免疫組化實(shí)驗(yàn) 代做免疫組化IHC實(shí)驗(yàn)
| 參考價(jià) | ￥ 60 |
| 訂貨量 | ≥1 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱(chēng) 上海維景生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào) 免疫組化實(shí)驗(yàn)
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時(shí)間 2023/6/15 11:00:13
- 訪問(wèn)次數(shù) 2775
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標(biāo)簽抗體偶聯(lián)beads，標(biāo)簽抗體，內(nèi)參抗體，WB實(shí)驗(yàn)服務(wù)，IP實(shí)驗(yàn)服務(wù)，ChIP實(shí)驗(yàn)服務(wù)
免疫組化實(shí)驗(yàn)主要步驟
（預(yù)實(shí)驗(yàn)免費(fèi)！常用抗體免費(fèi)?。?/span>
1. 洗載玻片:
將載玻片置于重鉻酸鉀和濃H2SO4混合液中,目的是為了是載玻片上的硅膠等除去,同時(shí)使一些肉眼看不見(jiàn)的凹凸不平的表面變平整,便于組織吸附,然后置于清水中清洗,除去殘余的重鉻酸鉀和濃H2SO4（大約沖一個(gè)小時(shí)左右）,再將載玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37°C溫箱中，將多聚賴(lài)氨酸涂布于玻片的表面，由于Lys帶正電，而大多數(shù)的組織帶負(fù)電荷，從而產(chǎn)生吸附作用。
2. 包埋組織:
先在鐵模具中加入一些液態(tài)石蠟，先稍微冷卻，然后再將待包埋的組織置于石蠟之中，并排列整齊，再將塑料模具盒蓋上，zui后加入少許液體石蠟，進(jìn)行冷凍，使石蠟變成固態(tài)。
3. 切片：
將包埋好的組織從模具上取下來(lái)，并置于石蠟切片機(jī)上，切片機(jī)通過(guò)調(diào)節(jié)上下左右來(lái)來(lái)使組織和切割方向*，然后調(diào)節(jié)切片的厚度，一般為5µm,如果比較難切，則可以適當(dāng)調(diào)整厚度，用毛筆將切割的載玻片向外拉，并用小鑷子將包含有完整組織的載玻片置于40°C溫水中。
4. 撈組織：
當(dāng)組織載玻片置于40°C溫水中之前，要先將水浴中的氣泡趕走，以免氣泡受熱上浮而貼到組織上，組織受熱展開(kāi)，是組織不起皺紋，用載玻片撈組織時(shí)，一般取載玻片的下1/3或者下1/2一般每種組織撈5-6張，其中2-3張是備用的，每張載玻片上通常撈兩份組織，做對(duì)照使用，這樣形成的誤差就比較小了，而且撈載玻片的時(shí)候方向*，以便觀察，再將撈出來(lái)的載玻片置于架子上，放入37°C溫箱中烘干。
5. 脫蠟：
依次將載玻片放入二甲苯-二甲苯-*酒精-*酒精-95%酒精-90%酒精-80%酒精-70%酒精，起脫蠟作用的主要是二甲苯,依據(jù)的是相似相溶的原理.一般在每個(gè)試劑中放10min,天氣熱可以少放幾分鐘,相反,天氣較冷的話,就要適當(dāng)延長(zhǎng)脫蠟時(shí)間,一般為12-15min。
6. 抗原修復(fù)：
脫蠟后在清水中沖洗一段時(shí)間，加入3%H2O2浸泡10min，從而除去內(nèi)源性的過(guò)氧化氫酶，然后倒掉H2O2，在清水中洗兩次，再加入檸檬酸緩沖液，放入微波爐中蒸煮3min（中火），一般剛到沸騰即可，冷卻至室溫，然后再蒸煮一次，冷卻至室溫，蒸煮的目的是為了使抗原的位點(diǎn)暴露出來(lái)。
7. 血清封閉：
冷卻至室溫后，將檸檬酸緩沖液倒掉，水洗2次，并將載玻片置于PBS中5min，洗2次，擦干組織周?chē)?/span>PBS液，馬上加上血清，使一些非特異性的位點(diǎn)封閉起來(lái)，然后放入37°C溫箱中半小時(shí)。血清稀釋10倍（900µlPBS：100µl血清封閉液）。
8. 加一抗：
將溫箱中的載玻片取出，用吸水紙擦干載玻片反面和正面組織周?chē)难澹右豢?，如果做?duì)照實(shí)驗(yàn)，就在對(duì)照的組織上加PBS。加完一抗后于4°C冰箱中保存過(guò)夜。
