直腸腺癌細胞的典型形態(tài)。核心特性體現(xiàn)為野生型 KRAS,不攜帶 KRAS 基因突變,這一特征與約 40% 的結直腸癌患者一致,使其成為研究非 KRAS 驅動型結直腸癌的理想模型;基因編輯優(yōu)勢,由于基因組相對穩(wěn)定,對基因編輯技術的兼容性好,基因敲除或敲入效率可達 70% 以上,顯著高于其他結直腸癌細胞系;增殖與侵襲能力,體外培養(yǎng)倍增時間約 24-36 小時,克隆形成率約 55%,裸鼠皮下接種成瘤率 100%,Transwell 實驗中穿透基質(zhì)膜的細胞數(shù)雖低于 COLO 205,但仍顯著高于正常結腸上皮細胞。傳代時采用常規(guī)消化液處理,因貼壁較牢固,需消化 3-4 分鐘,傳代比例 1:3-1:5,連續(xù)傳代 50 次后仍保持野生型 KRAS 及基因編輯的兼容性。
培養(yǎng)條件:適宜采用含 10% 胎牛血清的 McCoy's 5A 培養(yǎng)基,添加 1% 抗菌混合液以維持細胞活性。培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度,每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基,細胞密度維持在 20%-80% 之間,過度匯合會導致細胞接觸抑制明顯,增殖速率下降。與 COLO 205 相比,其對培養(yǎng)條件的適應性更強,在血清濃度波動時仍能保持較穩(wěn)定的生長狀態(tài),傳代時消化后需用含血清培養(yǎng)基終止反應,凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清,復蘇后存活率可達 85% 以上,24 小時貼壁率超過 90%,細胞功能恢復正常。
檢測鑒定:經(jīng)微生物篩查,無支原體、細菌、真菌及常見病毒污染,符合實驗細胞質(zhì)量標準。免疫細胞化學檢測顯示細胞角蛋白 20(CK20)和癌胚抗原(CEA)均呈陽性表達,CEA 表達水平為正常結腸上皮的 6-8 倍,符合結直腸腺癌細胞的表型?;驕y序證實 KRAS、BRAF 等基因均為野生型,Western blot 顯示相關信號通路處于基礎激活狀態(tài)。染色體核型分析呈現(xiàn)亞二倍體核型,存在 8 號染色體三體、17 號染色體短臂缺失等異常,與 45% 的結直腸腺癌患者遺傳學改變吻合。
應用領域:在基因功能研究中,該細胞系被廣泛用于結直腸癌相關基因的功能驗證,通過敲除或過表達特定基因,研究其在細胞增殖、凋亡、侵襲等過程中的作用,例如研究發(fā)現(xiàn) APC 基因缺失可顯著促進其增殖,為理解結直腸癌發(fā)生的 “腺瘤 - 癌” 序列提供了實驗依據(jù)。在藥物敏感性研究中,因其野生型 KRAS 特性,常用于評估抗 EGFR 藥物的療效,其對西妥昔單抗的敏感性顯著高于 KRAS 突變型細胞系,IC50 值約為 5μg/ml,為臨床篩選抗 EGFR 藥物的適用人群提供了參考。在精準治療策略開發(fā)方面,通過基因編輯構建特定基因突變的細胞模型,模擬不同亞型的結直腸癌,用于篩選個性化的治療藥物,推動了結直腸癌精準治療的發(fā)展。此外,該細胞系還可用于研究結直腸癌的hua療敏感性機制,發(fā)現(xiàn)其對 5 - 氟尿*啶的敏感性與胸苷酸合成酶的表達水平相關,為優(yōu)化hua療方案提供了線索。
與其他結直腸癌細胞系(如 COLO 205、HT-29)相比,HCT 116 的優(yōu)勢在于其野生型 KRAS 及良好的基因編輯兼容性,能更真實地模擬非 KRAS 驅動型結直腸癌的特征,為結直腸癌的基因功能研究和精準治療策略開發(fā)提供了不可替代的實驗模型,持續(xù)推動結直腸癌研究領域的發(fā)展。
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