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如何正確的使用紙色譜法分析樣品
2022年08月23日 17:16:36 來源:化工儀器網(wǎng) 點擊量:7068

紙色譜法又稱紙層析法,是用紙作為載體,通過分裂系的在同一介質(zhì)中分散速度不同來分析樣品成分的色譜法,具有微量、快速、高效和敏捷度高等特點。從原理上來說,紙色譜涉及分配、吸附和離子交換等機理,相對復雜,但是分配機理起主要作用,因此紙色譜法屬于分配色譜。

  【化工儀器網(wǎng) 行業(yè)百態(tài)】紙色譜法又稱紙層析法,是用紙作為載體,通過分裂系的在同一介質(zhì)中分散速度不同來分析樣品成分的色譜法,具有微量、快速、高效和敏捷度高等特點。從原理上來說,紙色譜涉及分配、吸附和離子交換等機理,相對復雜,但是分配機理起主要作用,因此紙色譜法屬于分配色譜。
 
  由于紙色譜法適用于多官能團或高極性的親水化合物如醇類、羥基酸、氨基酸、糖類和黃酮類等化合物的分離檢驗,因此在巖礦分析與鑒定以及藥品檢測領域有較為廣泛的應用。
 
  其中,用于藥品檢測時根據(jù)檢測內(nèi)容的不同,采取的措施也不同。具體來說,當采用紙色譜法進行藥品鑒別時,供試品在色譜圖中所顯主斑點的位置與顏色(或熒光),應與對照標準物質(zhì)在色譜圖中所顯主斑點相同;進行藥品純度檢查時,取一定量的供試品,經(jīng)展開后,按各品種項下的規(guī)定,檢視其所顯雜質(zhì)斑點的個數(shù)和呈色深度(或熒光強度);進行藥品含量測定時,將待測色譜斑點剪下經(jīng)洗脫后,再用適宜的方法測定。
 
  紙色譜法的準備工作
 
  紙色譜法根據(jù)操作方法的不同又可以分為上行法與下行法,不過用到的儀器和材料大同小異。
 
  進行紙色譜分析前應準備好展開容器(通常為圓形或長方形玻璃缸,缸上具有磨口玻璃蓋,應能密閉)、點樣器、色譜濾紙。其中點樣器需要保證能使點樣位置正確、集中,一般采用平口微量注射器或定量毛細管(無毛刺);而色譜濾紙需做到質(zhì)地均勻平整,具有一定機械強度不含影響展開效果的雜質(zhì),也不會與所用顯色劑起作用,以免影響分離和鑒別效果,必要時可進行處理后再用。
 
  而在進行上行法時,需要在展開容器蓋上的孔中加塞,塞中插入玻璃懸鉤,以便將點樣后的色譜濾紙掛在鉤上,并除去溶劑槽和支架,并且使用的色譜濾紙長控制在 25cm左右,寬度則按需要而定,必要時可將色譜濾紙卷成筒形,點樣基線距底邊約 2.5cm。
 
  進行下行法時,需要在支架架起展開容器,并用玻棒壓住色譜濾紙,同時,色譜紙按纖維長絲方向切成適當大小的紙條,使色譜濾紙上端能足夠浸入溶劑槽內(nèi)的展開劑中,并使點樣基線能在溶劑槽側(cè)的玻璃支持棒下數(shù)厘米處,必要時,可在色譜濾紙下端切成鋸齒形便于展開劑向下移動。
 
  紙色譜法的操作方法
 
  進行紙色譜法時,應先將供試品溶解于適宜的溶劑中制成一定濃度的溶液,然后用微量注射器或定量毛細管吸取溶液,點于點樣基線上,一次點樣量不超過 10µl。
 
  如果采用的是上行法,則應該在展開容器中加入適量展開劑,靜置至展開劑蒸氣飽和后,再下降懸鉤,使色譜濾紙浸入展開劑約 1cm,展開劑即經(jīng)毛細作用沿色譜濾紙上升,除另有規(guī)定外,一般展開至約 15cm 后,取出晾干,按規(guī)定方法檢視。展開可以單向展開,即向一個方向進行;也可進行雙向展開,即先向一個方向展開、取出,待展開劑完全揮發(fā)后,將濾紙轉(zhuǎn)動 90°,再用原展開劑或另一種展開劑進行展開。亦可多次展開和連續(xù)展開等。
 
  如果采用下行法,則應該將點樣后的色譜濾紙的點樣端放在溶劑槽內(nèi)并用玻棒壓住,使色譜濾紙通過槽側(cè)玻璃支持棒自然下垂,點樣基線在壓紙棒下數(shù)厘米處。展開前,展開缸內(nèi)用各品種項下規(guī)定的溶劑的蒸氣使之飽和,一般可在展開缸底部放一裝有規(guī)定溶劑的平皿,或?qū)⒈灰?guī)定溶劑潤濕的濾紙條附著在展開缸內(nèi)壁上,放置一定時間,待溶劑揮發(fā)使缸內(nèi)充滿飽和蒸氣。然后小心添加展開劑至溶劑槽內(nèi),使色譜濾紙的上端浸沒在槽內(nèi)的展開劑中。展開劑即經(jīng)毛細作用沿色譜濾紙移動進行展開,展開過程中避免色譜濾紙受強光照射,展開至規(guī)定的距離后,取出色譜濾紙,標明展開劑前沿位置,待展開劑揮散后,按規(guī)定方法檢測色譜斑點。
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