9. 加二抗：
將載玻片從冰箱中取出，放入PBS中洗3次，每次5min，擦干組織周?chē)?/span>PBS后加上二抗,然后置于37°C溫箱中半小時(shí)。
10. 加SABC:
將片子從溫箱中取出, 放入PBS中洗3次，每次5min，擦干組織周?chē)?/span>PBS后加上SABC, 然后置于37°C溫箱中半小時(shí)。SABC稀釋100倍（990µlPBS：10µlSABC）。
11. 加顯色劑：
將片子從溫箱中取出, 放入PBS中洗3次，每次5min，擦干組織周?chē)?/span>PBS后加上顯色劑。（顯色劑的配置：在1ml水中加1滴顯色劑A，搖勻，然后加1滴顯色劑B，搖勻，再加1滴顯色劑C，搖勻） A：DAB B：H2O2 C：磷酸緩沖液
12. 復(fù)染：
將顯色后的片子用清水沖洗一段時(shí)間后，浸泡于蘇木精中染色，一般動(dòng)物組織為半分鐘，植物組織3-5min。
13. 脫水：
將復(fù)染后的片子置于水中沖洗后，依次將載玻片放入70%酒精-80%酒精-90%酒精-95%酒精-*酒精-*酒精-二甲苯-二甲苯。每個(gè)試劑中放置2min，zui后浸泡在二甲苯中，搬到通風(fēng)柜中。
14. 封片：
用中性樹(shù)膠滴在組織旁邊，再用蓋玻片蓋上，要先放平一側(cè)，然后輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好片子后置于通風(fēng)柜中晾干。
上海維景生物科技有限公司是一家專(zhuān)注生命科學(xué)領(lǐng)域的企業(yè)，借助中科院細(xì)胞與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，擁有強(qiáng)大的資金背景支持和專(zhuān)業(yè)的團(tuán)隊(duì)等資源。公司面向全國(guó)市場(chǎng)，迅速發(fā)展，廣納英才，現(xiàn)已建成專(zhuān)業(yè)生命科學(xué)產(chǎn)品銷(xiāo)售團(tuán)隊(duì)，其中大部份是在生命科學(xué)市場(chǎng)上工作多年，有豐富的銷(xiāo)售經(jīng)驗(yàn)，也有良好的客戶(hù)資源，銷(xiāo)售渠道全面覆蓋華東大部分工業(yè)以及科研客戶(hù)，團(tuán)隊(duì)中免疫學(xué)及相關(guān)專(zhuān)業(yè)碩士以上學(xué)歷人士達(dá)50%，有較強(qiáng)的能力，在針對(duì)專(zhuān)業(yè)技術(shù)服務(wù)中能夠提供完善周到的專(zhuān)業(yè)化服務(wù)，對(duì)客戶(hù)在使用產(chǎn)品過(guò)程中提出的問(wèn)題能滿(mǎn)意答復(fù)，并可及時(shí)傳遞的產(chǎn)品技術(shù)資料信息。
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生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目列表
預(yù)實(shí)驗(yàn)免費(fèi)！常用抗體免費(fèi)！
分子克隆技術(shù)服務(wù)：載體構(gòu)建、定點(diǎn)突變、RT-PCR、熒光定量PCR、SNP分型等；
蛋白免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)：Western Blot檢測(cè)、免疫組化檢測(cè)、流式檢測(cè)與分選，細(xì)胞凋亡檢測(cè)與分析、抗體制備等。
細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)：細(xì)胞培養(yǎng)、原代培養(yǎng)、細(xì)胞株構(gòu)建、三維培養(yǎng)、病毒包裝（慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄和腺病毒）、細(xì)胞分選與培養(yǎng)、細(xì)胞侵襲與催化、共聚焦檢測(cè)等技術(shù)
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