BY-1708 NRm黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-1708
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- 更新時(shí)間 2025/8/19 14:56:55
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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
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NRm黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞系
NRm黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞系在黑化大家鼠肺部生物學(xué)研究中有著關(guān)鍵地位,為科研人員深入探究其肺成纖維細(xì)胞的特性與功能提供了穩(wěn)定的體外研究載體,有助于系統(tǒng)解析肺部的發(fā)育機(jī)制、纖維化過(guò)程及相關(guān)病理變化,對(duì)該物種的保護(hù)及相關(guān)研究工作意義重大。
黑化大家鼠多棲息于城市、鄉(xiāng)村等多種環(huán)境,其肺部系統(tǒng)為適應(yīng)復(fù)雜多變的生存條件,如空氣污染物、病原體等,進(jìn)化出了一定的適應(yīng)能力。肺成纖維細(xì)胞作為肺部結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,在維持肺組織結(jié)構(gòu)、參與損傷修復(fù)及纖維化過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。以往對(duì)黑化大家鼠肺部的研究多集中在整體層面,難以在細(xì)胞水平深入解析肺成纖維細(xì)胞的功能機(jī)制,而原代肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)存在存活時(shí)間短、傳代后功能不穩(wěn)定等問(wèn)題,極大限制了研究的深度與廣度。NRm 細(xì)胞系的建立,恰好填bu了這一研究空白。
NRm 黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞系來(lái)源于健康成年黑化大家鼠的肺組織,通過(guò)原代培養(yǎng)與特異性純化技術(shù)構(gòu)建而成。初代培養(yǎng)時(shí),將獲取的肺組織處理至合適大小,用含雙抗的 PBS 緩沖液反復(fù)沖洗以去除雜質(zhì),經(jīng)處理使細(xì)胞分離后,以適宜密度接種到含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)液中,置于 37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。初期每天更換培養(yǎng)液以淘汰非貼壁細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80% 時(shí),采用合適方式使細(xì)胞脫離瓶壁進(jìn)行傳代。目前該細(xì)胞系已穩(wěn)定傳代 35 代以上,經(jīng)檢測(cè)細(xì)胞活力始終保持在 87% 以上。
該細(xì)胞系呈現(xiàn)典型的成纖維樣形態(tài)特征:細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形,胞體修長(zhǎng),平均長(zhǎng)度約 55μm,寬度約 7μm,排列方式多為平行或漩渦狀;胞質(zhì)豐富,含有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,經(jīng)特定染色后可觀察到較多的膠原纖維前體;細(xì)胞核呈長(zhǎng)橢圓形,位于細(xì)胞中央,核質(zhì)比約為 1:4.5,具有穩(wěn)定的貼壁生長(zhǎng)特性。生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)研究顯示,NRm 細(xì)胞在 DMEM 培養(yǎng)液中生長(zhǎng)狀態(tài)最佳,最適宜的培養(yǎng)溫度為 37℃,在 10% 胎牛血清濃度下,群體倍增時(shí)間約為 72 小時(shí)。連續(xù)傳代 30 代后,細(xì)胞形態(tài)未出現(xiàn)明顯變異,核型分析顯示染色體數(shù)目穩(wěn)定,與黑化大家鼠體細(xì)胞一致,遺傳背景穩(wěn)定。
功能特性研究表明,NRm 細(xì)胞高表達(dá)肺成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)志物:波形蛋白(Vimentin)陽(yáng)性率為 98%,Ⅰ 型膠原蛋白(ColⅠ)分泌量達(dá) 35μg/10?cells/24h,成纖維細(xì)胞特異性蛋白 1(FSP-1)表達(dá)強(qiáng)度顯著高于上皮細(xì)胞系。該細(xì)胞具備活躍的基質(zhì)合成功能,能大量分泌膠原纖維、纖維連接蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分,在體外培養(yǎng)中可促進(jìn)肺組織樣結(jié)構(gòu)的形成。環(huán)境適應(yīng)實(shí)驗(yàn)顯示,當(dāng)受到炎癥因子刺激時(shí),細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 -β1(TGF-β1)的表達(dá)量會(huì)在短時(shí)間內(nèi)上調(diào),促進(jìn)細(xì)胞增殖和膠原合成;模擬氧化應(yīng)激后,抗氧化相關(guān)基因的表達(dá)量升高,提示其具有一定的應(yīng)激適應(yīng)能力。
在應(yīng)用價(jià)值方面,NRm 細(xì)胞系已成為多個(gè)研究領(lǐng)域的重要工具:在肺纖維化研究中,通過(guò)相關(guān)技術(shù)沉默 ColⅠ 基因后,細(xì)胞的膠原合成能力明顯下降,證實(shí)了該蛋白在肺纖維化過(guò)程中的核心作用;比較生理學(xué)研究發(fā)現(xiàn),與普通大家鼠的肺成纖維細(xì)胞相比,NRm 細(xì)胞的抗污染相關(guān)基因基礎(chǔ)表達(dá)量更高,揭示了其適應(yīng)復(fù)雜環(huán)境的分子基礎(chǔ);在藥理學(xué)領(lǐng)域,該細(xì)胞系可用于篩選抗肺纖維化藥物,研究發(fā)現(xiàn)特定藥物在一定濃度下能有效抑制細(xì)胞的過(guò)度增殖和膠原合成,且毒性較低。
作為永生化的黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞系,NRm 不僅為黑化大家鼠肺部生物學(xué)研究提供了標(biāo)準(zhǔn)化模型,其du特的環(huán)境適應(yīng)機(jī)制研究還能為嚙齒類動(dòng)物比較生理學(xué)提供新視角,在野生動(dòng)物保護(hù)、肺部疾病模型構(gòu)建等領(lǐng)域具有重要的科研與應(yīng)用價(jià)值。
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